簡介:巴氏桿菌屬曼氏桿菌屬里氏桿菌屬嗜血桿菌屬放線桿菌屬,巴氏桿菌科及相關(guān)屬,1,第十八章巴氏桿菌科及相關(guān)屬,巴氏桿菌屬曼氏桿菌屬從巴氏桿菌屬中分出里氏桿菌屬嗜血桿菌屬放線桿菌屬泰勒菌屬,2,重點介紹,巴氏桿菌屬嗜血桿菌屬放線桿菌屬,3,第一節(jié)巴氏桿菌屬,為一類微小、粗短、卵圓形的G-桿菌,由法國微生物學(xué)家、化學(xué)家巴斯德最早發(fā)現(xiàn),故名。目前已報道有20多種,以多殺性巴氏桿菌在獸醫(yī)學(xué)上最為重要。,4,本屬細(xì)菌的共同特性,1、G-、細(xì)小短桿菌;兩極染色;無鞭毛;無芽胞;2、需氧或兼性厭氧;3、普通培養(yǎng)基多生長不良,血或血清可促進(jìn)生長;4、分解糖類產(chǎn)酸不產(chǎn)氣;不液化明膠;5、氧化酶陽性。,5,多殺性巴氏桿菌,多殺亞種敗血亞種殺禽亞種,6,多殺性巴氏桿菌,形態(tài)特性培養(yǎng)特性生化特性抵抗力抗原結(jié)構(gòu)致病性微生物學(xué)診斷,7,1、多殺性巴氏桿菌的形態(tài)特性,G-、細(xì)小短桿菌,兩端純圓,中央凸起,近似橢圓形。無芽胞,無鞭毛,有莢膜。兩極染色。,,多殺性巴氏桿菌模式圖,8,2、多殺性巴氏桿菌的培養(yǎng)特性,需氧或兼性厭氧;最適溫度37℃,PH7274。普通培養(yǎng)基中加蛋白胨、酪蛋白水解物、血液、血清或微量血紅蛋白時可促進(jìn)生長。菌落形態(tài)血清瓊脂淡灰白、露珠樣小菌落,邊緣整齊、表面光滑。血液瓊脂濕潤、水滴樣小菌落,不溶血。血清肉湯或1胰蛋白胨肉湯均勻混濁,軸性沉淀,形成菌環(huán)。,9,根據(jù)有無熒光及熒光色彩,可分為3種菌落類型FG型菌落小,藍(lán)綠色帶金光,邊緣有狹窄的紅黃光帶,對豬、牛、羊等為強毒菌,對雞等禽類的毒力弱。FO型菌落大,桔紅色帶金光,邊緣有乳白色光帶,對雞及兔等為強毒菌,對豬、牛、羊等家畜的毒力則微弱。FG型和FO型可以發(fā)生互相轉(zhuǎn)變。NF型上述2型經(jīng)多次傳代后,毒力降低或轉(zhuǎn)為無毒力,不帶熒光也無毒力。,新分離的強毒菌,血清瓊脂上的菌落在45度折光下觀察時,在菌落的表面可看到熒光。,10,粘液型(M型)菌落大,有粘稠性,對小鼠有中等毒力;平滑型(熒光)菌落中等大小,對小鼠毒力很強;粗糙型(藍(lán)色)菌落小,對小鼠毒力弱,能自家凝集。粗糙型無莢膜,而粘液型和平滑型均有莢膜,成分為透明質(zhì)酸,國外常把本菌在瓊脂上的菌落分為3種類型,11,糖類利用情況分解葡、蔗、果、甘露糖和半乳糖,產(chǎn)酸,不產(chǎn)氣。大多數(shù)發(fā)酵甘露醇。一般對乳糖、鼠李糖、楊苷、肌醇、菊糖和側(cè)金盞花醇不發(fā)酵。H2S+、NH3+、IMVIC+---、還原硝酸鹽+、還原美藍(lán)+、接觸酶+、氧化酶+、明膠液化-、石蕊牛乳-、尿素酶-、賴氨酸脫羧酶-等,3、多殺性巴氏桿菌的生化特性,12,4、多殺性巴氏桿菌的抵抗力,本菌抵抗力不強易被普通的消毒藥、陽光或熱殺死。3石炭酸、3福爾馬林、10石灰乳、05L氫氧化鈉、01升汞及2來蘇兒經(jīng)12MIN可被殺死。在水浴56℃15MIN、60℃10MIN內(nèi)被殺死。直射陽光下曝曬10MIN可失活。,13,5、多殺性巴氏桿菌的抗原結(jié)構(gòu),抗原結(jié)構(gòu)復(fù)雜,主要有莢膜抗原和菌體抗原。莢膜抗原有型的特異性及免疫原性。,莢膜抗原共有6個用大寫英文字母表示菌體抗原(O抗原)共有16個型用阿拉伯?dāng)?shù)字表示我國禽多殺性巴氏桿菌以5A最多,其次是8A;豬以5A和6B為主,其次是8A和2D;牛、羊以6B最多;家兔以7A為主,其次是5A。,14,6、多殺性巴氏桿菌的致病性,可引起多種畜禽巴氏桿菌病亦稱出血性敗血癥。不同動物的巴氏桿菌,常對該種動物呈現(xiàn)較強的致病力,對其他動物較少引起交叉感染。豬巴氏桿菌病豬肺疫馬巴氏桿菌病牛巴氏桿菌病牛出血性敗血癥羊巴氏桿菌病家兔巴氏桿菌病禽巴氏桿菌病禽霍亂,又名禽出敗鹿巴氏桿菌病貂巴氏桿菌病貂出血性敗血癥駱駝巴氏桿菌病,15,毒力因子及實驗動物的感染,實驗動物小鼠極易感染,家兔、鴿感染性強毒力因子莢膜耐熱外毒素內(nèi)毒素含氮的磷酸脂多糖,16,分離培養(yǎng)新鮮病料接種于鮮血瓊脂和麥康凱瓊脂。菌落觀察麥康凱上不生長,鮮血瓊脂平板上生長,24H后,可形成淡灰色、圓形、濕潤、露珠樣小菌落,不溶血。革蘭氏染色為陰性兩極濃染的短小桿菌。血清瓊脂生長良好,于45o折光下觀察菌落熒光;生化試驗見前述,7、多殺性巴氏桿菌的微生物學(xué)診斷,17,動物感染試驗,血瓊脂培養(yǎng)物,懸浮于2ML生理鹽水中,動物死后剖檢,觀察病變,注射小白鼠、家兔,血液、肝、脾組織,美藍(lán)染色和革蘭氏染色,心血、肝、脾等組織,血瓊脂平板,觀察菌落,,,,,,,,,,18,預(yù)防,使用疫苗禽霍亂氫氧化鋁甲醛菌苗禽霍亂弱毒活菌苗禽霍亂組織滅活菌苗使用抗菌藥物喹諾酮類磺胺類鏈霉素、土霉素、氯霉素、慶大霉素及強力霉素,19,第二節(jié)曼氏桿菌屬,該屬1999年成立,至少有7個種,代表種為溶血性曼氏桿菌(MHAEMOLYTICA),原名叫溶血性巴氏桿菌,20,溶血性曼氏桿菌,形態(tài)和多殺巴氏桿菌相似,但比較大一些,長25UM,寬05UM,呈球狀或桿狀。G-、無芽胞、無鞭毛、有莢膜,兩極著色。營養(yǎng)要求不嚴(yán)格,普通培養(yǎng)基生長良好,培養(yǎng)24H后,菌落呈圓形、光滑、濕潤,半透明。在血液瓊脂上,新分離的菌落呈微弱的?溶血。連續(xù)傳代培養(yǎng),溶血性便減弱或消失。,21,發(fā)酵某些糖類產(chǎn)酸不產(chǎn)氣(如葡、麥、蔗、半乳、果、甘露醇等)。與多殺巴氏桿菌相比不產(chǎn)生靛基質(zhì)、紫乳變酸且凝固,有些菌株產(chǎn)生硫化氫。在麥康凱上生長慢,生成紅色菌落本菌的抵抗力與多殺巴氏桿菌相似。本菌按生化特性和致病力可分為兩個生物型A生物型包括1、2、5、6、7、8、9和11、12、13、14血清型;T生物型分為3、4、10、15血清型。引起牛和綿羊的肺炎、新生羔羊敗血癥。,,22,血清型,屬的水平劃分按其生化反應(yīng)和致病力可分為A和T兩個生物型根據(jù)菌體表面蛋白抗原的差異,可分為17個血清型T生物型3,4,10,15A生物型其余均屬此型溶血性曼氏桿菌包括1,2,5,6,7,8,9,12,13,14,16。代表株為血清型2,從綿羊分離,,,,,,23,致病性毒力因子包括毒素、菌毛及莢膜多糖一般認(rèn)為毒力較強的致病菌株才有致病性本菌存在于牛、羊鼻咽部等,可致牛、綿羊肺炎、新生羔羊敗血癥、羊乳腺炎等微生物學(xué)診斷從患病動物的肺、水腫液等病料中分離本菌,24,第三節(jié)里氏桿菌屬(RIEMERELLA),概述代表種為鴨疫里氏桿菌,原名鴨疫巴氏桿菌,為雛鴨傳染性漿膜炎的病原菌,25,鴨疫里默氏桿菌(RIEMERELLAANATIPESTIFER),鴨疫里默氏桿菌感染是家鴨、火雞和多種鳥類的一種接觸性傳染病。主要發(fā)生于23周齡鴨,死亡率10,也稱為新鴨病、傳染性漿膜炎。鵝也可發(fā)生,稱為鵝滲出性敗血癥。該病呈急性或慢性敗血癥,特征病變?yōu)槔w維素性心包炎、肝周炎、氣囊炎、干酪性輸卵管炎和腦膜炎;也可能發(fā)生無任何癥狀的呼吸道感染。,26,該菌曾稱為“鴨疫巴氏桿菌”為什么,形態(tài)特性與巴氏桿菌形態(tài)相似,為G-,有莢膜,無芽胞、不運動,兩極著色。菌落形態(tài)也與巴氏桿菌相同。培養(yǎng)特性在巧克力瓊脂、血瓊脂、姨酶大豆瓊脂生長良好。(但該菌培養(yǎng)時需要5的CO2)生化特性與敗血性巴氏桿菌基本相同。由于以上等等因素,曾一度把鴨疫里默氏桿菌稱為“鴨疫巴氏桿菌”,27,現(xiàn)在為什么稱為“鴨疫里默氏桿菌”,HENDRICKSON和HILBERT對該菌進(jìn)行了分離鑒定,稱為“鴨疫斐佛氏菌”BRUNER和FABRICANT認(rèn)為該菌與莫拉氏菌有較多的共同點,建議命名為“鴨疫莫拉氏菌”。第7版伯杰氏細(xì)菌學(xué)鑒定手冊列為鴨疫巴氏桿菌。第8版、第9版伯杰氏系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊列為分類地位未定種。但將該菌從莫拉氏菌、巴氏桿菌中劃分出來。SEGERS等人,根據(jù)DNARRNA雜交分析、蛋白質(zhì)、脂肪酸組成和表型特征(如不產(chǎn)生色素、產(chǎn)生呼吸醌“7甲基萘醌”)等,建議將該菌單獨列為“里默氏桿菌屬”,將該菌命名為“鴨疫里默氏桿菌”,28,抵抗力不強,對多種藥物敏感,但易形成耐藥性致病性主要感染雛鴨,以23周為主,兔和小鼠不易感,雛鵝也有感染微生物學(xué)診斷材料選擇選用纖維素性滲出物,心包液、肝或心血培養(yǎng)基選用綿羊鮮血瓊脂或巧克力瓊脂,血清型目前已發(fā)現(xiàn)21個,我國以1型為主,近年來也報道了2型存在,29,第四節(jié)嗜血桿菌屬,某養(yǎng)雞戶飼養(yǎng)的商品蛋雞,發(fā)生了一種疾病。產(chǎn)蛋率由90降至65,無死亡。發(fā)病初期表現(xiàn)發(fā)熱、精神不振,食欲減退,有時下痢。比較典型的癥狀是眼瞼和面部腫脹,流淚。從鼻道和竇腔內(nèi)流出漿液性分泌物,并有難聞氣味。嚴(yán)重者整個頭部水腫,眼垢粘著眼瞼,造成了暫時性失明。病雞呼吸困難,氣管出現(xiàn)羅音,張口伸頸或甩頭,不斷搖頭甩出泡沫狀粘液。剖檢變化主要是鼻腔和竇發(fā)生炎癥,粘膜充血水腫,表面有大量粘液和炎性滲出物的凝塊結(jié)痂,嚴(yán)重時氣管粘膜也有類似的炎癥。眼結(jié)膜充血、腫脹,眼部皮下水腫。病程較長的病雞可見鼻腔、眶下竇和眼結(jié)膜內(nèi)有干酪樣物。,30,1、嗜血桿菌的染色與形態(tài)特性,染色G-。大小小到中等大小,04081030ΜM。形態(tài)單個、成對分布,兩極著色重,菌體形態(tài)似“啞鈴”。有時形成絲狀,表現(xiàn)為多形性。新分離菌株有時能見到莢膜;無芽胞;無鞭毛。,31,32,流感嗜血桿菌,GRAMSTAINOFHAEMOPHILUSINFLUENZAEFROMSPUTUM,33,嗜血桿菌的酶系統(tǒng)不夠完善,培養(yǎng)時需要加入X和V兩種生長因子。X因子是指具有生長促進(jìn)作用的血紅蛋白衍生物。V因子是輔酶I或輔酶II兩種脫氫酶的一種。血液中含有X和V兩種生長因子。需氧或兼性厭氧,雞嗜血桿菌培養(yǎng)時需要5的CO2環(huán)境。,2、嗜血桿菌的培養(yǎng)特性,34,常用巧克力培養(yǎng)基。在巧克力瓊脂上生長形成圓形、隆起、表面光滑、邊緣整齊、灰白色半透明的小菌落普通瓊脂和鮮血瓊脂生長不良。衛(wèi)星現(xiàn)象在鮮血瓊脂上培養(yǎng)時,如同時有葡萄球菌生長,由于葡萄球菌可合成較多的V因子,因此可出現(xiàn)葡萄球菌周圍的嗜血桿菌菌落較大,離葡萄球菌越遠(yuǎn)則越小。菌落特點呈針尖大小的露滴狀菌落菌落光滑、透明、不溶血,邊緣整齊。,續(xù),35,副雞嗜血桿菌,36,37,糖發(fā)酵試驗?zāi)馨l(fā)酵葡、麥、甘、蔗;不發(fā)酵乳、伯膠糖等。硝酸鹽還原+、H2S-、明膠液化-、靛基質(zhì)-氧化酶和接觸酶因不同菌株而有差異。,3、嗜血桿菌的生化特性,38,4、抗原及分型,莢膜多糖抗原多糖和磷壁酸,具有型特異性菌體結(jié)構(gòu)抗原脂多糖抗原和外膜蛋白抗原,在種內(nèi)和屬內(nèi)均有交叉流感嗜血桿菌根據(jù)莢膜抗原分為6個生物型,以ⅠⅥ型表示,39,嗜血桿菌的抵抗力不強常用消毒劑可殺滅;一般在60℃條件下1020分鐘即可殺滅;室溫下只能生存24天。,5、嗜血桿菌的抵抗力,40,6、嗜血桿菌屬的致病力,毒力因子莢膜、菌毛和內(nèi)毒素臨床意義流感嗜血桿菌引起各種呼吸道感染及小兒腦膜炎副流感嗜血桿菌寄居人的上呼吸道副豬嗜血桿菌4個血清型,為豬的下呼吸道的正常菌群,應(yīng)急狀態(tài)下,可引起全身感染,比如引起豬多漿病,即在大的體腔、關(guān)節(jié)、腦脊膜的纖維蛋白性炎癥。本菌也常與豬流感病毒聯(lián)合引起豬流感副禽嗜血桿菌引起禽類呼吸道系統(tǒng)疾病,引致雞鼻炎(可從氣管侵入到整個肺部)、打噴嚏及面部水腫,產(chǎn)蛋減少,對雛雞致病力較強,41,(以雞傳染性鼻炎為例)病原分離鑒定鏡檢采取腦脊液、血液、分泌液分離培養(yǎng)采用鮮血瓊脂或巧克力瓊脂V因子需要試驗用滅菌棉拭子蘸取病雞的眶下竇中的粘液或漿液,在鮮血瓊脂上劃線,并取保姆菌交叉劃線,于蠟燭瓶或CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18?24小時,若分離菌在血瓊脂平板上生長呈現(xiàn)“衛(wèi)星現(xiàn)象”,菌落呈露滴狀、針尖大小的小菌落,且過氧化物酶試驗呈現(xiàn)陰性,則可作出診斷。由于嗜血桿菌在體外存活時間很短,對該病原菌的分離必須及時。,7、嗜血桿菌的微生物學(xué)檢查,42,,除了傳統(tǒng)的分離鑒定及常規(guī)的血清學(xué)方法外,還建立了更加特異敏感的ELISA方法、DNA探針及PCR診斷技術(shù)。,43,制定合適的防疫程序,加強預(yù)防力度,可減少傳染病的發(fā)生。(以傳染性鼻炎為例)接種傳染性鼻炎菌苗能有效地預(yù)防本病的發(fā)生,現(xiàn)在中國和外國都有這類商品性滅活菌苗供應(yīng)。在雞傳染性鼻炎的防制上,一般是在68周齡時進(jìn)行第一次菌苗接種,34周以后或產(chǎn)蛋前再加強免疫接種一次,可獲良好的免疫保護效果。,8、嗜血桿菌的免疫,44,第五節(jié)放線桿菌屬ACTINOBACILLUS,本屬細(xì)菌為G-桿菌,兩極染色,兼性厭氧。,豬胸膜肺炎放線桿菌林氏放線桿菌駒放線桿菌,,對家畜有致病性的主要有3種,45,1、形態(tài)、染色,G-球桿菌,兩極染色,無抗酸性;三無無莢膜、無芽胞、無鞭毛。,46,2、培養(yǎng),兼性厭氧;普通瓊脂生長不良;常用血清瓊脂。菌落細(xì)小、圓形、粘稠;,,豬胸膜肺炎放線桿菌Β溶血林氏放線桿菌藍(lán)灰色,47,3、致病性,(1)豬胸膜肺炎放線桿菌特點高度宿主專一性,臨床表現(xiàn)為最急性型、急性型、慢性型,病理變化根據(jù)病理長短稍有差異,一般特點是氣管和支氣管內(nèi)有大量血色液體和纖維素,粘膜水腫、出血和增厚;肺臟充血、腫大、出血、水腫和肝變,病程久者有大小不等的壞死灶和膿腫,胸腔積液,胸膜表面覆有纖維素,48,毒力因子莢膜、LPS、外膜蛋白、細(xì)胞毒素傳播方式通過飛沫或直接接觸而傳播微生物學(xué)診斷病死豬肺壞死組織、胸水、鼻及氣管滲出物→涂片鏡檢,是否存在兩極濃染小桿菌→接種綿羊血瓊脂及巧克力瓊脂,置5CO2條件下培養(yǎng)→CAMP試驗,檢測尿酶活性及甘露醇發(fā)酵能力,,,,49,預(yù)防和控制凈化豬群注射滅活疫苗,50,(2)林氏放線桿菌致牛、羊的放線桿菌病,主要侵害皮膚及軟組織,引起化膿及肉芽腫,尤其致下頜淋巴結(jié)的膿腫,牛舌肉芽腫,使舌腫大,稱為“木舌病”,也可致綿羊的皮膚、肺及豬的乳房膿腫。(3)駒放線桿菌馬、豬關(guān)節(jié)炎、流產(chǎn)、心內(nèi)膜炎、腎炎等,51,
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