花生肽分離純化及生理活性研究.pdf

1、分類號(hào)：TS218學(xué)號(hào)：201500370044專業(yè)學(xué)位碩士論文花生肽分離純化及生理活性研究IsolationPurificationofPeanutPeptidesPhysiologicAcitvityResearch研宄生姓名：王園園指導(dǎo)教師：尤艷莉副教授專業(yè)學(xué)位類型:農(nóng)業(yè)推廣碩士專業(yè)學(xué)位領(lǐng)域:食品加工與安全論文提交日期：2017年4月1日要商ij花生榨油之后得到的花生柏，具有豐富的蛋白資源，大部分的花生柏都被用作動(dòng)物飼料，沒有得到

2、充分的加工利用，造成了極大的浪費(fèi)。本實(shí)驗(yàn)通過花生柏酶解得到花生多肽，利用單因素實(shí)驗(yàn)和響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)確定了最適酶解條件，測定DPPH自由基清除能力和a葡萄糖苷酶抑制性。制備的花生肽通過進(jìn)一步的分離純化，得到較強(qiáng)活性的多肽組分。并檢驗(yàn)其a葡萄糖苷酶抑制性。在單因素實(shí)驗(yàn)中，通過對(duì)木瓜蛋白酶、堿性蛋白酶、風(fēng)味蛋白酶、胰蛋白酶四種蛋白酶以酶解物水解度為依據(jù)，得到最適蛋白酶為木瓜蛋白酶和堿性蛋白酶。酶解溫度、酶解時(shí)間、pH、加酶量、料液比五個(gè)因素是影響

3、木瓜蛋白酶酶解程度的主要因素，通過設(shè)定上述5種單因素的不同水平，以水解度為指標(biāo)，獲得木瓜蛋白酶水解的最優(yōu)單因素條件。木瓜蛋白酶酶解條件為溫度50C、pH為6.5、酶解時(shí)間120min、加酶量15mUg。然后以pH、溫度、料液比進(jìn)行三因素三水平的響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)得到的理論最優(yōu)條件：溫度50C、初始pH為6.5、料液比1:20，計(jì)算理論水解度為17.17%。考慮到實(shí)驗(yàn)的方便性，本實(shí)驗(yàn)選用的溫度：50C、初始pH為6.5、料液比1:20，實(shí)驗(yàn)

4、水解度17.09%，與理論值無顯著差異。酶解的花生肽測定DPPH自由基清除活性得出花生多肽10mgmL時(shí)清除率為64.90%。酶解溫度、酶解時(shí)間、pH、加酶量、料液比五個(gè)因素是影響堿性蛋白酶酶解程度的主要因素，通過設(shè)定上述5種單因素的不同水平，以水解度為指標(biāo)，獲得堿性蛋白酶水解的最優(yōu)單因素條件。堿性蛋白酶酶解條件為溫度50C、pH為8.0、酶解時(shí)間180min、加酶量15mUg、料液比1:20。然后以pH、溫度、料液比進(jìn)行三因素三水平的

5、響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)得到的理論最優(yōu)條件：溫度：50C、初始pH為8.0、料液比1:20，計(jì)算理論水解度為12.46%?？紤]到實(shí)驗(yàn)的方便性，本實(shí)驗(yàn)選用的溫度:50C、初始pH:8.0、料液比1:20，實(shí)驗(yàn)水解度12.52%，與理論值無顯著差異。酶解的花生肽測定測定a葡萄糖苷酶抑制性40mgmL花生肽a葡萄糖苷酶29.80%。將凍干的花生肽進(jìn)行分離純化，以a葡萄糖苷酶抑制性為指標(biāo)進(jìn)行超濾10KD、3KD，凝膠層析G25、G15分離純化，通過超濾