MiR-140在骨肉瘤組織中的表達及其對骨肉瘤細胞惡性生物學(xué)表型的影響.pdf

1、目的：
　　檢測骨肉瘤組織標本及細胞株中miRNA-140的表達情況，探討miRNA-140對骨肉瘤細胞生物學(xué)行為包括細胞增殖、細胞凋亡和細胞侵襲的影響及其調(diào)控作用的分子機制。
　　方法：
　　臨床上收集南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院、南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院和江西省腫瘤醫(yī)院40例骨肉瘤組織標本，采用實時熒光定量RT-PCR的方法檢測所收集到的組織標本和骨肉瘤細胞株（U2OS）中miR-140的表達。用脂質(zhì)體法將miR-140mim

2、ic（模擬物）和si-HDAC4轉(zhuǎn)染至U2細胞中；實驗設(shè)置為轉(zhuǎn)染組、NC組和Blank組，RT-PCR檢測miR-140和HDAC4核酸水平，Westernblot檢測HDAC4及HIF-1的蛋白水平表達；CCK-8法檢測增殖，流式細胞術(shù)檢測凋亡，Transwell小室檢測侵襲。熒光素酶報告實驗驗證HDAC4是否為miR-140的靶基因。
　　結(jié)果：
　　40對骨肉瘤組織標本中有29例骨肉瘤組織中miR-140的表達明顯低于

3、與之其對應(yīng)的瘤旁組織（P＜0.05）。轉(zhuǎn)染miR-140組的U2細胞中miRNA-140的表達水平明顯升高，HDAC4的表達下降（P＜0.05）。轉(zhuǎn)染miR-140組的U2細胞增殖能力明顯下降，凋亡率增加，侵襲能力下降（P＜0.05）；螢光素酶驗證實驗結(jié)果顯示HDAC4是miR-140的一個靶基因。轉(zhuǎn)染siHDAC4片段后U2細胞中HDAC4的表達明顯降低（P＜0.05）。siHDAC4后U2細胞增殖能力下降（P＜0.05），凋亡率增加