干擾YAP1對(duì)食管癌Eca-109細(xì)胞生物學(xué)功能的影響.pdf

1、目的：應(yīng)用RNAi技術(shù)研究Yes相關(guān)蛋白1（Yes-associated protein1， YAP1）對(duì)Eca-109細(xì)胞生物學(xué)功能的影響，為進(jìn)一步研究YAP1在食管癌發(fā)生、發(fā)展中的作用以及食管癌基因靶向治療方向提供一定的理論基礎(chǔ)。
　　方法：由上海吉?jiǎng)P基因化學(xué)技術(shù)有限公司構(gòu)建包含針對(duì)YAP1基因的shRNA慢病毒載體，將食管癌Eca-109細(xì)胞分為三組（慢病毒轉(zhuǎn)染組、空病毒轉(zhuǎn)染組、空白對(duì)照組），再用慢病毒載體、空病毒載體分別轉(zhuǎn)

2、染至食管癌Eca-109細(xì)胞，采用qPCR和蛋白印跡法檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后食管癌Eca-109細(xì)胞中YAP1 mRNA和蛋白以及P53蛋白的表達(dá)情況；流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期、凋亡情況；CCK8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的增殖情況變化。并對(duì)以上結(jié)果通過(guò)SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果：慢病毒轉(zhuǎn)染組細(xì)胞內(nèi)YAP1 mRNA和蛋白表達(dá)量低于空白對(duì)照組和空病毒轉(zhuǎn)染組，P53基因表達(dá)量高于空白對(duì)照組和空病毒轉(zhuǎn)染組；Eca-109細(xì)胞轉(zhuǎn)染組增值率從

3、第3天開(kāi)始低于空病毒轉(zhuǎn)染組及空白對(duì)照組（P＜0.05）；慢病毒轉(zhuǎn)染組細(xì)胞G1期比例較空白對(duì)照組和空病毒轉(zhuǎn)染組增高（P＜0.05），早期凋亡率明顯增加（P＜0.05），以上差距均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：結(jié)果顯示干擾 YAP1可成功誘導(dǎo) Eca-109細(xì)胞凋亡，降低Eca-109細(xì)胞的增殖能力，且YAP1抗凋亡及降低食管癌Eca-109細(xì)胞增殖能力的作用可能部分與P53基因相關(guān)。干擾YAP1可能成為食管癌基因靶向治療的進(jìn)一步研究方向