CLPEGDA微球的制備及漆酶固定化性質(zhì)的研究.pdf

1、單分散微球具有比表面積大、吸附性強(qiáng)、凝聚作用大及反應(yīng)能力強(qiáng)等特性，有著廣泛的應(yīng)用前景。本文以葡萄糖水溶液/乙醇為分散介質(zhì)，用分散聚合法制備出了球形度良好的單分散交聯(lián)聚乙二醇二丙烯酸酯微球，就分散介質(zhì)、交聯(lián)劑、單體對(duì)微球的粒徑及其分布的影響進(jìn)行了研究。運(yùn)用紅外光譜、激光共聚焦電鏡對(duì)微球進(jìn)行了表征。結(jié)果顯示在最佳的反應(yīng)條件下：引發(fā)劑(AIBN)占單體質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3％，懸浮穩(wěn)定劑(PVP)占單體的4％～5％，乙醇與水質(zhì)量比為1∶4，葡萄糖水溶液

2、中葡糖的質(zhì)量質(zhì)分?jǐn)?shù)為5％～8％、單體（聚乙二醇二丙烯酸酯）為4％制備的微球分散性好，平均粒徑為1～4μm。交聯(lián)聚乙二醇二丙烯酸酯微球具有較高的吸水性和生物相容性。
　　應(yīng)用交聯(lián)聚乙二醇二丙烯酸酯微球進(jìn)行漆酶固定化研究，發(fā)現(xiàn)320mg完全溶脹的微球加入3mL1.963U/mL的漆酶（pH為3.4），在28℃、130r/min的搖床上固定3h，可以獲得較優(yōu)的固定化效果，負(fù)載量達(dá)到1.093U/g干載體。固定化后的漆酶性質(zhì)研究表明，此固

3、定化酶的pH穩(wěn)定范圍增加，主要是對(duì)酸的穩(wěn)定性升高。固定化后酶表現(xiàn)出良好的溫度穩(wěn)定性和使用穩(wěn)定性，游離酶在50℃條件下保溫三小時(shí)后僅剩30.9％的酶活，而固定化酶基本保持不變，最適的反應(yīng)溫度由50℃升至55℃，重復(fù)使用六次后固定化酶仍保持45％活性。游離酶在冰箱內(nèi)儲(chǔ)存一個(gè)月后活力僅為初始的62.7％，而由于固定的載體低溫時(shí)，結(jié)構(gòu)發(fā)生變化導(dǎo)致固定化酶的酶活上升了20％。酶活動(dòng)力學(xué)研究表明在室溫、pH3.4時(shí)Km值由21.9μmol/L升至1