神經(jīng)干細(xì)胞移植對腦外傷大鼠行為學(xué)影響的研究.pdf

1、該文通過對NSCs體外培養(yǎng),擴(kuò)增,并把體外熒光標(biāo)記的NSCs植入腦創(chuàng)傷大鼠模型損傷區(qū),移植后不同時(shí)間監(jiān)測NSCs在腦內(nèi)的生存、遷移、整合情況.并對植入腦內(nèi)的NSCs長期觀察,免疫組織化學(xué)監(jiān)測分化情況.通過檢測移植組大鼠行為學(xué)評分和學(xué)習(xí)記憶能力,并與對照組比較,評價(jià)NSCs移植治療的作用.該實(shí)驗(yàn)可能為以后NSCs移植應(yīng)用于臨床來治療腦創(chuàng)傷后學(xué)習(xí)與記憶障礙提供參考,NSCs大鼠腦內(nèi)移植可對人類神經(jīng)干細(xì)胞發(fā)育的生物學(xué)特點(diǎn)進(jìn)行探討.方法:聯(lián)合應(yīng)

2、用機(jī)械和免疫磁珠法分離人胚組織腦室區(qū)/腦室下區(qū)(Ventricular zone/subventricular zone,VZ/SVZ)細(xì)胞,用無血清培養(yǎng)基對NSCs進(jìn)行培養(yǎng),Nestin免疫組織化學(xué)鑒定NSCs.移植前以熒光標(biāo)記物Hoechst33258,標(biāo)記NSCs 30min后備用.采用自由落體撞擊法制作大鼠腦創(chuàng)傷模型.Wistar大鼠90只,隨機(jī)分為4組,假損傷組(Sham)、損傷組(TBI)、假移植組(TBI+NS)每組各21

3、只、移植組(TBI+NSCs)27只,4組大鼠分別于損傷后2d及7d進(jìn)行大鼠行為學(xué)評分;分別于移植后2d和7d處死移植組大鼠各2只制作腦組織冰凍切片,在熒光顯微鏡下觀察移植細(xì)胞存活及遷移狀況;4組大鼠損傷后2w處死各5只,制備腦組織切片行HE染色,計(jì)數(shù)額頂葉皮層壞死神經(jīng)元;4組大鼠分別于損傷后2w和4w行Y迷宮試驗(yàn),檢測學(xué)習(xí)和記憶能力.取移植后2w和4w時(shí)大鼠腦組織切片行GFAP、NSE免疫組化染色,觀察移植細(xì)胞的分化情況.結(jié)論:①采用