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文檔簡介
1、本實驗主要包括三大部分,首先,采用超聲波雙頻提取法對蕎麥殼進行提取,利用一系列化學實驗方法(如總酚含量的測定,黃酮含量的測定,DPPH·自由基的清除能力等)測定蕎麥殼提取物的抗氧化能力等,同時使用高效液相色譜法(HPLC)對蕎麥殼提取物中富含的黃酮多酚類物質(zhì)進行定性定量分析。結(jié)果顯示,蕎麥殼中總酚黃酮含量很高,分別達到4.359mg/g,3.096mg/g,HPLC定量分析結(jié)果顯示蘆丁含量高達3.055mg/g,其對于DPPH·和ABT
2、S·的清除能力分別達到72.85%和46.86%。
其次,采用體內(nèi)實驗的方法,以Wistar大鼠為研究對象,對其注射鏈脲佐菌素(Streptozocin,STZ)以建立Ⅱ型糖尿病實驗鼠模型,考察蕎麥殼提取物對糖尿病大鼠的血糖、血脂及氧化應激指標的影響,并且對實驗糖尿病大鼠肝臟中糖脂代謝相關(guān)基因進行實時熒光定量PCR實驗,對相關(guān)機理進行探討。結(jié)果表明:蕎麥殼提取物自由進食干預可在一定程度上降低MDA的含量,提高T-AOC含量,抗
3、糖尿病引起的氧化應激損傷,降低TC、TG等含量,進一步改善脂代謝水平,且與正常組、糖尿病組比較,干預組能顯著改善糖脂代謝及氧化應激相關(guān)基因mRNA的相對表達量,干預組中與糖原合成有關(guān)的基因(GS2、GYG1)表達上調(diào),與糖異生途徑有關(guān)的基因(PEPC、G6PC1)表達下調(diào),與脂肪合成有關(guān)的基因(ACC、FAS、SREBP1)表達下調(diào)。通過該研究發(fā)現(xiàn)蕎麥殼提取物可有效降低糖尿病大鼠的血糖,并有效改善脂代謝紊亂,提高抗氧化應激的能力,這極大
4、的提高了蕎麥殼的利用率,并為尋求一種較好的減緩糖尿病癥狀的有效飲食干預提供了新的思路。
最后,通過體外實驗(細胞實驗)進一步探究了蕎麥殼提取物對于脂代謝的作用機理,以C3H10T1/2-Clone8為研究對象,對其進行成脂誘導分化,并對細胞中與脂代謝相關(guān)的基因進行實時熒光定量PCR實驗。結(jié)果顯示,與成脂化誘導細胞相比,蕎麥殼提取物干預能顯著降低了與脂肪合成相關(guān)基因mRNA的表達量,這為蕎麥殼改善機體內(nèi)糖脂代謝紊亂提供了進一步的
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