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文檔簡(jiǎn)介
1、DNA甲基化作為一種重要的表觀遺傳學(xué)修飾,在X染色體失活、胚胎發(fā)育、細(xì)胞分化、疾病發(fā)生和癌癥形成等方面發(fā)揮著重要的作用。新一代高通量測(cè)序技術(shù)的興起使得DNA甲基化研究在深度和廣度上得到了很大的拓展,涌現(xiàn)出一批基于高通量測(cè)序的全基因組甲基化分析方法,例如全基因組重亞硫酸鹽測(cè)序(BS-seq)、甲基化DNA免疫共沉淀測(cè)序(MeDIP-seq)以及簡(jiǎn)化的重亞硫酸鹽測(cè)序技術(shù)(RRBS)。這些新技術(shù)在推動(dòng)甲基化研究的同時(shí),也產(chǎn)生了大量甲基化測(cè)序數(shù)
2、據(jù)。如何從這些海量的數(shù)據(jù)中快速挖掘出有效的信息對(duì)于研究者們提出了巨大的挑戰(zhàn)。本研究主要從甲基化測(cè)序數(shù)據(jù)模擬、差異甲基化區(qū)域(DMR)分析、甲基化分析整合平臺(tái)的開(kāi)發(fā)以及甲基化可視化軟件這幾個(gè)相互輔助的方面開(kāi)發(fā)基于高通量測(cè)序的甲基化分析軟件,為DNA甲基化研究者提供工具上的支撐。
首先,我們開(kāi)發(fā)了甲基化測(cè)序序列模擬工具BSSim。該模擬軟件適用于各大主流測(cè)序平臺(tái)的測(cè)序格式,可觀測(cè)多種錯(cuò)誤因素和不同層次對(duì)甲基化數(shù)據(jù)的影響,同時(shí)能為后
3、續(xù)的分析選擇合適參數(shù)并減小錯(cuò)誤因素提供幫助。BSSim的開(kāi)發(fā)可為我們?cè)u(píng)估隨后開(kāi)發(fā)軟件的性能提供了基礎(chǔ)。
其次,我們開(kāi)發(fā)了以滑窗方式,在基因組水平的單堿基精度甲基化數(shù)據(jù)上掃描查找DMR(differentially methylated regions)的軟件swDMR。swDMR整合多種常用的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法,適用于配對(duì)樣本或多個(gè)樣本的重亞硫酸鹽處理的DNA甲基化測(cè)序數(shù)據(jù)的DMR查找、注釋和可視化。通過(guò)swDMR,我們可以更快捷的發(fā)
4、現(xiàn)潛在的參與表觀調(diào)控的功能區(qū)域。
隨后,我們基于RRBS測(cè)序數(shù)據(jù)開(kāi)發(fā)了整合的甲基化分析平臺(tái)RRBS-Analyser。RRBS-Analyser可以對(duì)原始的測(cè)序數(shù)據(jù)進(jìn)行質(zhì)量評(píng)估,產(chǎn)生基本的統(tǒng)計(jì)信息,把質(zhì)量控制之后產(chǎn)生的短序列比對(duì)到參考基因組上,確定并注釋甲基化胞嘧啶的位點(diǎn),并能對(duì)多個(gè)樣品進(jìn)行差異甲基化區(qū)間的檢測(cè)及注釋。此外,RRBS-Analyser還支持除人以外的其它多個(gè)物種的基因組DNA甲基化分析。
最后,我們開(kāi)
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