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簡介：同學(xué)們上午好,主講葉輝,單位溫州醫(yī)學(xué)院生化教研室,第十五章基因表達(dá)的調(diào)控,1961年，F(xiàn)RANCISJACOB等通過ECOLI基因表達(dá)調(diào)控研究提出了著名的操縱子學(xué)說,控制中心法則各步進(jìn)行快慢的調(diào)控系統(tǒng),第一節(jié)基因表達(dá)調(diào)控的基本概念,BASICCONCEPTIONSOFGENEEXPRESSIONREGULATION,基因表達(dá),生物基因組中結(jié)構(gòu)基因所攜帶的遺傳信息經(jīng)過轉(zhuǎn)錄，翻譯等系列生化反應(yīng)的過程，合成特定的蛋白質(zhì)，進(jìn)而發(fā)揮特定生物學(xué)功能和生物學(xué)效應(yīng)的全過程。,基因表達(dá)調(diào)控,控制基因表達(dá)的調(diào)節(jié)機(jī)制,例如人類有3萬個(gè)基因，并非全部表達(dá)，大腸桿菌有5處于高表達(dá)狀態(tài)，其余為低表達(dá)或靜止?fàn)顟B(tài),,,基因表達(dá)的多水平調(diào)控,調(diào)控點(diǎn),轉(zhuǎn)錄前水平,翻譯水平,轉(zhuǎn)錄水平,轉(zhuǎn)錄后加工,翻譯后水平,轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控是基因表達(dá)的最主要和重要的調(diào)控步驟,,正調(diào)控和負(fù)調(diào)控,基因表達(dá)的效果,正調(diào)節(jié)（POSITIVEREGULATION）因一種特異性調(diào)控元件的存在遺傳信息的表達(dá)增加,負(fù)調(diào)節(jié)（NEGATIVEREGULATION）因一種特異性調(diào)控元件的存在遺傳信息的表達(dá)減少,基因表達(dá)調(diào)控的分類,,,基因表達(dá)的方式,組成性表達(dá),持家基因,某些基因在一個(gè)生物體的幾乎所有細(xì)胞中以適當(dāng)恒定的速率進(jìn)行表達(dá)，較少受環(huán)境因素的影響。,例如為三羧酸循環(huán)的酶編碼的基因,誘導(dǎo)和阻遏表達(dá)（受環(huán)境變化影響）,同一事物的兩種表達(dá)形式（環(huán)境）,誘導(dǎo)表達(dá),阻遏表達(dá),乳糖操縱子是誘導(dǎo)，阻遏表達(dá)的典型模型,,,,,,順式作用和反式作用,順式作用元件CISACTINGFACTOR,順式相對(duì)同一分子或染色體而言,反式相對(duì)不同分子或染色體而言,與編碼基因位于同一DNA分子（兩側(cè)，非編碼序列），影響自身基因表達(dá)活性的DNA序列,啟動(dòng)子、增強(qiáng)子、沉默子,反式作用因子TRANSACTINGFACTOR,與編碼基因位于不同DNA分子的基因表達(dá)的蛋白質(zhì)，通過與特異的順式作用元件相互作用（DNA結(jié)構(gòu)域和蛋白蛋白結(jié)構(gòu)域）反式激活另一基因的轉(zhuǎn)錄,三、基因表達(dá)調(diào)控的一般特征,時(shí)間特異性（階段特異性）,空間特異性（組織特異性）,胚胎發(fā)育不同階段不同的基因表達(dá)（珠蛋白的表達(dá)）,同一生長階段，同一基因產(chǎn)物在不同組織器官表達(dá)多少不同（同工酶）,,第二節(jié)原核生物基因表達(dá)的調(diào)控,調(diào)節(jié)特點(diǎn),多水平調(diào)控,多順反子（POLYCISTRONICMRNA）多個(gè)編碼基因轉(zhuǎn)錄成一個(gè)MRNA分子，翻譯成多條多肽鏈,操縱子（OPERON）模型的普遍性,,乳糖（LAC）操縱子,色氨酸（TRP）操縱子,一、乳糖操縱子（THELACOPERON）,結(jié)合阻遏蛋白,CAP結(jié)合位點(diǎn),調(diào)節(jié)基因,啟動(dòng)序列,操縱序列,結(jié)構(gòu)基因,阻遏蛋白,RNA聚合酶,結(jié)合CAMP,,（一）乳糖操縱子的結(jié)構(gòu),乳糖操縱子的結(jié)構(gòu),結(jié)構(gòu)基因,調(diào)控區(qū),調(diào)節(jié)基因I,Z基因編碼Β半乳糖苷酶Y基因編碼Β半乳糖苷透性酶A基因編碼乙?；D(zhuǎn)移酶,操縱序列O阻遏蛋白結(jié)合部位,啟動(dòng)序列P結(jié)合RNA聚合酶,CAP結(jié)合位點(diǎn)CAMP結(jié)合位點(diǎn),編碼阻遏蛋白,,（二）乳糖操縱子表達(dá)的調(diào)節(jié),CAP的正性調(diào)節(jié),阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié),無誘導(dǎo)物時(shí),無葡萄糖時(shí),（誘導(dǎo)物異乳糖）,不產(chǎn)生誘導(dǎo)物,有葡萄糖,阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié),,有乳糖,,,,,,,調(diào)節(jié)基因,結(jié)構(gòu)基因,MRNA,阻遏蛋白,,,LAC操縱子受阻遏狀態(tài)結(jié)構(gòu)基因不表達(dá),無葡萄糖,,有乳糖,,產(chǎn)生誘導(dǎo)物,,,,,,,,,,,誘導(dǎo)物與阻遏蛋白接合使阻遏蛋白失去活性,LACMRNA,Β半乳糖苷酶,Β半乳糖苷透性酶,乙?；D(zhuǎn)移酶,,誘導(dǎo)物異乳糖ALLOLACTOSE；IPTG,分解乳糖的酶基因表達(dá),誘導(dǎo)物結(jié)合阻遏蛋白,阻遏蛋白變構(gòu),阻遏蛋白與O區(qū)解離,RNA聚合酶通過O區(qū),,1掌握以下概念基因表達(dá)、基因表達(dá)調(diào)控、正調(diào)節(jié)、負(fù)調(diào)節(jié)、持家基因、誘導(dǎo)表達(dá)和阻遏表達(dá)2掌握乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)；3掌握乳糖操縱子的阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié),本節(jié)課的重點(diǎn),,1掌握以下概念基因表達(dá)、基因表達(dá)調(diào)控、正調(diào)節(jié)、負(fù)調(diào)節(jié)、持家基因、誘導(dǎo)表達(dá)和阻遏表達(dá)2掌握乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)；3掌握乳糖操縱子的阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié),復(fù)習(xí)與鞏固,上節(jié)課的重點(diǎn)內(nèi)容,CAP的正性調(diào)節(jié),分解（代謝）基因激活蛋白（CATABOLITEGENEACTIVATORPROTEIN，CAP）,同二聚體有DNA結(jié)合區(qū)和CAMP結(jié)合位點(diǎn),,結(jié)合阻遏蛋白,CAP結(jié)合位點(diǎn),調(diào)節(jié)基因,啟動(dòng)序列,操縱序列,結(jié)構(gòu)基因,阻遏蛋白,RNA聚合酶,結(jié)合CAMP,,乳糖操縱子的結(jié)構(gòu),CAMP,,,,,＋,葡萄糖濃度低時(shí),,,,,MRNA,CAP的正性調(diào)節(jié),RNAPOL活性↑,,二、色氨酸操縱子（THETRPOPERON）,（一）色氨酸操縱子結(jié)構(gòu),調(diào)節(jié)基因,結(jié)構(gòu)基因（合成TRP的酶）,調(diào)控區(qū),TRPE，TRPD基因編碼鄰氨基苯甲酸合成酶TRPC基因編碼吲哚甘油3磷酸合成酶TRPB，TRPA基因編碼色氨酸合成酶,操縱序列O阻遏蛋白結(jié)合部位,啟動(dòng)序列P結(jié)合RNA聚合酶,衰減子（ATTENUATOR，A）162BP,調(diào)節(jié)基因R編碼阻遏蛋白,,,（二）色氨酸操縱子轉(zhuǎn)錄的調(diào)控機(jī)制,,R,P,O,,,TRPE,TRPD,TRPC,TRPB,TRPA,,,,,,,,前導(dǎo)TRPL,衰減子,,,,,,調(diào)節(jié)區(qū),結(jié)構(gòu)基因,,,,,,,阻遏蛋白,MRNA,TRPMRNA（色氨酸水平低時(shí)）,衰減的MRNA（色氨酸水平高時(shí)）,TRP,含有140個(gè)堿基,阻遏蛋白MRNA,,UUUUUUUU3＇,色氨酸操縱子的前導(dǎo)TRPLMRNA結(jié)構(gòu),,,,1,2,,,3,4,,,TRP密碼子,,,,,,,互補(bǔ)配對(duì),5＇,,,,,,,,,,,,,,,,前導(dǎo)肽（14AA）,,互補(bǔ)配對(duì),互補(bǔ)配對(duì),,,,,,,,,,,,,,,,3,4,,UUUUUUUUU3＇,RNA聚合酶,,,1,2,TRP密碼子,,MRNA,核蛋白體,,DNA,衰減子結(jié)構(gòu),,,,,,,,,,,,,,,,,前導(dǎo)肽,色氨酸濃度高時(shí),,,核蛋白體,,,,,,,,,,,2,3,,,,4,,,,TRP密碼子,,TRP結(jié)構(gòu)基因,1,,DNA,,,色氨酸濃度低時(shí),RNA聚合酶,,,,（二）色氨酸操縱子轉(zhuǎn)錄的調(diào)控機(jī)制,,R,P,O,,,TRPE,TRPD,TRPC,TRPB,TRPA,,,,,,,,前導(dǎo)TRPL,衰減子,,,,,,調(diào)節(jié)區(qū),結(jié)構(gòu)基因,,,,,,,阻遏蛋白,MRNA,TRPMRNA（色氨酸水平低時(shí)）,衰減的MRNA（色氨酸水平高時(shí)）,TRP,含有140個(gè)堿基,阻遏蛋白MRNA,,第三節(jié)真核生物基因表達(dá)的調(diào)控,結(jié)構(gòu)龐大,基因占6，510為RRNA等DNA序列，其余8090DNA序列無遺傳學(xué)功能,一個(gè)編碼基因轉(zhuǎn)錄成一個(gè)MRNA分子，翻譯成一條多肽鏈,單順反子（MONOCISRONIC）,真核基因組結(jié)構(gòu)特點(diǎn),重復(fù)序列,基因不連續(xù)性,基因兩側(cè)有不被轉(zhuǎn)錄的非編碼序列（基因調(diào)控區(qū)）基因內(nèi)部有內(nèi)含子，不編碼蛋白質(zhì)。,多拷貝序列；單拷貝序列；反轉(zhuǎn)重復(fù)序列（回文）,正性調(diào)節(jié)占主導(dǎo),轉(zhuǎn)錄與翻譯分隔進(jìn)行,轉(zhuǎn)錄后修飾、加工,轉(zhuǎn)錄在細(xì)胞核翻譯在胞漿,比原核復(fù)雜,正性調(diào)節(jié)更有效基因組龐大，正性調(diào)節(jié)增加基因表達(dá)調(diào)節(jié)的特異性和精確性,負(fù)性調(diào)節(jié)不經(jīng)濟(jì)基因多，多阻遏不如少激活,,對(duì)DNASE1敏感性增高,核小體結(jié)構(gòu)變化,DNA堿基的化學(xué)修飾,組蛋白變化,甲基化與基因表達(dá)程度成反比,磷酸化與乙?；购诵◇w結(jié)構(gòu)變得不穩(wěn)定有利于轉(zhuǎn)錄,基因被激活時(shí)染色體結(jié)構(gòu)變化,,轉(zhuǎn)錄時(shí)RNA聚合酶前方轉(zhuǎn)錄區(qū)DNA為正超螺旋后方負(fù)超螺旋；組蛋白解聚,核小體核心結(jié)構(gòu)與RNA聚合酶Ⅱ的轉(zhuǎn)錄,轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控,順式作用元件,反式作用因子,啟動(dòng)子（PROMOTER）,增強(qiáng)子（ENHANCER）,沉默子（SILENCER）,,真核生物順式作用元件,GC盒,TATA盒,增強(qiáng)子,CAAT盒,,結(jié)構(gòu)基因,,,,轉(zhuǎn)錄起始,,,,啟動(dòng)子,1,25BP,沉默子,,,啟動(dòng)子,TATA盒,GC盒,CAAT盒,（TATAAAA）轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)上游2530BP,是基本轉(zhuǎn)錄因子TFⅡD結(jié)合位點(diǎn),（GGGCGGG）轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)上游80110BP，管家基因,（CCAAT）轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)上游7080BP,轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)上游RNAPOL結(jié)合位點(diǎn)周圍的一組轉(zhuǎn)錄控制功能組件，控制轉(zhuǎn)錄起始的準(zhǔn)確性及頻率,,,增強(qiáng)子,遠(yuǎn)離轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)（130KB），決定基因時(shí)間，空間特異性表達(dá)，增強(qiáng)轉(zhuǎn)錄活性的DNA序列,轉(zhuǎn)錄起始啟動(dòng)子與增強(qiáng)子缺一不可,沉默子,負(fù)性調(diào)節(jié)元件，阻遏基因轉(zhuǎn)錄,,轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子分類（轉(zhuǎn)錄因子TF）,基本轉(zhuǎn)錄因子,特異轉(zhuǎn)錄因子,RNAPOL結(jié)合啟動(dòng)子必需的一組蛋白因子,TFⅡD為通用轉(zhuǎn)錄因子,個(gè)別基因轉(zhuǎn)錄必需,反式作用因子,,反式作用子結(jié)構(gòu),DNA結(jié)合域,轉(zhuǎn)錄激活域,二聚化結(jié)構(gòu)域,與順式作用元件結(jié)合部位,介導(dǎo)蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)相互作用結(jié)構(gòu)域,1、螺旋轉(zhuǎn)角螺旋2、鋅指結(jié)構(gòu)CYSCYS鋅指；CYSHIS鋅指3、堿性亮氨酸拉鏈（BASICLEUCINEZIPPER，BZIP）形成二聚體,結(jié)合調(diào)節(jié)蛋白,,,①螺旋轉(zhuǎn)角螺旋模體,,②鋅指模體,,組氨酸殘基,?折疊,?螺旋,ZN,半胱氨酸殘基,?折疊,③亮氨酸拉鏈模體,轉(zhuǎn)錄后的調(diào)控,1、初級(jí)轉(zhuǎn)錄本的加工,2、MRNA的穩(wěn)定性,翻譯和翻譯后水平的調(diào)控,一、翻譯水平的調(diào)節(jié),翻譯水平的調(diào)控主要表現(xiàn)在MRNA的識(shí)別、蛋白質(zhì)合成的起始和延長。,二、翻譯后水平的調(diào)控,新合成的蛋白質(zhì)還需要進(jìn)行一系列的加工才能成為有活性的蛋白質(zhì)。加工成熟包括蛋白質(zhì)的切割、蛋白質(zhì)化學(xué)修飾、蛋白質(zhì)的剪切、蛋白質(zhì)的折疊和蛋白質(zhì)的定位。,1掌握乳糖操縱子的CAP正性調(diào)節(jié)；2掌握真核基因表達(dá)調(diào)控的特點(diǎn)；3掌握順式作用元件、反式作用因子的概念及組成和轉(zhuǎn)錄因子的分類。,本節(jié)課的重點(diǎn),,

簡介：生物化學(xué)第三版答案詳解上冊部分）生物化學(xué)（第三版）課后習(xí)題詳細(xì)解答生物化學(xué)（第三版）課后習(xí)題詳細(xì)解答第三章氨基酸提要Α氨基酸是蛋白質(zhì)的構(gòu)件分子，當(dāng)用酸、堿或蛋白酶水解蛋白質(zhì)時(shí)可獲得它們。蛋白質(zhì)中的氨基酸都是L型的。但堿水解得到的氨基酸是D型和L型的消旋混合物。參與蛋白質(zhì)組成的基本氨基酸只有20種。此外還有若干種氨基酸在某些蛋白質(zhì)中存在，但它們都是在蛋白質(zhì)生物合成后由相應(yīng)是基本氨基酸（殘基）經(jīng)化學(xué)修飾而成。除參與蛋白質(zhì)組成的氨基酸外，還有很多種其他氨基酸存在與各種組織和細(xì)胞中，有的是Β、?；颚ぐ被幔行┦荄型氨基酸。氨基酸是兩性電解質(zhì)。當(dāng)PH接近1時(shí)，氨基酸的可解離基團(tuán)全部質(zhì)子化，當(dāng)PH在13左右時(shí)，則全部去質(zhì)子化。在這中間的某一PH（因不同氨基酸而異），氨基酸以等電的兼性離子（H3NCHRCOO）狀態(tài)存在。某一氨基酸處于凈電荷為零的兼性離子狀態(tài)時(shí)的介質(zhì)PH稱為該氨基酸的等電點(diǎn)，用PI表示。所有的Α氨基酸都能與茚三酮發(fā)生顏色反應(yīng)。ΑNH2與24二硝基氟苯（DNFB）作用產(chǎn)生相應(yīng)的DNP氨基酸（SANGER反應(yīng)）；ΑNH2與苯乙硫氰酸酯（PITC）作用形成相應(yīng)氨基酸的苯胺基硫甲酰衍生物（EDMAN反應(yīng)）。胱氨酸中的二硫鍵可用氧化劑（如過甲酸）或還原劑（如巰基乙醇）斷裂。半胱氨酸的SH基在空氣中氧化則成二硫鍵。這幾個(gè)反應(yīng)在氨基酸荷蛋白質(zhì)化學(xué)中占有重要地位。除甘氨酸外Α氨基酸的Α碳是一個(gè)手性碳原子，因此Α氨基酸具有光學(xué)活性。比旋是Α氨基酸的物理常數(shù)之一，它是鑒別各種氨基酸的一種根據(jù)。參與蛋白質(zhì)組成的氨基酸中色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸在紫外區(qū)有光吸收，這是紫外吸收法定量蛋白質(zhì)的依據(jù)。核磁共振（NMR）波譜技術(shù)在氨基酸和蛋白質(zhì)的化學(xué)表征方面起重要作用。氨基酸分析分離方法主要是基于氨基酸的酸堿性質(zhì)和極性大小。常用方法有離子交換柱層析、高效液相層析（HPLC）等。習(xí)題1寫出下列氨基酸的單字母和三字母的縮寫符號(hào)精氨酸、天冬氨酸、谷氨酰氨、谷氨酸、苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸。見表31表31氨基酸的簡寫符號(hào)名稱三字母符號(hào)單字母符號(hào)名稱三字母符號(hào)單字母符號(hào)丙氨酸ALANINEALAA亮氨酸LEUCINELEUL精氨酸ARGININEARGR賴氨酸LYSINELYSK天冬酰氨ASPARAGINESASNN甲硫氨酸蛋氨酸METHIONINEMETM天冬氨酸ASPARTICACIDASPD苯丙氨酸PHENYLALANINEPHEFASN和或ASPASXB半胱氨酸CYSTEINECYSC脯氨酸PRALINEPROP谷氨酰氨GLUTAMINEGLNQ絲氨酸SERINESERS谷氨酸GLUTAMICACIDGLUE蘇氨酸THREONINETHRTGLN和或GLUGLSZ甘氨酸GLYCINEGLYG色氨酸TRYPTOPHANTRPW組氨酸HISTIDINEHISH酪氨酸TYROSINETYRY異亮氨酸ISOLEUCINEILEI纈氨酸VALINEVALV溶劑B中的兩倍。利用在溶劑A和B之間的逆流分溶方法將甘氨酸和苯丙氨酸分開。在起始溶液中甘氨酸含量為100MG，苯丙氨酸為81MG，試回答下列問題1利用由4個(gè)分溶管組成的逆流分溶系統(tǒng)時(shí)，甘氨酸和苯丙氨酸各在哪一號(hào)分溶管中含量最高（2）在這樣的管中每種氨基酸各為多少毫克（1）第4管和第3管；（2）512MGGLY24MGPHE和384MGGLY36MGPHE解根據(jù)逆流分溶原理，可得對(duì)于GLYKDCACB4Q動(dòng)相P（靜相）PQ115454個(gè)分溶管分溶3次（1545）3112521254812564125對(duì)于PHEKDCACB2Q動(dòng)相P（靜相）PQ113234個(gè)分溶管分溶3次（1323）31276271227827故利用4個(gè)分溶管組成的分溶系統(tǒng)中，甘氨酸和苯丙氨酸各在4管和第3管中含量最高，其中第4管GLY64125100512MGPHE8278124MG第3管GLY48125100384MGPHE12278136MG14、指出在正丁醇醋酸水的系統(tǒng)中進(jìn)行紙層析時(shí)，下列混合物中氨基酸的相對(duì)遷移率（假定水相的PH為45）1ILELYS2PHESER3ALAVALLEU4PROVAL5GLUASP6TYRALASERHISILELYS；PHESER；LEUVALALA；VALPRO；GLUASP；TYRALASER≌HIS解根據(jù)P151圖325可得結(jié)果。15將含有天冬氨酸PI298、甘氨酸PI597、亮氨酸PI653和賴氨酸PI598的檸檬酸緩沖液，加到預(yù)先同樣緩沖液平衡過的強(qiáng)陽離交換樹脂中，隨后用愛緩沖液析脫此柱，并分別收集洗出液，這5種氨基酸將按什么次序洗脫下來ASPTHRGLYLEULYS解在PH3左右，氨基酸與陽離子交換樹脂之間的靜電吸引的大小次序是減刑氨基酸A2中性氨基酸A酸性氨基酸A0。因此氨基酸的洗出順序大體上是酸性氨基酸、中性氨基酸，最后是堿性氨基酸，由于氨基酸和樹脂之間還存在疏水相互作用，所以其洗脫順序?yàn)锳SPTHRGLYLEULYS。第四章蛋白質(zhì)的共價(jià)結(jié)構(gòu)提要蛋白質(zhì)分子是由一條或多條肽鏈構(gòu)成的生物大分子。多肽鏈?zhǔn)怯砂被嵬ㄟ^肽鍵共價(jià)連接而成的，各種多肽鏈都有自己特定的氨基酸序列。蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量介于6000到1000000或更高。蛋白質(zhì)分為兩大類單純蛋白質(zhì)和綴合蛋白質(zhì)。根據(jù)分子形狀可分為纖維狀蛋白質(zhì)、球狀蛋白質(zhì)和膜蛋白質(zhì)。此外還可按蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能分類。為了表示蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的不同組織層次，經(jīng)常使用一級(jí)結(jié)構(gòu)、二級(jí)結(jié)構(gòu)、三級(jí)結(jié)構(gòu)和四級(jí)結(jié)構(gòu)這樣一些專門術(shù)語。一級(jí)結(jié)構(gòu)就是共價(jià)主鏈的氨基酸序列，有時(shí)也稱化學(xué)結(jié)構(gòu)。二、三和四級(jí)結(jié)構(gòu)又稱空間結(jié)構(gòu)（即三維結(jié)構(gòu)）或高級(jí)結(jié)構(gòu)。蛋白質(zhì)的生物功能決定于它的高級(jí)結(jié)構(gòu)，高級(jí)結(jié)構(gòu)是由一級(jí)結(jié)構(gòu)即氨基酸序列決定的，二氨基酸序列是由遺傳物質(zhì)DNA的核苷酸序列規(guī)定的。肽鍵（CONH）是連接多肽鏈主鏈中氨基酸殘缺的共價(jià)鍵，二硫鍵是使多肽鏈之間交聯(lián)或使多肽鏈成環(huán)的共價(jià)鍵。多肽鏈或蛋白質(zhì)當(dāng)發(fā)生部分水解時(shí)，可形成長短不一的肽段。除部分水解可以產(chǎn)生小肽之外，生物界還存在許多游離的小肽，如谷胱甘肽等。小肽晶體的熔點(diǎn)都很高，這說明短肽

簡介：第十章腎臟疾病的生物化學(xué)診斷,腎臟KIDNEY不僅是機(jī)體內(nèi)最重要的排泄器官，還是重要的內(nèi)分泌器官，腎臟在維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定和平衡方面起著極為重要的作用。各種腎臟疾病均可造成機(jī)體代謝紊亂，并導(dǎo)致血液和尿液生物化學(xué)的改變。因此，血、尿生物化學(xué)檢驗(yàn)是指導(dǎo)腎臟疾病診斷和治療的重要指標(biāo)。,第一節(jié),腎臟的結(jié)構(gòu)和功能,腎臟最基本的功能是泌尿，泌尿過程包括腎小球?yàn)V過、腎小管選擇性重吸收和排泌。腎臟泌尿功能的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)是腎單位和腎血管，腎臟豐富的神經(jīng)支配和具有內(nèi)分泌功能的腎小球旁復(fù)合體對(duì)維持和調(diào)節(jié)腎臟的功能十分重要。本節(jié)主要介紹與腎臟泌尿功能相關(guān)的腎臟組織結(jié)構(gòu)，腎臟泌尿生理過程及衡量指標(biāo)。,一、腎臟的基本結(jié)構(gòu),腎單位1腎小體2腎小管和集合管腎的血管,腎臟為成對(duì)略呈蠶豆形的實(shí)質(zhì)性器官，位于腹膜后脊柱兩側(cè)。腎外被膜包裹，內(nèi)側(cè)緣中央凹陷成腎門，血管、淋巴管、神經(jīng)和輸尿管經(jīng)此出入腎。腎實(shí)質(zhì)分為皮質(zhì)和髓質(zhì)兩部分。皮質(zhì)在外層，主要由腎小體和腎小管構(gòu)成；髓質(zhì)在內(nèi)層，由2028個(gè)錐體組成，主要含髓袢的降支及升支、集合管及乳頭管。腎錐體開口于腎小盞，腎小盞合成腎盂，腎盂向下逐漸縮小續(xù)于輸尿管。,一腎單位腎單位NEPHRON是腎臟結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。人每側(cè)腎臟約有80120萬個(gè)腎單位，每個(gè)腎單位由腎小體和腎小管組成。集合管不包括在腎單位內(nèi)，但由于其在尿液濃縮與稀釋的過程中起著重要作用，故可把集合管視為腎小管的終末部分。,1．腎小體由中央部的腎小球和包繞其外的腎小囊組成。腎小球是由入球小動(dòng)脈反復(fù)分支形成的一團(tuán)盤曲的毛細(xì)血管網(wǎng)。腎小球毛細(xì)血管小葉間的軸心組織為腎小球系膜。腎小囊分內(nèi)外兩層上皮細(xì)胞，內(nèi)層緊貼毛細(xì)血管壁，外層與腎小管壁相連，兩層之間的腔隙稱囊腔，與腎小管管腔相通。,2．腎小管和集合管腎小管長而彎曲，分為三段①近端小管，包括近曲小管和髓袢降支粗段，前者與腎小囊相連。②髓袢細(xì)段，分降支和升支兩部分。③遠(yuǎn)端小管，包括髓袢升支粗段和遠(yuǎn)曲小管，其遠(yuǎn)端與集合管相連。多個(gè)腎單位匯集于一支集合管，多支集合管匯入一乳頭管，而后開口于腎盂。,二腎的血管腎的血管系統(tǒng)有其特點(diǎn)。腎動(dòng)脈由腹主動(dòng)脈分出后，經(jīng)葉間動(dòng)脈、弓狀動(dòng)脈、小葉間動(dòng)脈和入球小動(dòng)脈進(jìn)入腎小體，形成腎小球毛細(xì)血管袢，再匯集成出球小動(dòng)脈。離開腎小體以后又分支成二級(jí)毛細(xì)血管網(wǎng)，包繞于腎小管和集合管既起營養(yǎng)作用，又有轉(zhuǎn)運(yùn)物質(zhì)的功能，然后匯合成靜脈，經(jīng)小葉間靜脈、弓形靜脈、葉間靜脈和腎靜脈進(jìn)入體循環(huán)。,二、腎臟的基本功能,泌尿功能內(nèi)分泌功能參與氨基酸和糖代謝維持血壓,1．泌尿功能腎臟最重要的功能是泌尿。腎臟通過生成尿液不僅可以排泄機(jī)體代謝的終產(chǎn)物，如蛋白質(zhì)代謝產(chǎn)生的尿素、核酸代謝產(chǎn)生的尿酸、肌肉肌酸代謝產(chǎn)生的肌酐和血紅素的降解產(chǎn)物等；還可將攝入量超過機(jī)體需要的物質(zhì)，如水、電解質(zhì)等和進(jìn)人體內(nèi)的外源性異物，如絕大部分藥物、影像學(xué)檢查的造影劑和毒物等排出體外；而且同時(shí)精確調(diào)節(jié)體內(nèi)水、電解質(zhì)、酸堿和滲透壓平衡等，維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境質(zhì)和量的相對(duì)穩(wěn)定，保證生命活動(dòng)的正常進(jìn)行。,2．內(nèi)分泌功能腎臟分泌的激素包括血管活性物質(zhì)和非血管活性物質(zhì)。前者包括腎素、前列腺素、緩激肽等，參與全身血壓和水、電解質(zhì)代謝的調(diào)節(jié)。后者包括1，25二羥基維生素D3、紅細(xì)胞生成素等。此外，腎臟是許多的肽類激素和內(nèi)源性活性物質(zhì)的降解場所，如胰島素、高血糖素、甲狀旁腺素、泌乳素、生長激素、促胃液素和舒血管腸肽等。,三、腎小球?yàn)V過功能,腎小球?yàn)V液的生成機(jī)制及影響因素1腎小球?yàn)V過膜面積和通透性2有效濾過壓3腎血流量腎小球?yàn)V過功能評(píng)價(jià)指標(biāo)1腎小球?yàn)V過率與濾過分?jǐn)?shù)2過篩系數(shù)與選擇指數(shù)腎小球?yàn)V過功能的調(diào)節(jié),腎小球?yàn)V過是指當(dāng)血液流過腎小球毛細(xì)血管網(wǎng)時(shí)，血漿中的水和小分子溶質(zhì)，包括分子量較小的血漿蛋白，通過濾過膜濾入腎小囊形成原尿的過程。此過程是一種超濾過程。原尿除了不含血細(xì)胞和部分血漿蛋白質(zhì)外，其余成分和血漿相同。,一腎小球?yàn)V液的生成機(jī)制及影響因素腎小球?yàn)V液的生成與細(xì)胞外液的生成相似。決定腎小球?yàn)V過作用的主要因素有①結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)濾過膜濾過面積和通透性；②動(dòng)力基礎(chǔ)有效濾過壓；③物質(zhì)基礎(chǔ)腎血流量。,1．腎小球?yàn)V過膜濾過面積和通透性人體兩側(cè)腎臟的腎單位總數(shù)達(dá)200萬個(gè)，總濾過面積約15M2，十分有利于濾過。濾過膜通透性大小由其結(jié)構(gòu)決定，同時(shí)受腎小球系膜的調(diào)節(jié)。,1濾過膜與濾過屏障濾過膜的獨(dú)特結(jié)構(gòu)使之具有一定的孔徑和電荷選擇性，既對(duì)小分子物質(zhì)有極高的通透性，又對(duì)大分子物質(zhì)有高度的截留作用。,濾過膜有三層結(jié)構(gòu)①內(nèi)層為毛細(xì)血管的內(nèi)皮細(xì)胞層，細(xì)胞間連接疏松，形成大量的圓形窗孔，孔徑40100NM，血細(xì)胞不能通過，對(duì)血漿蛋白幾乎不起屏障作用；②中間為非細(xì)胞性的基膜層，是由微纖維織成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，網(wǎng)孔直徑約48NM，由于基底膜本身的伸展性較大，除可讓水及部分小分子溶質(zhì)通過，有時(shí)分子量較小的血漿蛋白也能通過，是濾過膜中主要的屏障；③外層是腎小囊上皮細(xì)胞，由突起的足細(xì)胞構(gòu)成，足突附著在基膜，足突間裂隙稱為裂孔，其上有一薄層裂孔膜，為柵欄狀細(xì)絲網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，網(wǎng)孔直徑約7NM，是濾過膜的最后一道屏障。,濾過膜形成的濾過屏障包括兩個(gè)部分①孔徑屏障指由濾過膜三層結(jié)構(gòu)上孔道所構(gòu)成的屏障。屏障作用與濾過膜上的孔徑大小以及物質(zhì)分子構(gòu)型、形狀和伸展性等有關(guān)。②電荷屏障濾過膜三層結(jié)構(gòu)的表面都覆蓋有一層帶負(fù)電荷的唾液酸，這就使帶負(fù)電荷的物質(zhì)不易通過，而帶正電荷的物質(zhì)較易通過。濾過屏障中起主要作用的是孔徑屏障，分子半徑小于2NM的物質(zhì)可自由通過腎小球?yàn)V過膜，分子半徑大于4NM，分子量約70KD的物質(zhì)幾乎不能通過。電荷屏障只是對(duì)那些剛能通過濾過孔道帶負(fù)電荷的大分子物質(zhì)，如血漿清蛋白半徑為36NM有選擇性的阻擋作用。,2腎小球系膜及作用位于腎小球毛細(xì)血管之間，由系膜細(xì)胞和系膜基質(zhì)所組成。系膜能通過系膜細(xì)胞收縮和改變基質(zhì)的物理性狀調(diào)節(jié)濾過屏障。,2．有效濾過壓EFFECTIVEFILTRATIONPRESSURE由三種力組成，根據(jù)三種力作用方向的不同，可列出下式腎小球有效濾過壓腎小球毛細(xì)血管血壓血漿膠體滲透壓囊內(nèi)壓,腎小球毛細(xì)血管血壓平均為60PA，囊內(nèi)壓為13PA，血漿膠體滲透壓約為27PA。據(jù)此，可計(jì)算入球端有效濾過壓為20PA，借此可使血漿某些成分透過腎小球?yàn)V膜，進(jìn)入腎小囊，形成原尿；出球端有效濾過壓為0，濾過停止，此過程稱為濾過壓平衡。,3．腎血流量腎臟的血液供應(yīng)十分豐富，正常人安靜時(shí)的腎血流量RBF約1200ML／MIN，相當(dāng)于心排血量的20％25％。RBF中94％左右的血液分布在腎皮質(zhì)。通常所說的RBF主要指的是腎皮質(zhì)血流量，腎血流量中的血漿部分稱腎血漿流量RPF。,二腎小球?yàn)V過功能評(píng)價(jià)指標(biāo)1．腎小球?yàn)V過率與濾過分?jǐn)?shù)單位時(shí)間內(nèi)兩腎生成的濾液量稱為腎小球?yàn)V過率GLOMERULAFILTRATIONRATE，GFR。其值高低取決于腎血流量、有效濾過壓和濾過分?jǐn)?shù)。濾過分?jǐn)?shù)FILTRATIONFRACTION，F(xiàn)F指腎小球?yàn)V過量占流經(jīng)腎小球的血流量的比值。FF018022，其值大小與毛細(xì)血管有效靜水通透性和濾過面積有關(guān)。GFR和FF是衡量腎小球?yàn)V過功能的兩個(gè)重要指標(biāo)。,據(jù)測定，體表面積為173M2的人體GRF為125ML／MIN左右，以此計(jì)算，24小時(shí)內(nèi)約有1700L血液通過腎臟，從腎小球?yàn)V出的血漿量可達(dá)180L，相當(dāng)于血漿每天在腎小球?yàn)V過60次。由此可見，腎小球?yàn)V過功能在腎的排泄功能中占有重要位置。,2．過篩系數(shù)與選擇指數(shù)濾過膜的通透性或屏障作用大小，可以用它允許通過物質(zhì)的分子量大小來衡量。通常以腎小囊中原尿的蛋白成分和濃度與血漿蛋白成分和濃度的比較來表明腎小球毛細(xì)血管壁通透選擇性。對(duì)一特定的體內(nèi)大分子物質(zhì)，其在腎小囊腔與血漿濃度的比值稱為過篩系數(shù)；兩個(gè)分子量或所帶電荷不同的蛋白過篩系數(shù)或清除率之比值稱尿蛋白選擇指數(shù)SELECTIVEURINEPROTEININDEX，SPI。,三腎小球?yàn)V過功能的調(diào)節(jié)腎小球的濾過功能主要受腎血流量及腎小球有效濾過壓的調(diào)節(jié)。腎血流量的調(diào)節(jié)既能適應(yīng)腎臟泌尿功能的需要，又能與全身的血循環(huán)相配合，前者主要靠自身調(diào)節(jié)，后者主要靠神經(jīng)調(diào)節(jié)和體液調(diào)節(jié)，尤其在應(yīng)激狀態(tài)時(shí)，參與全身血流量的重新分配的調(diào)節(jié)，以適應(yīng)整體生理活動(dòng)的需要。,四、腎小管和集合管的轉(zhuǎn)運(yùn)功能,腎小管的重吸收腎小管、集合管的排泌腎小管轉(zhuǎn)運(yùn)功能的調(diào)節(jié),在泌尿過程中，腎小球?yàn)V過生成的原尿需經(jīng)腎小管和集合管進(jìn)行物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)，最后形成終尿。物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)過程包括重吸收和排泌。重吸收是腎小管上皮細(xì)胞將原尿中的水和某些溶質(zhì)，部分或全部轉(zhuǎn)運(yùn)回血液的過程。腎小管和集合管的上皮細(xì)胞將其產(chǎn)生的或血液中的某些物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)到腎小管腔中的過程稱為分泌或排泌。,一腎小管的重吸收1．重吸收方式與物質(zhì)腎小管重吸收的方式可分為主動(dòng)重吸收和被動(dòng)重吸收兩類。主動(dòng)重吸收是指腎小管上皮細(xì)胞將小管液中的溶質(zhì)逆濃度差或電位差轉(zhuǎn)運(yùn)到管周組織液的過程。一般機(jī)體所需要的物質(zhì)，如葡萄糖、氨基酸、CL、NA、K、CA等，都是主動(dòng)重吸收。被動(dòng)重吸收是指腎小管液中的溶質(zhì)逆濃度差或電位差進(jìn)行擴(kuò)散，以及水在滲透壓差作用下進(jìn)行滲透，從管腔轉(zhuǎn)移至管周組織液的過程。例如尿素和水。,2重吸收部位與功能1近曲小管是物質(zhì)重吸收最重要的部位。原尿中的葡萄糖、氨基酸、維生素及微量蛋白質(zhì)等，幾乎全部在近曲小管重吸收，NA、K、CL、HC03等也絕大部分在此段重吸收。,2髓袢主要吸收一部分水和氯化鈉。在降支內(nèi)水的重吸收大于溶質(zhì)吸收，使管內(nèi)的滲透壓逐漸升高，形成滲透梯度，最高可達(dá)1200MOSM／KG以上。升支不透水，而溶質(zhì)卻不斷被重吸收，形成逆向的滲透梯度，即從1200MOSM／KG又逐漸下降到等滲，甚至低滲。此段滲透壓變化的過程稱為“逆流倍增”，在尿液的濃縮稀釋等功能中起重要作用。,3遠(yuǎn)曲小管和集合管可繼續(xù)重吸收部分水和NA等，此段的重吸收量受血管升壓素和醛固酮的調(diào)節(jié)，在決定尿量和終尿質(zhì)的方面起著十分重要的作用。其主要功能為參與機(jī)體對(duì)體液及酸堿等的調(diào)節(jié)，在維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定中起主要作用。,3．重吸收效率與閾值比較原尿和終尿的量和質(zhì)可發(fā)現(xiàn)，成人每天生成的原尿量約有180L。但終尿量每天只有15L左右，表明腎小管的重吸收量達(dá)99％。腎小管和集合管的重吸收是有選擇性的，原尿中葡萄糖、氨基酸和少量蛋白質(zhì)全部被腎小管重吸收，水和電解質(zhì)大部分被吸收，尿素只有部分被重吸收，肌酐則完全不被重吸收。腎小管對(duì)許多物質(zhì)的重吸收作用有一定限度，稱最大重吸收量或閾值。如當(dāng)尿糖濃度超過10MOL／L后，重吸收量不再增加，尿中出現(xiàn)葡萄糖，這個(gè)濃度界限稱為腎糖閾。,二腎小管、集合管的排泌1．排泌方式與物質(zhì)排泌有主動(dòng)和被動(dòng)兩個(gè)過程。酚紅PSP、芐青霉素、碘銳特及對(duì)氨基馬尿酸PAH等進(jìn)入機(jī)體的異物，均可借助于同一組酶系主動(dòng)排泌，它們相互間有競爭性抑制作用，有些強(qiáng)堿性物質(zhì)如組胺等也可主動(dòng)排泌。被動(dòng)排泌的物質(zhì)有弱堿氨、奎寧等和弱酸水楊酸等，以及NA重吸收耦聯(lián)的H、K排泌和非離子型擴(kuò)散。,2排泌部位與功能1近端小管、遠(yuǎn)端小管和集合管都有泌H功能通過HNA交換，達(dá)到重吸收NAHC03的目的，在調(diào)節(jié)機(jī)體酸堿平衡方面起著重要作用。腎臟排H保NA的另一種方式是分泌NH3，在酸中毒時(shí)尤為重要。近端小管、遠(yuǎn)端小管和集合管不斷地產(chǎn)生NH3，并向小管液擴(kuò)散，與其中的H結(jié)合成離子型NH4，銨鹽的生成不僅促進(jìn)了排H，也促進(jìn)了NAHC03重吸收。,2遠(yuǎn)曲小管和集合管泌鉀功能一般當(dāng)有NA的主動(dòng)吸收時(shí)，才會(huì)有K的分泌，兩者轉(zhuǎn)運(yùn)方向相反，稱為KNA交換。KNA交換和HNA交換有相互抑制現(xiàn)象，即HNA交換增多時(shí)，KNA交換將減少，導(dǎo)致酸中毒時(shí)血鉀升高的原因之一。原尿中的鉀幾乎全部在近端小管被重吸收，故尿中排出的K主要來源于鉀的排泌。,3近端小管的排泌功能肌酐和對(duì)氨基馬尿酸等，既能從腎小球?yàn)V過，又能由腎小管排泌。進(jìn)人體內(nèi)的某些物質(zhì)，如青霉素、酚紅等，則主要通過近端小管的排泌排泄。,3．排泌限量排泌作用也有一定限度，稱排泌極限量，通常以TM表示。以PHA為例，當(dāng)其血漿濃度高于200MG／L時(shí)，排泌可達(dá)極限量。TMPAH一般為77MG／MIN。,三腎小管轉(zhuǎn)運(yùn)功能的調(diào)節(jié)腎小管和集合管轉(zhuǎn)運(yùn)功能的調(diào)節(jié)，主要是神經(jīng)和體液因素主要是血管升壓素和醛固酮對(duì)腎小管上皮細(xì)胞重吸收水分和無機(jī)離子的影響，這在保證體內(nèi)水和電解質(zhì)的動(dòng)態(tài)平衡、血漿滲透壓及細(xì)胞外容量等的相對(duì)恒定均有重要意義。,

簡介：化工學(xué)院生物化學(xué)（36學(xué)時(shí)）習(xí)題集11蛋白質(zhì)化學(xué)蛋白質(zhì)化學(xué)一選擇題選擇題1下列氨基酸含有吲哚環(huán)的氨基酸是，含有咪唑環(huán)的氨基酸是AMETBPHECTRPDVALEHIS2下列哪一種氨基酸［?。荩?AVALBLEUCPHEDGLYEGLUD253在生理PH條件下，具有緩沖作用的氨基酸殘基是ATYRBTRPCHISDLYSETHR4在PH10的谷氨酸溶液中，下列哪一種結(jié)構(gòu)形式占優(yōu)勢A羧基氨基都解離B只?。然怆xC只Γ－羧基解離D?。然cΓ－羧基都解離5天冬氨酸的PK1209PK2386PK3982則其等電點(diǎn)為A209B297C386D684E9826分子中含有兩個(gè)不對(duì)稱碳原子的氨基酸是APROBTYRCSERDARGETHR7氨基酸不具有的化學(xué)反應(yīng)是A雙縮脲反應(yīng)B茚三酮反應(yīng)CDNFB反應(yīng)DPITC反應(yīng)E甲醛滴定8測定一個(gè)五肽的氨基酸順序的最好方法是ADNFB法B氨肽酶法CPITC法D羧肽酶法E片段重疊法9下列關(guān)于還原型谷胱甘肽結(jié)構(gòu)或性質(zhì)的敘述，哪一種是錯(cuò)誤的A含有兩個(gè)肽鍵B＂胱＂代表半胱氨酸C谷氨酸的Γ－COOH參與了肽鍵的形成D含有一個(gè)巰基E變成氧化型谷胱甘肽時(shí)脫去的兩個(gè)氫原子是由同一個(gè)還原型谷胱基肽分子所提供的10可使二硫鍵氧化斷裂的試劑是A尿素B巰基乙醇C溴化氰D過甲酸E以上都不是11在一個(gè)肽平面中含有的原子為A3B4C5D6E712下列有關(guān)?。菪臄⑹?，哪一項(xiàng)是錯(cuò)誤的A氨基酸殘基之間形成的＝CO與HN之間的氫鍵使?。菪€(wěn)定B減弱側(cè)鏈基團(tuán)R之間不利的相互作用，可使Α－螺旋穩(wěn)定C疏水作用使?。菪€(wěn)定D在某些蛋白中，Α－螺旋是二級(jí)結(jié)構(gòu)中的一種結(jié)構(gòu)類型E脯氨酸和甘氨酸的出現(xiàn)可使?。菪袛?3下列關(guān)于二硫鍵的敘述，哪一項(xiàng)是錯(cuò)誤的A二硫鍵是兩條肽鏈或者同一條肽鏈的兩分子半胱氨酸之間氧化后形成的B多肽鏈中的一個(gè)二硫鍵與巰基乙醇反應(yīng)可形成兩個(gè)巰基C二硫鍵對(duì)穩(wěn)定蛋白質(zhì)的構(gòu)象起重要作用D在某些蛋白質(zhì)中，二硫鍵是一級(jí)結(jié)構(gòu)所必需的（如胰島素）E二硫鍵對(duì)于所有蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)是必需的14下列維持蛋白質(zhì)分子空間結(jié)構(gòu)的化學(xué)鍵的敘述，哪個(gè)是錯(cuò)誤的A疏水作用是非極性氨基酸殘基的側(cè)鏈基團(tuán)避開水、相互聚積在一起的現(xiàn)象B在蛋白質(zhì)分子中只存在CO與HN之間形成氫鍵C帶負(fù)電的羧基與氨基、胍基、咪唑基等基團(tuán)之間可形成鹽鍵D在羧基與羥基之間也可以形成酯鍵ECH2OH與CH2OH之間存在著范德華作用力15一條含有105個(gè)氨基酸殘基的多肽鏈，若只存在?。菪瑒t其長度為。A1575NMB3780NMC2575NMD3050NME1250NM16一純品血紅素蛋白含鐵0426，其最小分子量為多少道爾頓（FE56）A11500B12500C13059D13146E1401517用下列方法測定蛋白質(zhì)含量時(shí)，哪種方法需要完整的肽鍵A雙縮脲法B凱氏定氮C紫外吸收D茚三酮反應(yīng)E氨試劑反應(yīng)18氨基酸與蛋白質(zhì)共有的性質(zhì)是A膠體性質(zhì)B沉淀反應(yīng)C變性性質(zhì)D兩性性質(zhì)E雙縮脲反應(yīng)化工學(xué)院生物化學(xué)（36學(xué)時(shí)）習(xí)題集312穩(wěn)定蛋白質(zhì)膠體狀態(tài)的因素是蛋白質(zhì)分子上的＿＿＿＿及＿＿＿＿。13蛋白質(zhì)溶液是親水膠體，它具有一般膠體溶液的共同性質(zhì)，如＿＿＿＿、＿＿＿、＿＿＿和＿＿＿。14破壞蛋白質(zhì)膠體溶液穩(wěn)定因素的因素有＿＿＿＿、＿＿＿＿、＿＿＿＿和＿＿＿＿。15超離心技術(shù)的S是＿＿＿＿，單位是＿＿＿＿。16兩性離子是指＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。17＿＿＿＿和＿＿＿是破壞?。菪陌被?。前者不是一個(gè)真正的?。被?；后者沒有同分異構(gòu)體。18維系蛋白質(zhì)構(gòu)象的作用力有＿＿＿＿、＿＿＿＿、＿＿＿＿、＿＿＿＿、＿＿＿＿。19PAULING等人提出的蛋白質(zhì)?。菪Ｐ椭忻咳β菪撸撸撸甙被釟埢?，高度為＿＿＿＿。每個(gè)氨基酸殘基沿軸上升＿＿＿＿并旋轉(zhuǎn)100℃。20膠原蛋白是由＿＿＿＿股左旋＿＿肽鏈組成的右旋結(jié)構(gòu)。21兩條相當(dāng)伸展的肽鏈（或同一條肽鏈的兩個(gè)伸展的片段）之間形成氫鍵的二級(jí)結(jié)構(gòu)稱為＿＿＿＿22蛋白質(zhì)沉淀作用的實(shí)質(zhì)是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿23蛋白質(zhì)主鏈構(gòu)象的結(jié)構(gòu)單元包括________、＿＿＿＿、＿＿＿＿、＿＿＿＿。（三）是非判斷題（三）是非判斷題1天然氨基酸都具有一個(gè)不對(duì)稱的Α－碳原子。2在天然氨基酸中只限于?。危龋材芘c亞硝酸反應(yīng)，定量放出氮?dú)狻?由于靜電作用，在等電點(diǎn)時(shí)氨基酸溶解度最小。4兩性離子氨基酸在溶液中，其正負(fù)離子的解離度與溶液PＨ無關(guān)。5氨基酸的等電點(diǎn)可以由其分子上解離基團(tuán)的解離常數(shù)來確定。6溶液的PＨ可以影響氨基酸的PＩ值。7公式PＩ＝（PＫ２＋PＫ３）／２是計(jì)算酸性或堿性氨基酸PＩ的公式。8ＧＳＨ分子中含有－ＳＨ基，故能參與體內(nèi)一些氧化還原反應(yīng)。9天然蛋白質(zhì)?。菪秊橛沂致菪?。10多肽鏈能否形成Α－螺旋及螺旋是否穩(wěn)定與其氨基酸組成和排列順序直接有關(guān)。11蛋白質(zhì)的氨基酸排列順序在很大程度上決定它的構(gòu)象。12有一小肽，用測Ｎ－末端的方法未測出游離的?。危龋?，則此肽必為環(huán)肽。13當(dāng)某一氨基酸晶體溶于PH70的水中后，所得溶液的PH為80，則此氨基酸的PI點(diǎn)必大于80。14一般說來，蛋白質(zhì)在水溶液中，非極性氨基酸殘基傾向于埋在分子的內(nèi)部而不是表面。15在多肽鏈中的主鏈中，CCΑ和NCΑ鍵能夠自由旋轉(zhuǎn)。16蛋白質(zhì)中一個(gè)氨基酸殘基的改變，必定引起蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的顯著變化。17肽鍵是雙鍵，所以不能夠自由旋轉(zhuǎn)。18在每一種蛋白質(zhì)多肽鏈中，氨基酸殘基排列順序都是一定的，而不是隨機(jī)的。19蛋白質(zhì)變性后溶解度降低，主要是因?yàn)殡姾杀恢泻图八け蝗コ鸬摹?0大多數(shù)蛋白質(zhì)的主要帶電基團(tuán)是由它的N－末端的氨基酸和C末端的氨基酸所貢獻(xiàn)。21蛋白質(zhì)的氨基酸順序（一級(jí)結(jié)構(gòu)）在很大程度上決定它的三維構(gòu)象。22蛋白質(zhì)變性后，其空間結(jié)構(gòu)由高度緊密狀態(tài)變成松散狀態(tài)。23蛋白質(zhì)構(gòu)象是蛋白質(zhì)分子中的原子繞單鍵旋轉(zhuǎn)而產(chǎn)生的蛋白質(zhì)分子中的各原子的空間排布。因此，構(gòu)象并不是一種可以分離的單一立體結(jié)構(gòu)形式。（四）名詞解釋（四）名詞解釋1構(gòu)象（CONFMATION2構(gòu)型（CONFIGURATION）3肽平面PEPTIDEPLANE4Α－螺旋?。璈ELIX5Β－折疊或Β－折疊片Β－PLEATEDSHEET6Β－轉(zhuǎn)角（Β－TURN）7無規(guī)卷曲ROMCOIL8寡聚蛋白OLIGOMERICPROTEIN9簡單蛋白SIMPLEPROTEIN10結(jié)合蛋白CONJUGATEDPROTEIN11蛋白質(zhì)的變性作用DENATURATION12蛋白質(zhì)的復(fù)性RENATURATION五問答及計(jì)算題問答及計(jì)算題1測得一種蛋白質(zhì)分子中TRP殘基占總量的029％，計(jì)算該蛋白質(zhì)的最低分子量。2一種蛋白質(zhì)按其重量含有165％亮氨酸和248％異亮氨酸，計(jì)算該蛋白質(zhì)的最低分子量。3聚賴氨酸在PH7時(shí)呈無規(guī)線團(tuán)在PH10時(shí)則呈Α螺旋為什么4多肽鏈片段是在疏水環(huán)境中還是在親水環(huán)境中更利于?。菪男纬蔀槭裁?

簡介：生物化學(xué)試題庫生物化學(xué)試題庫蛋白質(zhì)化學(xué)一、填空題1構(gòu)成蛋白質(zhì)的氨基酸有種，一般可根據(jù)氨基酸側(cè)鏈（R）的大小分為側(cè)鏈氨基酸和側(cè)鏈氨基酸兩大類。其中前一類氨基酸側(cè)鏈基團(tuán)的共同特怔是具有性；而后一類氨基酸側(cè)鏈（或基團(tuán)）共有的特征是具有性。堿性氨基酸（PH6～7時(shí)荷正電）有兩種，它們分別是氨基酸和氨基酸；酸性氨基酸也有兩種，分別是氨基酸和氨基酸。2紫外吸收法（280NM）定量測定蛋白質(zhì)時(shí)其主要依據(jù)是因?yàn)榇蠖鄶?shù)可溶性蛋白質(zhì)分子中含有氨基酸、氨基酸或氨基酸。3絲氨酸側(cè)鏈特征基團(tuán)是；半胱氨酸的側(cè)鏈基團(tuán)是；組氨酸的側(cè)鏈基團(tuán)是。這三種氨基酸三字母代表符號(hào)分別是4氨基酸與水合印三酮反應(yīng)的基團(tuán)是，除脯氨酸以外反應(yīng)產(chǎn)物的顏色是；因?yàn)楦彼崾莵啺被?，它與水合印三酮的反應(yīng)則顯示色。5蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中主鍵稱為鍵，次級(jí)鍵有、、、、；次級(jí)鍵中屬于共價(jià)鍵的是鍵。6鐮刀狀貧血癥是最早認(rèn)識(shí)的一種分子病，患者的血紅蛋白分子亞基的第六位氨酸被氨酸所替代，前一種氨基酸為性側(cè)鏈氨基酸，后者為性側(cè)鏈氨基酸，這種微小的差異導(dǎo)致紅血蛋白分子在氧分壓較低時(shí)易于聚集，氧合能力下降，而易引起溶血性貧血。7EDMAN反應(yīng)的主要試劑是；在寡肽或多肽序列測定中，EDMAN反應(yīng)的主要特點(diǎn)是。8蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的基本類型有、、和。其中維持前三種二級(jí)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定鍵的次級(jí)鍵為鍵。此外多肽鏈中決定這些結(jié)構(gòu)的形成與存在的根本性因與、、有關(guān)。而當(dāng)我肽鏈中出現(xiàn)脯氨酸殘基的時(shí)候，多肽鏈的螺旋往往會(huì)。9蛋白質(zhì)水溶液是一種比較穩(wěn)定的親水膠體，其穩(wěn)定性主要因素有兩個(gè)，分別是和。10蛋白質(zhì)處于等電點(diǎn)時(shí)，所具有的主要特征是、。11在適當(dāng)濃度的巰基乙醇和8M脲溶液中，RNASE（牛）喪失原有活性。這主要是因?yàn)镽NA酶的被破壞造成的。其中巰基乙醇可使RNA酶分子中的鍵破壞。而8M脲可使鍵破壞。當(dāng)用透析方法去除巰基乙醇和脲的情況下，RNA酶又恢復(fù)原有催化功能，這種現(xiàn)象稱為。12細(xì)胞色素C，血紅蛋白的等電點(diǎn)分別為10和71，在PH85的溶液中它們分別荷的電性是、。13在生理PH條件下，蛋白質(zhì)分子中氨酸和氨酸殘基的側(cè)鏈幾乎完全帶負(fù)電，而氨酸、氨酸或氨酸殘基側(cè)鏈完全荷正電（假設(shè)該蛋白質(zhì)含有這些氨基酸組分）。14包含兩個(gè)相鄰肽鍵的主肽鏈原子可表示為，單個(gè)肽平面及包含的原子可表示為。15當(dāng)氨基酸溶液的PH＝PI時(shí)，氨基酸（主要）以離子形式存在；當(dāng)PH＞PI時(shí)，氨基生物化學(xué)試題庫A、理化因素致使氫鍵破壞B、疏水作用破壞C、蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)破壞D、蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)破壞，分子量變小12加入下列試劑不會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性的是（）A、尿素（脲）B、鹽酸胍C、十二烷基磺酸SDSD、硫酸銨13血紅蛋白的氧合動(dòng)力學(xué)曲線呈S形，這是由于（）A、氧可氧化FE（Ⅱ），使之變?yōu)镕E（Ⅲ）B、第一個(gè)亞基氧合后構(gòu)象變化，引起其余亞基氧合能力增強(qiáng)C、這是變構(gòu)效應(yīng)的顯著特點(diǎn)，它有利于血紅蛋白質(zhì)執(zhí)行輸氧功能的發(fā)揮D、亞基空間構(gòu)象靠次級(jí)鍵維持，而亞基之間靠次級(jí)鍵締合，構(gòu)象易變14下列因素中主要影響蛋白質(zhì)螺旋形成的是（）A、堿性氨基酸的相近排列B、酸性氨基酸的相近排列C、脯氨酸的存在D、甘氨酸的存在15蛋白質(zhì)中多肽鏈形成螺旋時(shí)，主要靠哪種次級(jí)鍵維持（）A、疏水鍵B、肽鍵C、氫鍵D、二硫鍵16關(guān)于蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的敘述，哪項(xiàng)不恰當(dāng)（）A、胰島素分子是由兩條肽鏈構(gòu)成，所以它是多亞基蛋白，具有四級(jí)結(jié)構(gòu)B、蛋白質(zhì)基本結(jié)構(gòu)（一級(jí)結(jié)構(gòu)）中本身包含有高級(jí)結(jié)構(gòu)的信息，所以在生物體系中，它具有特定的三維結(jié)構(gòu)C、非級(jí)性氨基酸側(cè)鏈的疏水性基團(tuán)，避開水相，相互聚集的傾向，對(duì)多肽鏈在二級(jí)結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上按一定方式進(jìn)一步折疊起著重要作用D、亞基間的空間排布是四級(jí)結(jié)構(gòu)的內(nèi)容，亞基間是非共價(jià)締合的17有關(guān)亞基的描述，哪一項(xiàng)不恰當(dāng)（）A、每種亞基都有各自的三維結(jié)構(gòu)B、亞基內(nèi)除肽鍵外還可能會(huì)有其它共價(jià)鍵存在C、一個(gè)亞基（單位）只含有一條多肽鏈D、亞基單位獨(dú)立存在時(shí)具備原有生物活性18關(guān)于可溶性蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)的敘述，哪一項(xiàng)不恰當(dāng)（）A、疏水性氨基酸殘基盡可能包裹在分子內(nèi)部B、親水性氨基酸殘基盡可能位于分子內(nèi)部C、羧基、氨基、胍基等可解離基團(tuán)多位于分子表面D、苯丙氨酸、亮氨酸、異亮氨酸等殘基盡可能位于分子內(nèi)部19蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)形成的驅(qū)動(dòng)力是（）A、范德華力B、疏水作用力C、氫鍵D、離子鍵20引起蛋白質(zhì)變性原因主要是（）A、三維結(jié)構(gòu)破壞B、肽鍵破壞C、膠體穩(wěn)定性因素被破壞D、亞基的解聚21以下蛋白質(zhì)中屬寡聚蛋白的是（）A、胰島素B、RNASEC、血紅蛋白D、肌紅蛋白22下列測定蛋白質(zhì)分子量的方法中，哪一種不常用（）A、SDSPAGE法B、滲透壓法C、超離心法D、凝膠過濾（分子篩）法23分子結(jié)構(gòu)式為HS－CH2－CH－COO－的氨基酸為（）A、絲氨酸B、蘇氨酸C、半胱氨酸D、賴氨酸24下列氨基酸中為酪氨酸的是（）A、CH2－CH－COO－B、HO－－CH2－CH－COO－NH3NH3C、CH2－CH－COO－D、CH3－S－CH2－CH2－CH－COO－HNNH

簡介：南開19春學(xué)期（1709、1803、1809、1903）生物化學(xué)在線作業(yè)24、B一、單選題共20題，40分1、熱變性的DNA分子在適當(dāng)條件下可以復(fù)性，條件之一是A驟然冷卻B緩慢冷卻C濃縮D加入濃的無機(jī)鹽【南開大學(xué)】選擇答案B2、下列哪一項(xiàng)不是膽固醇和酮體合成的共同點(diǎn)A膽固醇和酮體的合成都是在肝細(xì)胞中進(jìn)行。B膽固醇和酮體合成的前體都是乙酰輔酶A。CHMGCOA是膽固醇和酮體合成的共同中間體。D膽固醇和酮體合成的場所都是細(xì)胞質(zhì)?！灸祥_大學(xué)】選擇答案D3、金屬離子充當(dāng)酶的輔助因子時(shí)，其作用不包括A作為活性部位的組成成分B將底物和酶螯合形成絡(luò)合物C決定酶催化的專一性D傳遞電子【南開大學(xué)】選擇答案C4、葡萄糖從血漿進(jìn)入紅細(xì)胞的轉(zhuǎn)運(yùn)為A簡單擴(kuò)散B促進(jìn)擴(kuò)散C一級(jí)主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)D二級(jí)主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)【南開大學(xué)】選擇答案B5、血漿中，游離脂肪酸與下列哪種蛋白質(zhì)結(jié)合A清蛋白B球蛋白C脂蛋白D糖蛋白【南開大學(xué)】選擇答案A6、在糖原合成中，下列哪種化合物是糖基的供體AUDP葡萄糖BCDP葡萄糖C1磷酸葡萄糖D6磷酸葡萄糖【南開大學(xué)】選擇答案A7、尿素合成途徑中，氨甲酰磷酸合成酶的別構(gòu)激活劑是A谷氨酸BN乙酰谷氨酸C天冬氨酸D精氨酸A糖原分解作用B糖異生作用C脂肪分解作用D糖原合成作用【南開大學(xué)】選擇答案D16、合成1分子尿素需消耗幾個(gè)高能磷酸鍵A1個(gè)B2個(gè)C3個(gè)D4個(gè)【南開大學(xué)】選擇答案D17、嘌呤核苷酸從頭合成時(shí)，首先合成的是下列哪種核苷酸AAMPBGMPCIMPDATP【南開大學(xué)】選擇答案C18、異三聚體G蛋白的Α亞基具有哪種酶的活性AATPASEBGTPASECCTPASEDUTPASE【南開大學(xué)】選擇答案B19、關(guān)于蛋白質(zhì)四級(jí)結(jié)構(gòu)的正確敘述是A蛋白質(zhì)四級(jí)結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性由二硫鍵維系B四級(jí)結(jié)構(gòu)是蛋白質(zhì)保持生物學(xué)活性的必要條件C蛋白質(zhì)都有四級(jí)結(jié)構(gòu)D蛋白質(zhì)亞基間由非共價(jià)鍵聚合【南開大學(xué)】選擇答案D20、肝細(xì)胞中，合成尿素的場所是A線粒體B胞質(zhì)C內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和胞質(zhì)D線粒體和胞質(zhì)【南開大學(xué)】選擇答案D二、多選題共10題，20分1、參與Α酮戊二酸脫氫酶作用的是A磷酸吡哆醛B焦磷酸硫胺素C硫辛酸DFAD【南開大學(xué)】選擇答案BCD2、有兩種維生素可促進(jìn)小腸對(duì)CA2的吸收，除維生素D外，還有A維生素E

簡介：生物化學(xué)生物化學(xué)本科本科1單選題單選題1關(guān)于腐敗作用敘述正確的是AA是腸道細(xì)菌對(duì)蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)消化產(chǎn)物的作用B主要是氨基酸脫羧基、脫氨基的分解作用C主要在大腸進(jìn)行D腐敗作用產(chǎn)生的都是有害物質(zhì)是細(xì)菌本身的代謝過程，以有氧分解為主2PKA主要使哪種氨基酸殘基磷酸化A酪氨酸B甘氨酸C酪氨酸甘氨酸D甘氨酸絲氨酸蘇氨酸絲氨酸3在線粒體內(nèi)進(jìn)行的代謝途徑是A糖酵解B磷酸戊糖途徑C糖原合成與分解D脂酸合成脂酸Β氧化4引起血中丙酮酸含量升高是由于缺乏AA硫胺素ADNA模板上的不連續(xù)DNA片段B隨從鏈上生成的不連續(xù)DNA片段C前導(dǎo)鏈上生成的不連續(xù)DNA片段D引物酶催化合成的RNA片段由DNA連接酶合成的DNA片段9結(jié)合酶表現(xiàn)有活性的條件是CA輔酶單獨(dú)存在B有激動(dòng)劑存在C全酶形式存在D亞基單獨(dú)存在酶蛋白單獨(dú)存在10基因表達(dá)過程中僅在原核生物中出現(xiàn)而真核生物沒有的是ATRNA的稀有堿基BAUG用作起始密碼子C岡崎片段DDNA連接酶Σ因子11關(guān)于“基因表達(dá)”的概念敘述錯(cuò)誤的是AA其過程總是經(jīng)歷基因轉(zhuǎn)錄及翻譯的過程B經(jīng)歷基因轉(zhuǎn)錄及翻譯等過程C某些基因表達(dá)產(chǎn)物是蛋白質(zhì)分子D某些基因表達(dá)產(chǎn)物不是蛋白質(zhì)分子某些基因表達(dá)產(chǎn)物是RNA分子

簡介：中國醫(yī)科大學(xué)生物化學(xué)中專起點(diǎn)大專在線作業(yè)試卷總分100得分100一、單選題共50道試題共100分1糖酵解時(shí)，提供P能使ADP生成ATP的一對(duì)代謝物是A3磷酸甘油醛及6磷酸果糖B13二磷酸甘油酸及磷酸烯醇式丙酮酸C3磷酸甘油酸及6磷酸葡萄糖D1磷酸葡萄糖及磷酸烯醇式丙酮酸E16雙磷酸果糖及13二磷酸甘油酸正確答案B2有關(guān)親水蛋白質(zhì)的高分子性質(zhì)的描述中有哪項(xiàng)是錯(cuò)誤的A蛋白質(zhì)在水溶液中的膠粒大小范圍為1－100NMB變性蛋白質(zhì)的粘度增大C蛋白質(zhì)分子表面具有水化層D它不能通過半透膜E分子形狀越對(duì)稱，其粘度越大正確答案E3關(guān)于呼吸鏈組分的敘述正確的是A復(fù)合體Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ均橫跨線粒體內(nèi)膜BNADH泛醌還原酶的輔基為FADC每分子含有FE4S4的鐵硫蛋白可傳遞4個(gè)電子D細(xì)胞色素氧化酶僅含有鐵卟啉參與電子傳遞E泛醌在線粒體內(nèi)膜中的活動(dòng)范圍較大正確答案E4快速調(diào)節(jié)是指酶的A活性調(diào)節(jié)B含量調(diào)節(jié)C酶的變性D酶降解E酶區(qū)域性分布正確答案A5下列嘌呤核苷酸之間的轉(zhuǎn)變中，哪一個(gè)是不能直接進(jìn)行的AGMP→IMPBIMP→XMPCAMP→IMPDXMP→GMPD甲酰蛋氨酸TRNAE蛋氨酸TRNA正確答案E11化學(xué)毒氣路易斯氣與酶活性中心結(jié)合的基團(tuán)是A絲氨酸的羥基B賴氨酸的Ε氨基C谷氨酸的Γ羧基D半胱氨酸的巰基E組氨酸的咪唑基正確答案D12關(guān)于蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的下列描述，其中正確的是A是至少有100個(gè)以上的氨基酸組成的高分子化合物B每一蛋白質(zhì)都含有2條以上的多肽鏈C蛋白質(zhì)空間構(gòu)象遭到破壞，其生物學(xué)活性隨之喪失D不同蛋白質(zhì)分子的氨基酸組成基本相同E每種蛋白質(zhì)都有種類不同的輔基正確答案C13可與谷丙轉(zhuǎn)氨酶共同催化丙氨酸和Α酮戊二酸反應(yīng)產(chǎn)生游離氨的酶是A谷氨酸脫氫酶B谷草轉(zhuǎn)氨酶C谷氨酰胺酶D谷氨酰胺合成酶EΑ酮戊二酸脫氫酶正確答案A14下列哪一種情況下尿中膽素原排泄減少A腸梗阻B溶血C肝細(xì)胞炎癥D膽道梗阻E貧血正確答案D15蛋白質(zhì)分子在280NM處的吸收峰主要是由哪種氨基酸引起的A谷氨酸B色氨酸

簡介：第１講動(dòng)物生化命題規(guī)律分析及概述章節(jié)要點(diǎn)精講（３）第２講蛋白質(zhì)化學(xué)（９）第３講核酸化學(xué)（１５）第４講酶化學(xué)（１９）第５講糖代謝（２８）第６講生物氧化（３８）第７講脂代謝（４６）第８講氨基酸和核苷酸代謝（５６）第９講ＤＮＡ生物合成（６２）第１０講ＲＮＡ生物合成（６８）第１１講蛋白質(zhì)生物合成（７５）

簡介：中國醫(yī)科大學(xué)生物化學(xué)中專起點(diǎn)大專在線作業(yè)0001試卷總分100得分100一、單選題共50道試題共100分1糖酵解時(shí)，提供P能使ADP生成ATP的一對(duì)代謝物是A3磷酸甘油醛及6磷酸果糖B13二磷酸甘油酸及磷酸烯醇式丙酮酸C3磷酸甘油酸及6磷酸葡萄糖D1磷酸葡萄糖及磷酸烯醇式丙酮酸E16雙磷酸果糖及13二磷酸甘油酸正確選項(xiàng)B2有關(guān)親水蛋白質(zhì)的高分子性質(zhì)的描述中有哪項(xiàng)是錯(cuò)誤的A蛋白質(zhì)在水溶液中的膠粒大小范圍為1－100NMB變性蛋白質(zhì)的粘度增大C蛋白質(zhì)分子表面具有水化層D它不能通過半透膜E分子形狀越對(duì)稱，其粘度越大正確選項(xiàng)E3關(guān)于呼吸鏈組分的敘述正確的是A復(fù)合體Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ均橫跨線粒體內(nèi)膜BNADH泛醌還原酶的輔基為FADC每分子含有FE4S4的鐵硫蛋白可傳遞4個(gè)電子D細(xì)胞色素氧化酶僅含有鐵卟啉參與電子傳遞E泛醌在線粒體內(nèi)膜中的活動(dòng)范圍較大正確選項(xiàng)E4快速調(diào)節(jié)是指酶的A活性調(diào)節(jié)B含量調(diào)節(jié)C酶的變性D酶降解E酶區(qū)域性分布正確選項(xiàng)A5下列嘌呤核苷酸之間的轉(zhuǎn)變中，哪一個(gè)是不能直接進(jìn)行的AGMP→IMPBIMP→XMPCAMP→IMPDXMP→GMPD甲酰蛋氨酸TRNAE蛋氨酸TRNA正確選項(xiàng)E11化學(xué)毒氣路易斯氣與酶活性中心結(jié)合的基團(tuán)是A絲氨酸的羥基B賴氨酸的Ε氨基C谷氨酸的Γ羧基D半胱氨酸的巰基E組氨酸的咪唑基正確選項(xiàng)D12關(guān)于蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的下列描述，其中正確的是A是至少有100個(gè)以上的氨基酸組成的高分子化合物B每一蛋白質(zhì)都含有2條以上的多肽鏈C蛋白質(zhì)空間構(gòu)象遭到破壞，其生物學(xué)活性隨之喪失D不同蛋白質(zhì)分子的氨基酸組成基本相同E每種蛋白質(zhì)都有種類不同的輔基正確選項(xiàng)C13可與谷丙轉(zhuǎn)氨酶共同催化丙氨酸和Α酮戊二酸反應(yīng)產(chǎn)生游離氨的酶是A谷氨酸脫氫酶B谷草轉(zhuǎn)氨酶C谷氨酰胺酶D谷氨酰胺合成酶EΑ酮戊二酸脫氫酶正確選項(xiàng)A14下列哪一種情況下尿中膽素原排泄減少A腸梗阻B溶血C肝細(xì)胞炎癥D膽道梗阻E貧血正確選項(xiàng)D15蛋白質(zhì)分子在280NM處的吸收峰主要是由哪種氨基酸引起的A谷氨酸B色氨酸

簡介：DNA的分離提取及含量測定,一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?掌握從動(dòng)物組織中提取DNA的方法學(xué)習(xí)二苯胺法測定DNA含量的原理和方法,二、實(shí)驗(yàn)原理,取材原則DNA含量高（新鮮），DNA酶活性低實(shí)驗(yàn)條件避免機(jī)械振蕩；防止過酸、過堿對(duì)磷酸二酯鍵的破壞；抑制核酸酶檸檬酸鈉、EDTA；SDS分離與純化的方法一般包括細(xì)胞裂解、酶處理、核酸與其他生物大分子物質(zhì)分離、核酸純化等幾個(gè)主要步驟。,4大量組織樣本DNA提取,組織勻漿裂解細(xì)胞離心獲得核酸蛋白復(fù)合物SDS破壞細(xì)胞膜、核膜；分離組織蛋白與DNA改變鹽濃度分離DNA與RNA015MOL/LNACL沉淀DNP,1MOL/LNACL溶解DNP。氯仿異戊醇振蕩抽提去除蛋白質(zhì)離心分離水相（DNA）與有機(jī)相乙醇沉淀DNA,真核細(xì)胞DNA與蛋白質(zhì)結(jié)合成核蛋白（DNP），RNA與蛋白質(zhì)結(jié)合成RNP，可利用DNP和RNP在不同濃度NACL中溶解度的不同來分離DNP和RNP。,DNP相對(duì)溶解度,NACL（MOL/L）,鹽濃度對(duì)核蛋白溶解度的影響,氯仿去除蛋白質(zhì),氯仿非極性分子，水極性分子；蛋白水溶液與氯仿混合蛋白失水變性。離心變性蛋白質(zhì)的密度比水的密度為大沉淀在水相下面，與溶解在水相中DNA分離。異戊酵（氯仿異戊醇241）劇烈振蕩降低分子表面張力，所以能減少抽提過程中的泡沫產(chǎn)生（混合液內(nèi)產(chǎn)生氣泡；氣泡阻止相互間充分作用）。,乙醇沉淀DNA（脫水）,5小量組織/細(xì)胞樣品中DNA的制備試劑盒,6DNA含量的測定二苯胺法,722分光光度計(jì)檢測二茉胺法靈敏度不高，樣品中DNA含量50ΜG/ML,核酸含量的測定方法,核酸是由磷酸、戊糖、堿基所組成的核苷酸的多聚高分子。三者以等分子數(shù)而存在，所以只要測定三者中任何一處成分的含量，就可推算出核酸的含量。常用的核酸測定方法有紫外吸收法、定磷法、定糖法RNA的定量測定地衣酚法核糖DNA的定量測定二苯胺法脫氧糖鉬藍(lán)法定磷,紫外吸收法中DNA或RNA的定量,A26010相當(dāng)于50ΜG/ML雙鏈DNA40ΜG/ML單鏈DNA（或RNA）20ΜG/ML寡核苷酸,可見光譜380～780NM,分光光度計(jì),比色杯,石英比色杯3ML，50100ΜL,BIOPHOTOMETER,,一次性比色杯；50ΜL樣品,NANOPHOTOMETER（徳）,SINGLEANDMULTIWAVELENGTHMEASUREMENTCOMBINEDWITHKINETICMETHODSTHEFULLWAVELENGTHSCAN190NM1100NMALLOWSCURVEINTERPRETATIONFORATTAINMENTOFMOREDETAILEDSCIENTIFICKNOWLEDGEOVERWHOLESPECTRUMSAMPLESIZEASLOWAS05UL（2NG/UL18750NG/ULDSDNA）。,THERMOSCIENTIFICNANODROP2000CMARCH2,2009,THERMOSCIENTIFICNANODROP2000AND2000CSPECTROPHOTOMETERSTHESEEASYTOUSE,UVVISINSTRUMENTSENABLEA5SECONDMEASUREMENTTIMEOFDNA,RNAANDPROTEINSONASAMPLESIZEASLOWAS05UL,三、實(shí)驗(yàn)操作,兔肝200G/班，去脂，剪碎↓400ML冷1XSSC，5’，23次↓400ML冷1XSSC（015MNACL檸檬酸鈉）勻漿12’↓1520ML勻漿液/組（記錄實(shí)際體積）↓離心6000RPM，4℃，15’↓記錄上清體積,,1兔肝組織DNA的提取,沉淀5V015MOL/LNACL01MOL/LNA2EDTA↓攪拌，滴加5SDS→1↓攪拌，加固體NACL→1MOL/L↓攪拌30’→NACL全溶↓等V氯仿/異戊醇241，振蕩20’↓離心6000RPM，4℃，15’,水相（含DNA鈉鹽）→,蛋白凝膠層→,有機(jī)相→,↓轉(zhuǎn)移水相→150ML燒杯↓攪動(dòng)，加2V冷95乙醇沉淀DNA↓70乙醇，2’（10ML）→除鹽↓95乙醇，2’（10ML）→脫水↓100乙醇，2’（10ML）→脫水↓吹干3ML蒸餾水溶解DNA,2繪制DNA的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線,樣品稀釋,,,,,,,向16號(hào)管中加入4ML二苯胺試劑，混合均勻。將上述各管放入沸水浴中精確反應(yīng)10’，冷卻。595NM波長下測每管的吸收值。將各管在595NM下的吸收值對(duì)加人的DNA的ΜG數(shù)作圖，應(yīng)得一條通過零點(diǎn)的直線。,3兔肝DNA樣品中DNA含量的測定,2ML（不同稀釋度）免肝DNA溶液4ML二苯胺試劑沸水浴中精確加熱10’，冷卻用管1做空白對(duì)照測該管在595NRN下的光吸收值。根據(jù)DNA的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，計(jì)算所制備的DNA樣品中的DNA含量。,4實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算DAN產(chǎn)率,DNA含量/毫升待測液標(biāo)準(zhǔn)曲線查得值稀釋倍數(shù)XXΜG/ML,思考題,肝細(xì)胞的勻漿液（含05MOL/L氯化鈉00L5MOL/L檸檬酸鈉，PH70）經(jīng)離心為什么保留沉淀而不要上清液為什么提取液（如勻漿液）中要加人檸檬酸鈉和EDTA在DNA制備過程中為什么要加人SDS在DNA制備過程中為什么要加人氯仿一異戊醇結(jié)合本人實(shí)際操作的體會(huì)，討論在提取過程中應(yīng)如何避免大分子DNA的降解和斷裂,組織勻漿,勻漿液離心分離DNP,,

簡介：第18章維生素與無機(jī)物,VITAMINSANDMINERALS,定義維生素VITAMIN是機(jī)體維持正常功能所必需，但在體內(nèi)不能合成或合成量很少，必須由食物供給的一組低分子量有機(jī)物質(zhì)。,一、維生素,微量元素TRACEELEMENT指人體每日需要量在100MG以下的化學(xué)元素，主要包括鐵、碘、銅、鋅、錳、硒、氟、鉬、鈷、鉻等。,二、無機(jī)元素,無機(jī)元素MINERALS是維持人體正常生理功能也必不可少的元素。,分類,常量元素MACROELEMENT鈉、鉀、氯、鈣、磷、鎂等,,第一節(jié)脂溶性維生素,LIPIDSOLUBLEVITAMIN,共同特點(diǎn)（1）均為非極性疏水的異戊二烯衍生物（2）不溶于水，溶于脂類及脂肪溶劑（3）在食物中與脂類共存，并隨脂類一同吸收（4）吸收的脂溶性維生素在血液與脂蛋白及某些特殊結(jié)合蛋白特異結(jié)合而運(yùn)輸（5）膽道排泄（不經(jīng)腎排泄）、過多導(dǎo)致中毒種類VITA,VITD,VITE,VITK,一、維生素A又稱抗干眼病維生素,動(dòng)物內(nèi)臟視黃醇酯）植物維生素A原（如Β胡蘿卜素）,（一）視黃醇與其特異的結(jié)合蛋白相結(jié)合而在血液中運(yùn)輸,A1（視黃醇）A2（3脫氫視黃醇）,天然形式,來源,運(yùn)輸形式,（二）視黃醇、視黃醛和視黃酸是維生素A的活性形式,視黃醇、視黃醛和視黃酸是維生素A的活性形式,反異構(gòu)體（全反型）,順異構(gòu)體,,1．視黃醛與視蛋白結(jié)合發(fā)揮其視覺功能,,,2．視黃酸對(duì)基因表達(dá)和組織分化具有調(diào)節(jié)作用,全反式視黃酸和9順視黃酸是執(zhí)行這一重要功能的關(guān)鍵物質(zhì)。與細(xì)胞內(nèi)核受體結(jié)合，與DNA反應(yīng)元件結(jié)合，調(diào)節(jié)某些基因的表達(dá)。缺乏干眼病XEROPHTHALMIA,3．維生素A和胡蘿卜素是有效的抗氧化劑,4維生素A過量可引起中毒,能直接消滅自由基，有助于控制細(xì)胞膜和富含脂質(zhì)組織的脂質(zhì)過氧化。,二、維生素D可在體內(nèi)合成,（一）維生素D的活化形式是1,25二羥維生素D,種類VITD2（麥角鈣化醇）VITD3（膽鈣化醇）VITD2原麥角固醇VITD3原7脫氫膽固醇麥角固醇→VITD2膽固醇→7脫氫膽固醇→VITD3（紫外照射）VITD3在血液中運(yùn)輸與維生素D結(jié)合蛋白VITAMINDBINDINGPROTEIN,DBP相結(jié)合而運(yùn)輸。,,,肝25羥化酶,維生素D3（膽鈣化醇）,,腎，骨，胎盤中的1Α羥化酶,1,25二羥維生素D3（1,25二羥膽鈣化醇）,VITD3的活性形式1,25OH2VITD3,,24,25二羥維生素D3（24,25二羥膽鈣化醇）,腎，骨，胎盤、軟骨中的24羥化酶,,（二）1,25OH2D3具有調(diào)節(jié)血鈣和組織細(xì)胞分化的功能,1．調(diào)節(jié)血鈣水平是1,25OH2D3的重要作用,1,25OH2D3可通過信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)使鈣通道開放，促進(jìn)小腸對(duì)鈣、磷的吸收，影響骨組織的鈣代謝，從而維持血鈣和血磷的正常水平，促進(jìn)骨和牙的鈣化。維生素D缺乏兒童佝僂病RICKETS成人軟骨病OSTEOMALACIA。,21,25OH2D3還具有影響細(xì)胞分化的功能,調(diào)節(jié)多種組織細(xì)胞分化促進(jìn)胰島?細(xì)胞合成與分泌胰島素抑制某些腫瘤細(xì)胞增殖和促進(jìn)分化,3維生素D過量可引起中毒,三、維生素E是體內(nèi)最重要的脂溶性抗氧化物質(zhì),（一）維生素E是生育酚類化合物,苯駢二氫吡喃的衍生物,生育酚TOCOPHEROL?、?、?和?四種生育三烯酚TOCOTRIENOL?、?、?和?四種,（二）維生素E具有抗氧化等多方面的功能,1．維生素E是體內(nèi)最重要的脂溶性抗氧化劑,機(jī)制捕捉過氧化脂質(zhì)自由基,保護(hù)生物膜的結(jié)構(gòu)與功能。,缺乏輕度溶血性貧血。,2．維生素E具有調(diào)節(jié)基因表達(dá)的作用,上調(diào)或下調(diào)生育酚的攝取和降解相關(guān)的基因延緩衰老脂類攝取與動(dòng)脈硬化的相關(guān)基因預(yù)防和治療冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病細(xì)胞外基質(zhì)蛋白的基因、細(xì)胞黏附與炎癥的相關(guān)基因抗炎、維持正常免疫功能細(xì)胞信號(hào)系統(tǒng)和細(xì)胞周期調(diào)節(jié)的相關(guān)基因抑制細(xì)胞增殖，抗腫瘤,3．維生素E能提高血紅素合成的關(guān)鍵酶活性?,血紅素合成關(guān)鍵酶Δ氨基Γ酮戊酸ALA合酶ALA脫水酶缺乏新生兒貧血,4．維生素E缺乏并不多見,臨床上治療先兆流產(chǎn)及習(xí)慣性流產(chǎn)。,四、維生素K又稱凝血維生素,（一）維生素K是2甲基1,4萘醌的衍生物,人工合成K3,,天然形式,K1植物甲萘醌或葉綠醌,K2腸道細(xì)菌的產(chǎn)物,（二）維生素K是多種?谷氨酰羧化酶的輔酶,1．維生素K具有促進(jìn)凝血作用,2．維生素K對(duì)骨代謝具有重要作用,3．維生素K缺乏可引起出血,第二節(jié)水溶性維生素,WATERSOLUBLEVITAMIN,易溶于水，故易隨尿液排出體內(nèi)不易儲(chǔ)存，必須經(jīng)常從食物中攝取作用比較單一，主要構(gòu)成酶的輔助因子直接影響某些酶的催化作用。,概述,種類B族維生素，維生素C,共同特點(diǎn),一、維生素B1形成輔酶焦磷酸硫胺素,（一）焦磷酸硫胺素是維生素B1的活性形式,焦磷酸硫胺素THIAMINEPYROPHOSPHATE,TPP,,TPP是Α酮酸氧化脫羧酶的輔酶，也是轉(zhuǎn)酮酶的輔酶在神經(jīng)傳導(dǎo)中起一定的作用，抑制膽堿酯酶的活性,1生化作用,腳氣病，末梢神經(jīng)炎,（二）維生素B1在糖代謝中具有重要作用，缺乏可引起腳氣病,2缺乏癥,,,二、維生素B2是FAD和FMN的組成成分,維生素B2又名核黃素RIBOFLAVIN體內(nèi)活性形式為黃素單核苷酸FMN黃素腺嘌呤二核苷酸FAD,（一）FAD和FMN是維生素B2的是活性形式,,生化作用FMN及FAD是體內(nèi)氧化還原酶如脂酰COA脫氫酶、琥珀酸脫氫酶、黃嘌呤氧化酶等）的輔基，主要起氫傳遞體的作用缺乏癥口角炎，唇炎，陰囊炎等,（二）FMN和FAD是體內(nèi)氧化還原酶的輔基,,三、維生素PP又稱抗癩皮病維生素,維生素PP包括尼克酸NICOTINICACID尼克酰胺NICOTINAMIDE,體內(nèi)活性形式尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸NAD尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸NADP,（一）維生素PP是NAD和NADP的組成成分,1生化作用,（二）維生素PP缺乏可引起癩皮病,2缺乏癥癩皮病,NAD及NADP是體內(nèi)多種不需氧脫氫酶（如蘋果酸脫氫酶、乳酸脫氫酶）的輔酶，起傳遞氫的作用。,,四、泛酸主要參與酰基轉(zhuǎn)移反應(yīng),泛酸PANTOTHENICACID又名遍多酸體內(nèi)活性形式為輔酶ACOA、酰基載體蛋白ACP,（一）泛酸在輔酶A和?；d體蛋白分子中發(fā)揮作用,（二）泛酸參與酰基轉(zhuǎn)移反應(yīng),COA及ACP是?；D(zhuǎn)移酶的輔酶，參與?；霓D(zhuǎn)移作用。,,,五、生物素參與CO2固定反應(yīng),（一）生物素BIOTIN的來源廣泛,（二）生物素是多種羧化酶的輔基,生物素是體內(nèi)多種羧化酶如丙酮酸羧化酶、乙酰COA羧化酶的輔基，與羧化酶蛋白中賴氨酸殘基的?氨基以酰胺鍵共價(jià)結(jié)合，形成生物胞素殘基，參與CO2固定過程。,,六、維生素B6包括吡哆醇、吡哆醛和吡哆胺,（一）維生素B6的磷酸酯是其活性形式,維生素B6包括吡哆醇PYRIDOXINE、吡哆醛PYRIDOXAL和吡哆胺PYRIDOXAMINE?；罨问搅姿徇炼呷┖土姿徇炼甙?,磷酸吡哆醛是氨基酸轉(zhuǎn)氨酶及脫羧酶的輔酶，用于治療小兒驚厥、妊娠嘔吐和精神焦慮。磷酸吡哆醛也是?氨基?酮戊酸合酶（ALA合酶）的輔酶。缺乏導(dǎo)致低血色素小細(xì)胞性貧血和血清鐵增高。磷酸吡哆醛是同型半胱氨酸分解代謝酶的輔酶，缺乏引起高同型半胱氨酸血癥。,（二）磷酸吡哆醛的輔酶作用多種多樣,1．磷酸吡哆醛是多種酶的輔酶,,葉酸FOLICACID又稱蝶酰谷氨酸體內(nèi)活性形式為四氫葉酸FH4,七、葉酸以四氫葉酸形式參與一碳單位代謝,（一）四氫葉酸是葉酸的活性形式,（二）四氫葉酸是一碳單位的載體,FH4是一碳單位轉(zhuǎn)移酶的輔酶，參與一碳單位的轉(zhuǎn)移。N5、N10是一碳單位的結(jié)合位點(diǎn)。,,,（三）缺乏癥巨幼紅細(xì)胞貧血可以降低胎兒脊柱裂和神經(jīng)管缺乏的危險(xiǎn),,維生素B12又稱鈷胺素COHOLAMINE體內(nèi)活性形式為甲基鈷胺素5?脫氧腺苷鈷胺素,八、維生素B12是含鈷維生素,（一）維生素B12的吸收需要內(nèi)因子,,VITB12是N5CH3FH4轉(zhuǎn)甲基酶（甲硫氨酸合成酶）的輔酶，催化同型半胱氨酸甲基化生成甲硫氨酸。,VITB12缺乏,相應(yīng)缺乏癥巨幼紅細(xì)胞貧血,（二）維生素B12影響一碳單位的代謝和脂肪酸的合成,一是引起甲硫氨酸合成減少；二是影響四氫葉酸的再生。,九、維生素C又稱抗壞血病維生素,（一）維生素C是對(duì)熱不穩(wěn)定的酸性物質(zhì),維生素C又稱L抗壞血酸ASCORBICACID，呈酸性，廣泛存在于新鮮蔬菜和水果中。,動(dòng)物體內(nèi)不能合成維生素C，必需由食物供給。,抗壞血酸分子中C2和C3羥基可以氧化脫氫生成脫氫抗壞血酸，后者也可以加氫還原。,,（二）維生素C既是一些羥化酶的輔酶又是強(qiáng)抗氧化劑,1．維生素C是一些羥化酶的輔酶,抗壞血酸是維持體內(nèi)含銅羥化酶和?酮戊二酸鐵羥化酶活性必不可少的輔因子。,2．維生素C作為抗氧化劑可直接參與體內(nèi)氧化還原反應(yīng),3．維生素C具有增強(qiáng)機(jī)體免疫力的作用,缺乏癥壞血?。⊿CURVY）,,,壞血病開始的時(shí)候癥狀是四肢無力，精神消退，煩躁不安，做任何工作都易疲憊，皮膚紅腫。病人覺得肌肉疼痛，精神抑郁。然后他的臉部腫脹，牙齦出血，牙齒脫落，口臭。皮膚下大片出血（看來像是嚴(yán)重的打傷）。最后是嚴(yán)重疲憊﹑腹瀉呼吸困難，骨折，肝腎衰竭而致死亡。早年航海人員因壞血病死亡的災(zāi)難不可枚舉，1497年7月9日到1498年5月30日，葡萄牙航海家達(dá)伽馬（VASCODAGAMA）發(fā)現(xiàn)繞過非洲到達(dá)印度的航線，他的160個(gè)船員中，有100多人死于壞血病。1519年，葡萄牙航海家麥哲倫率領(lǐng)的遠(yuǎn)洋船隊(duì)從南美洲東岸向太平洋進(jìn)發(fā)。三個(gè)月后，有的船員牙床破了，有的船員流鼻血，有的船員渾身無力，待船到達(dá)目的地時(shí)，原來的200多人，活下來的只有35人，人們對(duì)此找不出原因。1536年法國探險(xiǎn)家JACQUESCARTIER在發(fā)現(xiàn)圣勞倫斯河之后，溯流而上抵達(dá)魁北克過冬。探險(xiǎn)隊(duì)中24人死于壞血病，其它多人也都病重。有一位印第安人教他們飲用一種ARBORVITAE（THUJAOCCIDENTALIS）樹葉泡的茶，就治好了這些人。后來發(fā)現(xiàn)這種樹的葉子里每100克含有50毫克的維生素C。,

簡介：,,DNA的重組,第35章,一HOLLIDAY模型,一、同源重組,二細(xì)菌的基因轉(zhuǎn)移與重組,細(xì)菌的結(jié)合作用,致育因子（F因子）通過結(jié)合作用由F細(xì)胞向F細(xì)胞轉(zhuǎn)移，F(xiàn)質(zhì)粒約1/3的基因與轉(zhuǎn)移有關(guān)，TRAS和TRAT基因編碼表面排斥蛋白，阻止F細(xì)胞之間的轉(zhuǎn)移，F(xiàn)細(xì)胞的性菌毛與F細(xì)胞結(jié)合后收縮，使二者靠近，TRAD蛋白構(gòu)成轉(zhuǎn)移的通道，在TRAI在TRAY的幫助下結(jié)合到轉(zhuǎn)移起點(diǎn)ORIT上，切開一條鏈，使其5?端進(jìn)入受體細(xì)胞，并合成其互補(bǔ)鏈，使F細(xì)胞轉(zhuǎn)化為F細(xì)胞，給體細(xì)胞中的單鏈也可以合成互補(bǔ)鏈。,在細(xì)菌基因轉(zhuǎn)移的不同時(shí)間將配對(duì)細(xì)胞分開，可以確定基因在染色體上的位置。F質(zhì)粒DNA可以通過重組整合到受體的染色體中，使受體菌成為高頻重組（HRF菌株，若F質(zhì)粒的DNA未能完整地進(jìn)入受體菌，則受體菌不能轉(zhuǎn)化為F,F質(zhì)粒的DNA可以被切割出來，有時(shí)可攜帶宿主菌的染色體DNA，稱作F?因子，F(xiàn)?因子攜帶的基因可在受體菌表達(dá)。,大腸桿菌染色體的基因圖,外源基因可以進(jìn)入感受態(tài)細(xì)菌，稱作轉(zhuǎn)化，自然條件下感受態(tài)的形成需要10多種蛋白質(zhì)參與，實(shí)驗(yàn)室常用高濃度的CA2處理使細(xì)菌形成感受態(tài)。通過噬菌體將細(xì)菌基因從供體菌轉(zhuǎn)移到受體菌稱作轉(zhuǎn)導(dǎo)，若宿主菌任意部位的基因取代噬菌體DNA的一部分轉(zhuǎn)入受體菌，稱作普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)，若宿主整合部位的DNA取代了噬菌體的部分DNA稱作限制性轉(zhuǎn)導(dǎo)。進(jìn)入受體菌的基因可與染色體重組。用溶菌酶除去細(xì)菌的細(xì)胞壁，人工促使原生質(zhì)體融合，可引起廣泛的重組。,噬菌體的基因重組,三重組有關(guān)的酶,依賴RECBCD起始的重組模型RECBCD有依賴ATP的核酸外切酶、核酸內(nèi)切酶和解螺旋酶活性，當(dāng)DNA斷裂時(shí)，它結(jié)合在其游離端，使其解旋并降解，直至酶移動(dòng)到CHI位點(diǎn)（GCTGGTGG，在其3＇側(cè)46核苷酸處將鏈切斷，產(chǎn)生3＇游離單鏈，隨后單鏈與RECA結(jié)合，開始同源區(qū)重組。,RECA蛋白的絲狀聚合體與DNA的相互作用,RECA蛋白的帶狀圖解,RECA蛋白的絲狀聚合體，每一圈螺旋由6個(gè)RECA蛋白單體構(gòu)成，其中一個(gè)單體由紅色標(biāo)出。,RECA蛋白引起DNA同源重組的模型,在大腸桿菌中由RUVA,RUVB和RUVC蛋白參與的同源重組。（A）RUVA四聚體的圖解。四個(gè)亞基形成的結(jié)構(gòu)像四個(gè)花瓣的花。（B）RUVA/RUVB的作用（左）RUVA四聚體結(jié)合到HOLLIDAY位點(diǎn)；（中）RUVB六聚體結(jié)合到雜合雙螺旋的兩對(duì)面，DNA穿過其中心，RUVB六聚體的作用像馬達(dá)，促進(jìn)超螺旋分叉點(diǎn)通過復(fù)合體移動(dòng)。（右）RUVC結(jié)合到HOLLIDAY位點(diǎn)，由其核酸酶活性切斷核酸鏈，切割位點(diǎn)由剪切體辨認(rèn)。（C）RUVA四聚體的電荷分布，藍(lán)色表示正電荷，紅色表示負(fù)電荷，注意正電荷位于四聚體的表面，有四個(gè)負(fù)電荷區(qū)域位于其中心。（D）假設(shè)的RUVA四聚體與HOLLIDAY位點(diǎn)結(jié)合的結(jié)構(gòu)模型。,二、特異位點(diǎn)重組,細(xì)菌的特異位點(diǎn)重組,沙門氏菌兩種鞭毛蛋白表達(dá)的調(diào)控,免疫球蛋白基因的重組,IGG的分子結(jié)構(gòu),（1）,（2）,（3）,（4）,（5）,重組位點(diǎn)有7和9NT的信號(hào)序列,中間間隔12或23BP。,免疫球蛋白基因重組的模型,重組酶（RAC1/RAC2復(fù)合體與重組信號(hào)序列結(jié)合,復(fù)合體使編碼序列與重組信號(hào)序列之間的雙連斷裂，編碼序列的末端形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)。,重組信號(hào)序列結(jié)合形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)。,編碼序列連接前經(jīng)過加工，連接位點(diǎn)不十分確定，增加了免疫球蛋白的多樣性。,DNA依賴性蛋白激酶DNAPK和DNA連接酶參與了加工和連接過程。,9堿基序列,7堿基序列,在不同的核苷酸位點(diǎn)重組可以生成不同的蛋白質(zhì),三、轉(zhuǎn)座重組,MCCLINTOCK的重要發(fā)現(xiàn),轉(zhuǎn)座子具有反向末端重復(fù)序列以及在靶部位兩側(cè)產(chǎn)生的同向重復(fù)序列。在該例中靶序列為5BP，轉(zhuǎn)座子末端由9BP反向重復(fù)序列組成，數(shù)字19指序列重復(fù)堿基對(duì)。,兩側(cè)正向重復(fù),,末端反向重復(fù),,一細(xì)菌的轉(zhuǎn)座因子1插入因子,2組合型轉(zhuǎn)座子兩個(gè)插入序列之間夾著一段序列（可以是某個(gè)基因，如抗性基因）。兩個(gè)插入序列可以同向或反向排列，有時(shí)均有轉(zhuǎn)座活性，有時(shí)只有一個(gè)有轉(zhuǎn)座活性。,3復(fù)合型轉(zhuǎn)座子插入序列被轉(zhuǎn)座酶基因取代，圖示為TN3TNA家族）的結(jié)構(gòu)。兩端為38BP的反向重復(fù)，其兩側(cè)為5BP的靶序列，TNPA編碼轉(zhuǎn)座酶，TNPR編碼的蛋白質(zhì)可以作為解離酶（使轉(zhuǎn)座子與受體DNA形成的共整合體重組和解離），也可以作為阻遏蛋白調(diào)節(jié)TNPA和TNPR兩個(gè)基因的表達(dá)，RES為解離的控制位點(diǎn)，TNPR蛋白結(jié)合于其上發(fā)揮調(diào)控作用。,兩個(gè)IS10組件構(gòu)成一個(gè)復(fù)合轉(zhuǎn)座子，它能使位于他們之間的任何DNA易位。當(dāng)TN10是一個(gè)小的圓形分子的一部分時(shí)，IS10重復(fù)序列可轉(zhuǎn)座至環(huán)狀分子的任一側(cè)。,4轉(zhuǎn)座的方式轉(zhuǎn)座子可用不同的方式轉(zhuǎn)座，轉(zhuǎn)座因子插入基因后可使基因失活，也可引起染色體的斷裂、重復(fù)、缺失、倒位、易位等變化。,插入序列使靶序列的數(shù)量增加，在插入序列兩側(cè)各有一個(gè)。,復(fù)制轉(zhuǎn)座作用產(chǎn)生了轉(zhuǎn)座子的一個(gè)拷貝，它插入到一個(gè)接受位點(diǎn)。給予位點(diǎn)保持不變，以致給予者和接受者都有轉(zhuǎn)座子的一個(gè)拷貝。,非復(fù)制轉(zhuǎn)座作用在未被修復(fù)的情況下，可能造成致死突變。,保守的轉(zhuǎn)座作用不造成核苷酸的丟失，如Λ噬菌體的整合和切除。,轉(zhuǎn)座子引起DNA的重排，正向重復(fù)序列的重組引起其間序列的切除或插入。,反向重復(fù)序列的重組能引起其間序列反向排列。,轉(zhuǎn)座作用可引起給體和受體的整合或分割，并可引起轉(zhuǎn)座子拷貝數(shù)的增加,二真核生物的轉(zhuǎn)座因子原核生物的轉(zhuǎn)座酶主要作用于產(chǎn)生它的轉(zhuǎn)座因子，表現(xiàn)出順式顯性。真核生物的轉(zhuǎn)座酶可以作用于任何末端具有該酶所識(shí)別的反向重復(fù)順序的DNA,使其轉(zhuǎn)移到相應(yīng)的靶位點(diǎn)。在玉米的激活解離系統(tǒng)（ACTIVATORDISSOCIATIONSYSTEM,ACDS中，AC編碼轉(zhuǎn)座酶自主因子，DS（非自主因子）是AC不同程度的缺失中間序列形成的，無轉(zhuǎn)座酶活性，但隨AC轉(zhuǎn)座后可抑制鄰近基因的表達(dá)。在玉米的抑制促進(jìn)增變系統(tǒng)（SUPPRESSORPROMOTORMUTATOR,SMP中,SMP和EN（增強(qiáng)子）序列相似，均為自主因子，與其對(duì)應(yīng)的非自主因子DSMP為有缺陷的SMP因子，轉(zhuǎn)座后，若SMP插入靶基因附近的合適部位，可以促進(jìn)靶位點(diǎn)基因的表達(dá)，若SMP插入外顯子，可抑制基因的表達(dá)。,玉米的控制元件形成轉(zhuǎn)座子的不同家族，每個(gè)家族均有自主和非自主成員。,P品系的果蠅含有4050個(gè)P因子（一種轉(zhuǎn)座子），P因子的MRNA前體含有3個(gè)內(nèi)含子，若P品系雄性與M品系雌性交配，子一代的體細(xì)胞MRNA前體加工時(shí)保留了第3個(gè)內(nèi)含子，合成阻遏蛋白，不發(fā)生轉(zhuǎn)座，性細(xì)胞MRNA前體加工時(shí)切除了全部3個(gè)內(nèi)含子，活躍的轉(zhuǎn)座使性細(xì)胞失去功能。P雄性或M雄性與P雌性交配時(shí)，由于雌性的卵細(xì)胞質(zhì)中存在抑制P因子轉(zhuǎn)座酶活性的蛋白質(zhì)，子代的生殖功能正常。,四、真核生物基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄前調(diào)控1染色體丟失如四膜蟲的大核為營養(yǎng)核，由小核發(fā)育而來，約10的DNA在發(fā)育過程中被丟失。2基因擴(kuò)增如非洲爪蟾卵母細(xì)胞的RDNA可以大量擴(kuò)增，形成1000個(gè)以上的核仁。3基因重排重排可以使表達(dá)的基因發(fā)生切換，也可以產(chǎn)生新的基因。4組蛋白的乙酰化和去乙?；M蛋白的乙?；突虮磉_(dá)的狀態(tài)相關(guān)。組蛋白H4的乙?；蛔鉛NDERACETYLATION是雌性哺乳動(dòng)物一條X染色體失活的原因之一。去乙?；突蚧钚缘淖瓒粲嘘P(guān)。5染色體DNA的修飾和異染色質(zhì)化DNA的甲基化可以使其失去轉(zhuǎn)錄活性，高度甲基化的DNA可以形成高度壓縮的異染色質(zhì)，異染色質(zhì)的基因無轉(zhuǎn)錄活性。,6染色質(zhì)結(jié)構(gòu)改變模型組蛋白置換占先模型PREEMPTIVEMODEL決定的因素是轉(zhuǎn)錄因子和組蛋白誰先占據(jù)調(diào)控位點(diǎn)。DNA復(fù)制時(shí)，組蛋白8聚體解離，轉(zhuǎn)錄因子乘機(jī)結(jié)合到調(diào)控位點(diǎn)上，一直持續(xù)到下一個(gè)復(fù)制周期，抑制了組蛋白和DNA的結(jié)合。例1當(dāng)5SRRNA基因與組蛋白結(jié)合時(shí)TFⅢA不能激活此基因。而TFⅢA可與游離的5SRRNA基因結(jié)合，再加入組蛋白不能使此基因失活。例2含腺病毒啟動(dòng)子的質(zhì)粒能被TFⅡD結(jié)合，再被RNAPOLⅡ轉(zhuǎn)錄，如先加入組蛋白，則不起始轉(zhuǎn)錄，如先加入TFⅡD則形成的染色質(zhì)中，模板仍能轉(zhuǎn)錄。動(dòng)態(tài)模型DYNAMICMODEL組蛋白置換需輸入能量。一些轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合DNA時(shí)可裂解核小體，或建立一個(gè)可產(chǎn)生核小體定位結(jié)合位點(diǎn)的邊界。如果蠅HSP70啟動(dòng)子上的核小體在體外實(shí)行重建。GAGA細(xì)胞核結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄因子與啟動(dòng)子中4個(gè)富含CTN位點(diǎn)結(jié)合，破壞了核小體，形成一高敏感區(qū)，而且導(dǎo)致鄰接的核小體重排，這樣它們就優(yōu)先插入到隨機(jī)位點(diǎn)。核小體打開的過程是需要水解ATP的耗能過程。,7細(xì)胞周期的調(diào)控最關(guān)鍵的是兩個(gè)蛋白質(zhì)家族周期素（CYCLIN家族和依賴周期素的蛋白激酶（CYCLINDEPENDINGPROTEINKINASE,CDK家族,目前發(fā)現(xiàn)的周期素有10種以上，用字母A,B,C等表示，CDK有8種以上，用CDK1，CDK2，CDK3等表示。周期素A,周期素D,CDK2,CDK4的合成受轉(zhuǎn)錄因子E2F的調(diào)節(jié)，他們共同的作用控制著G1期向S期的轉(zhuǎn)化，周期素A和周期素B與CDK2的結(jié)合對(duì)有絲分裂的啟動(dòng)是必要的。新合成的促細(xì)胞分裂周期素與CDK結(jié)合，形成促M(fèi)期因子MPHASEPROMOTINGFACTOR,MPF，活化的CDK使自身的Y15和T161先后被磷酸化，隨后細(xì)胞周期基因（CELLDIVISIONCYCLEGENE的產(chǎn)物CDC25將Y15的磷酸基水解，才使MPF活化，使許多靶蛋白磷酸化，導(dǎo)致有絲分裂開始?；罨闹芷谒谻DK復(fù)合物還可以激活銷毀序列識(shí)別蛋白（DESTRUCTIONBOXRECOGNIZINGPROTEIN,DBRP,DBRP與周期素的銷毀序列結(jié)合，隨后結(jié)合泛素，使周期素被蛋白酶體降解。,→使促M(fèi)期因子（MPF）活化,生長因子受體與配體結(jié)合后，其酪氨酸蛋白激酶將一系列蛋白質(zhì)磷酸化，傳遞信號(hào)到細(xì)胞核，促進(jìn)細(xì)胞增殖或分化，如RAS蛋白可以激活促分裂原活化的蛋白激酶（MITOGEACTIVATEDPROTEINKINASE，MAPK,MAPK磷酸化細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子，促進(jìn)細(xì)胞增殖。有些生長因子的受體無酪氨酸蛋白激酶活性，借助另外的激酶（JUSTANOTHERKINASE,JAK及其底物SIGNALTRANSDUCERANDACTIVATORTRANSCRIPTION,STAT構(gòu)成的系統(tǒng)傳遞信號(hào)，受體RASRAS和JAKJAK兩個(gè)系統(tǒng)及其他系統(tǒng)之間存在相互作用。最早發(fā)現(xiàn)的癌基因雞的肉瘤基因SRC是酪氨酸蛋白激酶的變體，它無需接受生長信號(hào)，使細(xì)胞的增殖持續(xù)活化。類似的癌基因家族還有很多，如生長因子類SIS,酪氨酸激酶類ABL,ERBB,SRC等。許多因素可引起基因突變，使原癌基因轉(zhuǎn)變?yōu)榘┗?。抑癌基因可以阻止?xì)胞的過分增值，或使失控的細(xì)胞死亡或凋亡。,基本要求1熟悉同源重組的機(jī)制。2熟悉特異位點(diǎn)重組的機(jī)制。3熟悉轉(zhuǎn)座重組的機(jī)制。,