探討重組人促紅細胞生成素改善血管性癡呆大鼠認知功能的可能機制.pdf

1、目的：
　　研究重組人促紅細胞生成素（rhEPO）改善血管性癡呆大鼠認知功能的可能的作用機制。
　　方法：
　　將40只清潔級雄性SD大鼠，經Morris水迷宮篩選合格后，隨機分為五組：假手術組、2VO組、2VO+rhEPO組、2VO+rhEPO+AG490（JAK2抑制劑）組、2VO+AG490組，每組8只。結扎雙側頸總動脈（2VO）建立血管性癡呆模型。造模3天后，各組分別腹腔給予AG490（5mg/kg）或等劑量的

2、二甲基亞砜（DMSO，AG490的溶媒），30分鐘后鼻腔給予rhEPO（150U/125μ l）或等量的生理鹽水，每周給藥1次，共8次。8周后行Morris水迷宮試驗檢測各組大鼠的空間學習及記憶能力。HE染色觀察各組大鼠海馬 CA1區(qū)、皮層神經細胞形態(tài)學變化；電鏡觀察各組海馬神經元超微結構。
　　結果：
　　1.行為學測試結果顯示：（1）定位航行實驗：逃避潛伏期越短，動物的學習能力越強；隨著訓練天數(shù)的增加，各組大鼠逃避潛伏期

3、明顯縮短。2VO+rhEPO組平均逃避潛伏期明顯低于2VO組、2VO+rhEPO+AG490組、2VO+AG490組且差異均具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），與假手術組比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。（2）空間探索實驗：穿越平臺次數(shù)越多，動物的記憶能力越強。1）2VO+rhEPO組穿越平臺次數(shù)明顯高于2VO組、2VO+rhEPO+AG490組、2VO+AG490組差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），與假手術組相比差異無統(tǒng)計學意義（P

4、＞0.05）。2）目標象限停留時間：目標象限停留時間越長，動物的記憶能力越強；結果顯示，5組大鼠在目標象限停留的時間比較差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。2.HE染色結果：①假手術組海馬 CA1區(qū)細胞排列整齊，細胞形態(tài)正常，皮層可見大量錐體細胞，尼氏體豐富，胞核、軸突清晰可見；2VO組海馬CA1區(qū)細胞排列紊亂，可見胞體萎縮，核深染，核固縮，核溶解，皮層錐體細胞零星存在，軸突消失；2VO+rhEPO組:海馬 CA1區(qū)細胞排列相對整齊，細

5、胞結構與正常細胞接近，偶見胞體縮小，皮層錐體細胞較多，軸突、胞核結構尚清楚；2VO+rhEPO+AG490組、2VO+AG490海馬CA1區(qū)及皮層神經細胞形態(tài)學改變與2VO組類似。②電鏡結果顯示：假手術組細胞輪廓清晰，染色質均勻分布；可見豐富的線粒體、粗面內質網和游離核糖體以及高爾基復合體；2VO組細胞輪廓模糊，異染色質呈現(xiàn)多發(fā)高密度塊狀分布；核周細胞器減少、崩解、消失；2VO+rhEPO組細胞輪廓尚清晰，核內染色質呈現(xiàn)不規(guī)則高密度點狀