微流控芯片單細(xì)胞分析.pdf

1、青島科技大學(xué)碩士學(xué)位論文微流控芯片單細(xì)胞分析姓名：何鵬申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：有機(jī)化學(xué)指導(dǎo)教師：孫雪梅20090415微流控芯片單細(xì)胞分析驗(yàn)條件是，緩沖液為pH90的1010。2toolL。1的硼酸緩沖溶液，分離電壓為11kV，檢測(cè)電勢(shì)為O8V(vsAg／AgCl)，進(jìn)樣方式為1OkV電遷移進(jìn)樣5S。在此實(shí)驗(yàn)條件下，得到了抗壞血酸的線性范圍(80x1050x104molL1)，線性回歸系數(shù)為09985，，并以電泳峰電流與噪聲比值(S／N

2、)為3時(shí)得到濃度檢測(cè)限為2710擊molL1。將5O104molL1抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液連續(xù)進(jìn)樣7次，得到抗壞血酸的遷移時(shí)間‰和峰電流乇的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)分別為O57％和21％，并將該方法用于檢測(cè)大鼠肥大細(xì)胞溶膜液中的抗壞血酸含量，加標(biāo)回收率在9497％之間。第五章，研制了一種新型的碳納米管／納米普魯士藍(lán)修飾的碳纖維簇微盤電極，并將其用于微流控芯片電化學(xué)檢測(cè)，測(cè)定了單個(gè)大鼠肥大細(xì)胞中的抗壞血酸。與未經(jīng)修飾的碳纖維微盤電極相比，這種碳納

3、米管／納米普魯士藍(lán)碳纖維微盤修飾電極在相對(duì)較低的檢測(cè)電位下(O4V凇Ag／AgCl)具有較好的催化氧化特性，靈敏度顯著提高。在最佳實(shí)驗(yàn)條件下，得到抗壞血酸的線性范圍為80xlff750x104molL1，檢測(cè)限為2710～molL～(S／N3)。將5O10～molL1抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液連續(xù)進(jìn)樣7次，得到抗壞血酸的遷移時(shí)間‰和峰電流乇的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)分別為086％和23％。在這一方法中，單個(gè)細(xì)胞通過(guò)電遷移導(dǎo)入芯片的雙T交叉點(diǎn)，在10

4、l(v的電壓下肥大細(xì)胞迅速溶膜，溶膜后細(xì)胞中的組分在微流控芯片中得到分離并檢測(cè)。用上述方法測(cè)得單個(gè)大鼠腹腔肥大細(xì)胞中抗壞血酸的含量為25—73fmol，這是使用碳纖維修飾電極在微流控芯片上對(duì)單個(gè)大鼠肥大細(xì)胞中組分含量測(cè)定的首次報(bào)道。第六章研制了一種集成化微芯片毛細(xì)管電泳電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)系統(tǒng)，并在該系統(tǒng)上，以碳纖維簇微盤電極為工作電極，Ru(bpy)3z作為發(fā)光試劑，考察了發(fā)光試劑的濃度、緩沖液的pH值、緩沖液濃度、分離電壓、檢測(cè)電勢(shì)等實(shí)驗(yàn)

5、參數(shù)對(duì)檢測(cè)谷胱甘肽的影響，得到的最佳檢測(cè)條件為：Ru(bpy)32的濃度為10x104molL～，38x10～toolL_1NaH2P04168x10～molL1Na2HP04(pH74)，分離電壓為12kV，檢測(cè)電勢(shì)為14V(vsAg／AgCl)，進(jìn)樣電壓1OkV，進(jìn)樣時(shí)間5S。在此實(shí)驗(yàn)條件下，將1O104molL1谷胱甘肽標(biāo)準(zhǔn)溶液連續(xù)進(jìn)樣7次，得到谷胱甘肽的遷移時(shí)間島和峰電流J的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)分別為092％和21％。這是首次