基于酶解-膜分離集成的膠原蛋白肽分子量控制技術(shù).pdf

1、膠原蛋白肽是以動(dòng)物膠原為原料通過酶法、酸堿法或熱降解法制備而成的小分子多肽混合物，在功能食品、美容護(hù)膚品、藥物控釋材料和診斷輔料等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。膠原蛋白肽有著抗氧化、防治骨質(zhì)疏松和抑制血管緊張素轉(zhuǎn)化酶（ACE）活性等許多優(yōu)秀的生物活性，因此膠原蛋白肽的制備成為近年的研究熱點(diǎn)，具有重要的意義。對(duì)于傳統(tǒng)的膠原蛋白制備技術(shù)而言，其存在分子量范圍寬、工藝條件不完善和降解過程不可控等缺點(diǎn)存在。本研究以膠原蛋白的不同蛋白酶的傳統(tǒng)酶解反應(yīng)過程研究為基

2、礎(chǔ)，考察了基于超濾膜分離技術(shù)對(duì)于膠原蛋白肽的提取工藝，采用酶解-膜分離集成工藝提取分子量均一可控的的膠原蛋白肽，并采用高效凝膠色譜對(duì)制備的膠原蛋白肽分子量范圍進(jìn)行檢測(cè)，以牛明膠為原料探索了分子量均一多肽的制備方法。具體內(nèi)容如下：
　　1.酶解工藝研究：實(shí)驗(yàn)采用牛明膠為原料，利用不同蛋白酶對(duì)其進(jìn)行酶解，探究其酶解動(dòng)力學(xué)，對(duì)酶解速率及酶解程度進(jìn)行探索，經(jīng)實(shí)驗(yàn)所得，經(jīng)酶解60min后10kDa以下的小分子多肽所占比例分別為：堿性蛋白酶4

3、4.7％、胰蛋白酶39.8%、木瓜蛋白酶35.7%和中性蛋白酶15.3%。
　　2.膠原多肽膜分離研究：膜分離過程中多肽的透膜行為是進(jìn)行酶解-膜分離集成工藝的基礎(chǔ)，實(shí)驗(yàn)研究了明膠酶解產(chǎn)物超濾處理過程中溶液體積、循環(huán)流量等對(duì)不同分子量多肽跨膜行為的影響。實(shí)驗(yàn)對(duì)1.2L、600mL、300mL的明膠溶液進(jìn)行比較，60min內(nèi)3kDa左右的多肽組分變化量分別為分別為7.84%、16.99%、21.05%。
　　3.酶解-膜分離集成