我國中西部地區(qū)熱泉嗜熱菌的分離和產(chǎn)酶研究及嗜熱纖維素酶的初步純化.pdf

1、嗜熱微生物及其所產(chǎn)生的嗜熱酶具有重要的科學(xué)價(jià)值和迷人的應(yīng)用前景。本文對嗜熱微生物的生態(tài)分布，嗜熱菌及其酶的應(yīng)用潛能，纖維素酶的結(jié)構(gòu)、酶活測定方法和分子多樣性等方面進(jìn)行了概述。研究內(nèi)容主要包括我國中西部地區(qū)熱泉中嗜熱菌菌株的分離、產(chǎn)酶和嗜熱纖維素酶的初步純化。 采用純培養(yǎng)方法從我國四川喜德、普格熱泉以及陜西南部地下熱水水樣中共分離得到47株嗜熱菌株，16S rRNA基因片段序列的分析和比對結(jié)果表明，采集地的嗜熱細(xì)菌以芽孢桿菌為主，

2、并且主要分布在Anoxybacillus和Geobacillus2個(gè)屬中，一株非芽孢桿菌則屬于Meiothermus屬。這一結(jié)果表明中等高溫環(huán)境中，嗜熱芽孢桿菌占據(jù)優(yōu)勢地位。采用平板法，對本實(shí)驗(yàn)室從四川、陜西南部、廣西和新疆4處的熱泉或地下熱水水樣中分離到的158株中度嗜熱菌株進(jìn)行產(chǎn)酶定性分析，結(jié)果表明，85％的嗜熱菌株能夠分泌一種或一種以上的水解酶，這就說明了在我國中、西部熱泉中包含了較高豐度的嗜熱水解酶產(chǎn)生菌。同時(shí)，實(shí)驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn)大多

3、數(shù)菌株能夠產(chǎn)生多酶混合體系，具有巨大應(yīng)用潛能。另外，菌株產(chǎn)酶在種間和種內(nèi)都存在有顯著差異。酶定性實(shí)驗(yàn)中，分離到3株能夠分解CMC-Na的嗜熱菌，通過對它們的發(fā)酵產(chǎn)酶量和粗酶液性質(zhì)之間的比較研究，選取其中的一株(XJT16)作為進(jìn)一步研究的對象。經(jīng)過生理特性和16S rDNA序列分析比對，將XJT16鑒定為Geobacillus stearothermophilus。經(jīng)過硫酸銨沉淀、離子交換柱和分子篩純化XJTl6纖維素酶。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明X