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文檔簡介
1、生物分子識別及相互作用是生命的基礎(chǔ),研究金屬離子與多肽,小分子與蛋白質(zhì)的相互作用在生命活動的研究中具有重要意義。本文的研究目的是設(shè)計、合成系列二茂鐵-多肽衍生物作為電化學(xué)探針,用于電化學(xué)檢測重金屬離子及測試小分子肽與蛋白質(zhì)的相互作用。圍繞該研究目標,展開了以下研究工作: 1.由二茂鐵為原料,用苯并三氮唑-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU)及水溶性碳化三亞胺(EDC)/N-烴基琥珀酰亞胺(NHS)為偶合劑,最終合成
2、了1’-半胱胺-1-甲酸甲酯二茂鐵(產(chǎn)率為30.0﹪)、1’-半胱胺-1-二茂鐵甲酸(90.0﹪)、氨基二茂鐵(98.2﹪)、谷胱甘肽-二茂鐵(90.7﹪)等這些目前在國內(nèi)外尚未見報道的二茂鐵衍生物,并對它們進行紅外光譜和核磁共振表征,確認了它們的結(jié)構(gòu)。 2.根據(jù)巰基化合物易與金反應(yīng)生成穩(wěn)定的金硫鍵,本文用上述含巰基的分子在金電極上直接或間接的自組裝成膜,修飾電極。通過電化學(xué)方法檢測發(fā)現(xiàn):這些物質(zhì)成功的組裝在電極表面,表面電化學(xué)
3、反應(yīng)為單電子準可逆氧化還原反應(yīng),可觀察到的氧化還原反應(yīng)為二茂鐵基的氧化還原,并根據(jù)外圍基團的不同表現(xiàn)出不同的氧化還原峰電位。其中,1’-半胱胺-1-二茂鐵甲酸修飾電極的氧化還原峰電位分別為E<,pa>=0.642 V、.E<,pc>=0.740 V;1’-半胱胺-1-谷胱甘肽二茂鐵修飾電極為E<,pa>=0.645 V、E<,pa>=0.748 V;巰基十一酸-氨基-二茂鐵修飾電極為E<,pa>=-0.009 V、E<,pa>=-0.1
4、45 V;巰基十一酸-谷胱甘肽二茂鐵修飾電極為E<,pa>=0.257 V、E<,pa>=0.132 V。 3.由于谷胱甘肽含多個活性基團,能與重金屬離子發(fā)生配位反應(yīng),本文用1’-半胱胺-1-谷胱甘肽二茂鐵修飾電極檢測鎘離子。通過循環(huán)伏安法研究發(fā)現(xiàn),1’-半胱胺-1-谷胱甘肽二茂鐵修飾電極與20 nmol/L鎘離子配位后,氧化還原峰電位為E<,pa>=0.820 V和E<,pa>=0.680 V,與配位前的氧化還原峰電位相比,正
5、移80 mV。從鎘離子濃度與陽極峰電位及峰電位差的關(guān)系圖發(fā)現(xiàn),隨著鎘離子濃度的增加,陽極峰電位及峰電位差值成線性增大,因此可根據(jù)峰電位及峰電位差值的變化來定量分析鎘離子的濃度。得其最低檢測限為0.1 nmol/L。 4.采用電化學(xué)方法研究了谷胱甘肽-二茂鐵與牛血清蛋白(BSA)的相互作用。發(fā)現(xiàn)谷胱甘肽-二茂鐵與固定在電極表面的牛血清蛋白作用后,其氧化還原峰發(fā)生正移,由原來的E<,pa>=0.257 V、E<,pa>=0.132V
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