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1、人血清中尿素、尿酸與肌酐含量的測(cè)定是臨床檢測(cè)中關(guān)鍵的生化指標(biāo),為臨床診斷和觀察病情提供了依據(jù)。目前已有多種方法應(yīng)用于臨床實(shí)驗(yàn)室中尿素、尿酸與肌酐的含量測(cè)定,為保證測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確可比,實(shí)現(xiàn)測(cè)量的標(biāo)準(zhǔn)化迫切需要建立準(zhǔn)確、可靠的參考方法,研制相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)滿足來(lái)臨床檢驗(yàn)的需求。
本文以13C15N2-尿素作為內(nèi)標(biāo),乙腈為蛋白沉淀劑,用帶有電噴霧離子源的三重四極質(zhì)譜的多重反應(yīng)監(jiān)模式(MRM)檢測(cè)目標(biāo)離子對(duì)(m/z61.1-44,64
2、.1-46),使用括號(hào)法定量,分別考查了血清尿素準(zhǔn)確測(cè)量的所需的前處理?xiàng)l件、液相色譜分離條件、質(zhì)譜條件和測(cè)量條件建立了測(cè)定血清中尿素的液相色譜-同位素稀釋串聯(lián)質(zhì)譜方法。
應(yīng)用本法對(duì)兩種濃度的血清尿素進(jìn)行定值,結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)均小于1%,使用美國(guó)NIST標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)909b Level I對(duì)方法進(jìn)行驗(yàn)證,測(cè)量結(jié)果與靶值的偏差為-0.38%且在給定的不確定度范圍內(nèi)。方法的檢測(cè)限為0.55μg/g(3倍信噪比),方法的平
3、均回收率為100.1%和99.9%,通過(guò)參加RELA2009血清尿素量值比對(duì),進(jìn)一步對(duì)方法進(jìn)行確證。對(duì)盲樣進(jìn)行了準(zhǔn)確測(cè)定,全面分析了影響測(cè)量結(jié)果的因素,并對(duì)不確定度進(jìn)行了評(píng)定,對(duì)于兩個(gè)水平的血清尿素不確定度分別為1.2%和0.84%。
本文提出的血清中尿素測(cè)量的液相色譜-同位素稀釋串聯(lián)質(zhì)譜法,原理可靠、前處理簡(jiǎn)單、定量準(zhǔn)確,可作為血清尿素測(cè)量的候選參考方法。
中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院化學(xué)計(jì)量與分析科學(xué)研究所組織了中
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