喹諾酮類藥物的熒光分析及黃酮化合物與蛋白質(zhì)相互作用的研究.pdf

1、熒光分析法具有靈敏度高、選擇性好等優(yōu)點，本文采用熒光光譜法建立了喹諾酮類藥物的熒光分析新方法，并研究了中草藥中黃酮類化合物染料木素、木犀草素與人血清白蛋白的相互作用。在系統(tǒng)查閱有關(guān)文獻(xiàn)資料的基礎(chǔ)上，進(jìn)行了以下研究工作：
　　 （1）以稀土離子鋱為熒光探針，建立了簡單、靈敏的測定痕量諾氟沙星的熒光分析新方法。對測定條件進(jìn)行了優(yōu)化：在pH=6.0的六次甲基四胺-鹽酸緩沖液中能量轉(zhuǎn)移最好；[Tb3+]/[Norfloxacin]達(dá)到4

2、0000:1時，Tb3+在488 nm處的相對熒光強(qiáng)度達(dá)到最大。這種方法檢出限低于直接熒光法十多倍；并測定了膠囊中諾氟沙星的含量，回收率為90.6％，并對反應(yīng)機(jī)理進(jìn)行了探討。
　　 （2）以稀土離子鋱為熒光探針，對左氧氟沙星-Tb3+體系的反應(yīng)條件進(jìn)行了優(yōu)化，建立了左氧氟沙星-Tb3+體系測定左氧氟沙星的新方法。方法線性范圍為1.0×10-8-5.0×10-6 mol·L-1，檢出限為4.5×10-9 mol·L-1。測定了膠囊

3、和注射液中藥物含量，回收率較高。對反應(yīng)機(jī)理進(jìn)行了探討，左氧氟沙星-Tb3+絡(luò)合物可使稀土離子Tb3+的L-M型特征熒光增敏，將左氧氟沙星寬帶、短波長熒光峰轉(zhuǎn)化為Tb3+銳線、長波長熒光峰，從而可能避免蛋白質(zhì)等物質(zhì)的干擾而對復(fù)雜生物樣品中的藥物進(jìn)行測定。
　　 （3）用熒光光譜、同步熒光光譜和紫外吸收光譜方法，研究了木犀草素與人血清白蛋白（HAS）的相互作用。研究表明木犀草素對HAS有較強(qiáng)的熒光猝滅作用，根據(jù)不同溫度下木犀草素對H

4、AS的熒光猝滅作用，利用Stern-Volmer方程處理實驗數(shù)據(jù)，結(jié)果表明木犀草素對HAS的熒光猝滅作用屬于靜態(tài)猝滅。根據(jù)F?rster非輻射能量轉(zhuǎn)移理論計算了木犀草素與HAS間的結(jié)合常數(shù)和結(jié)合位點數(shù)，確定了木犀草素與HAS之間主要靠疏水作用力結(jié)合；求得了木犀草素與HAS間的結(jié)合距離r，熱力學(xué)數(shù)據(jù)表明二者主要靠疏水作用力結(jié)合，同時用同步熒光光譜探討了木犀草素對HAS構(gòu)象的影響。
　　 （4）用熒光猝滅光譜、同步熒光光譜和紫外-可

5、見吸收光譜，研究了染料木素與人血清白蛋白（HAS）的相互作用。結(jié)果表明染料木素對HAS的熒光猝滅作用屬于二者形成復(fù)合物所引起的靜態(tài)猝滅；利用Stern-Volmer方程處理實驗數(shù)據(jù)，得到染料木素與HAS之間的結(jié)合常數(shù)KA為1.00×106（27 ℃）、1.66×106（37 ℃）和5.25×106（47 ℃）。根據(jù)F?rster非輻射能量轉(zhuǎn)移理論，求出了染料木素與HAS之間的結(jié)合距離為2.59 nm（27 ℃）、2.65 nm（37 ℃