煙曲霉麥角固醇合成相關(guān)基因erg4的功能性研究.pdf

1、煙曲霉作為一種重要的條件致病菌，能夠使免疫缺陷病人患肺曲霉病。目前，臨床上主要使用三種藥靶不同的抗真菌藥物治療該病，包括唑類藥物、多烯類藥物和棘白菌素類藥物。其中，唑類藥物是臨床上使用最為廣泛的一種抗真菌藥物，其作用靶點(diǎn)為14-α-脫甲基化酶（麥角固醇合成途徑中的一種關(guān)鍵酶，由cyp51/erg11編碼）。麥角固醇作為真菌特有的甾醇成分，廣泛存在于真菌質(zhì)膜中。其不僅能夠保證膜結(jié)構(gòu)的完整性，同時(shí)還可參與多種生物學(xué)活動(dòng)，如膜的流動(dòng)性、膜蛋白

2、的活性、信號(hào)分子的傳遞等。除行使生物學(xué)功能外，麥角固醇還是一種非常重要的抗真菌藥物靶點(diǎn)，因此對麥角固醇合成途徑的研究可為新抗真菌藥物的開發(fā)尋找契機(jī)。
　　目前，有關(guān)煙曲霉麥角固醇完整的合成途徑的了解還存在一定的局限性。本實(shí)驗(yàn)室的前期研究發(fā)現(xiàn)，煙曲霉同時(shí)存在兩個(gè)催化麥角固醇合成最后一步的酶，Erg4A和Erg4B。單獨(dú)敲除erg4A或erg4B不影響胞內(nèi)麥角固醇的含量，但erg4A和erg4B的同時(shí)敲除會(huì)完全阻斷麥角固醇的合成，并造

3、成麥角固醇前體物質(zhì)ergosta-5，7，22，24(28)-tetraenol的大量積累?；诖耍疚膶熐笶rg4A和Erg4B的相互關(guān)系進(jìn)行了深入探討。結(jié)果發(fā)現(xiàn)這兩種蛋白質(zhì)不僅具有相同數(shù)量的跨膜結(jié)構(gòu)域，且均定位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上。同時(shí)，野生型菌株中erg4B的轉(zhuǎn)錄水平明顯高于erg4A，且一種erg4基因的缺失可引起另一同源基因轉(zhuǎn)錄水平的升高，由此表明在麥角固醇合成過程中Erg4A和Erg4B存在互補(bǔ)功能，且正常情況下Erg4B可能發(fā)揮