SA和MJA誘導的糖基轉移酶基因特異啟動子元件與功能分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、糖基轉移酶(glycosyltransferase，GTs)是一種在次級代謝的糖基化過程中，催化糖基與特異受體分子結合的酶。GTs在能量儲存、細胞壁結構、細胞間通訊及宿主-病原間相互作用中發(fā)揮巨大作用。由于GT對于植物生命活動的重要性及其潛在的經濟價值，已受到人們的廣泛關注。 本實驗室從W38型煙草克隆了一個新的煙草糖基轉移酶基因sm-Ngt1，它受茉莉酸甲酯(methyl jasmonate，MeJA)和水楊酸（salicyl

2、ic acid，SA）的雙重誘導。為了了解雙重誘導的機理以及存在的作用元件，李靜等構建了該基因5′端-1150～0 bp上游調控區(qū)和Gus報告基因的啟動子缺失表達載體，確定了在-800～- 524 bp區(qū)域存在明顯的SA和MeJA誘導特征。在此基礎上，本文對-800～-524 bp區(qū)域進行了進一步研究，取得了如下結果： 1. 構建了-800～-524 bp區(qū)域的4個5′ 端缺失表達載體，利用農桿菌介導的葉盤轉化法，獲得轉基因植株

3、，不同片段載體轉基因植株的陽性率在50～71％。 2. 通過Southern雜交確定了陽性植株中外源片段的插入拷貝數(shù)大多數(shù)為單拷貝，少數(shù)為2個拷貝，檢測的植株中未出現(xiàn)多拷貝。 3. 對陽性轉基因煙草植株GUS誘導活性的定量分析結果表明：在構建的4個表達載體中，啟動子片段B1的基礎表達水平非常低，并且不同轉基因植株中都存在SA和 MeJA雙重誘導特征；片段B2和B3基礎表達水平較高，不同轉基因植株對SA和 MeJA的反應不

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