新型細(xì)胞微環(huán)境檢測熒光探針的設(shè)計(jì)、合成和應(yīng)用.pdf

1、基于半菁染料，熒光碳點(diǎn)為熒光母體，設(shè)計(jì)、制備了三種高選擇性熒光探針。利用分子內(nèi)電荷轉(zhuǎn)移效應(yīng)（ICT），細(xì)胞內(nèi)吞和靶向基團(tuán)實(shí)現(xiàn)了環(huán)境中和和活細(xì)胞內(nèi)微環(huán)境的定性、定量檢測。
　　(1)由于傳統(tǒng)的pH計(jì)不能很好地應(yīng)用在微環(huán)境如亞細(xì)胞器和復(fù)雜生物體系中的pH值動態(tài)和精確定量檢測。因此迫切需要研究可監(jiān)測復(fù)雜多變生物體系中pH值變化且具有高靈敏度的pH值響應(yīng)分子探針?；诎胼既玖虾铣闪艘环N比色和熒光雙模態(tài)檢測pH的比率型分子探針CPH。CPH

2、的具有合適的pKa（6.44），使其可以聚集在溶酶體內(nèi)成為靶向溶酶體的探針。CPH可監(jiān)測經(jīng)抗瘧疾藥氯喹刺激HeLa細(xì)胞后溶酶體內(nèi)pH值的變化。將CPH固載在試紙上，可實(shí)現(xiàn)對環(huán)境中酸性和堿性蒸汽的可逆、動態(tài)、裸眼檢測。這一概念驗(yàn)證展現(xiàn)出CPH作為檢測溶酶體內(nèi)pH變化的分子工具的潛在應(yīng)用，同時(shí)提供了一種經(jīng)濟(jì)、可重復(fù)和快速對酸堿蒸汽的光學(xué)pH探針。
　　(2)溶酶體是酸性囊狀結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器，其膜內(nèi)含有大量酶和蛋白質(zhì)， pH值是4.5-5.

3、5。因此，發(fā)展通過可視化熒光信號用于溶酶體標(biāo)記和成像對理解與溶酶體功能紊亂相關(guān)的病理學(xué)顯得尤為重要。首次設(shè)計(jì)、制備了基于熒光碳點(diǎn)用于標(biāo)記溶酶體的納米探針 CDs-PEI-ML。該探針具有良好的水溶性和光穩(wěn)定性。我們推測其成像原理是該納米探針先通過內(nèi)吞進(jìn)入 HeLa細(xì)胞，再通過嗎啉基團(tuán)使其聚集在溶酶體內(nèi)。
　　(3)基于半菁骨架，我們發(fā)展了一種比率型溶酶體探針CPY。該探針具有優(yōu)良的溶酶體靶向性。利用該探針揭示出溶酶體的pH會隨著熱