應用小鼠模型研究水牛奶的抗氧化和抗疲勞及學習記憶增強功能.pdf

1、水牛奶營養(yǎng)豐富，其營養(yǎng)遠高于奶牛奶。近幾十年，國內外關于水牛奶的研究主要集中在營養(yǎng)成分的分析，而對其特殊功能研究較少。本研究應用小鼠模型，結合運動實驗、行為學實驗以及血液與組織中各種生理生化指標檢測等實驗手段，研究水牛奶的抗氧化和抗疲勞作用及對衰老小鼠學習記憶能力的影響，為深入研究水牛奶的特殊功能，開發(fā)水牛奶功能食品提供理論依據。主要研究內容和結果如下:
　　1.水牛奶的抗氧化作用
　　為了了解水牛奶的抗氧化作用以及熱處理方

2、式對水牛奶抗氧化作用的影響，本研究采用頸背部皮下注射D-半乳糖(D-gal)來構建小鼠衰老模型。將50只小鼠隨機分為5組，每組10只，除1組（正常對照組）每天注射生理鹽水外，其余4組除每天注射800mg/(kg.d) D-gal溶液制備衰老模型外，另配備飲用水（衰老模型對照組）、200mg/(kg.d)維生素C(VC)水溶液（陽性對照組）、巴氏殺菌水牛奶（巴氏水牛奶組）和高溫熱處理水牛奶（高溫水牛奶組），讓其自由飲用，連續(xù)處理8周。各組

3、自由采食飼料、自由飲水。飼喂8周后測定血液和肝臟中谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物岐化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)的含量。
　　結果發(fā)現(xiàn):與正常對照組相比，衰老模型對照組小鼠血清和肝臟內MDA含量顯著增加(P＜0.05)，而GSH-Px活性顯著下降(P＜0.05)。巴氏殺菌水牛奶和高溫熱處理水牛奶均能緩解由D-gal引起的體增重緩慢現(xiàn)象，而VC陽性組作用不明顯（P＞0.05）。巴氏殺菌水牛奶和高溫熱處理水牛奶均能

4、夠有效提高D-gal衰老小鼠血清和肝臟內抗氧化酶GSH-Px、SOD活性(P＜0.05)，降低血清中MDA含量(P＜0.05)。與飼喂VC的小鼠相比，飼喂巴氏殺菌水牛奶的小鼠血清中SOD活性更高，MDA含量更低，肝臟中SOD和GSH-PX活性更高。與飼喂高溫熱處理水牛奶的小鼠相比，飼喂巴氏殺菌水牛奶的小鼠血清和肝臟中的抗氧化酶GSH-Px、SOD活性增高，而MDA含量降低。因此認為:(1)在自由飲用條件下，水牛奶的抗氧化作用優(yōu)于VC;(

5、2)熱處理對水牛奶的抗氧化作用有影響，巴氏殺菌水牛奶的抗氧化作用優(yōu)于高溫熱處理水牛奶。
　　2.水牛奶的抗疲勞作用
　　為了探討水牛奶(BM)和奶牛奶(CM)的抗疲勞作用、分析性別對抗疲勞作用的影響。取昆明小鼠160只（雌雄各80只），分成8組（雌雄各4組），每組20只。每組分別配備水（正常對照組）、1000mg/(kg.d)?；撬崴芤海栃詫φ战M）、巴氏殺菌水牛奶（水牛奶組）、巴氏殺菌奶牛奶（奶牛奶組），讓其自由飲用，連

6、續(xù)處理4周。各組自由采食飼料、自由飲水。連續(xù)飼喂4周后測定小鼠力竭游泳時間、血中乳酸脫氫酶(LDH)和尿素氮(BUN)及肝糖原含量。
　　結果發(fā)現(xiàn):巴氏殺菌水牛奶可以顯著（P＜0.05）延長小鼠的力竭游泳時間，降低血清中BUN含量，提高LDH活性(P＜0.05)，但在降低肝糖原的消耗上效果不明顯（P＞0.05）;而巴氏殺菌奶牛奶雖對這幾個指標有一定的影響，但效果均不顯著（P＞0.05）。分析性別對巴氏殺菌水牛奶抗疲勞效果的影響，從

7、力竭游泳時間、肝糖原、LDH三個指標來看，巴氏殺菌水牛奶對雌性小鼠的抗疲勞效果優(yōu)于雄性小鼠。因此認為:(1)巴氏殺菌水牛奶具有抗疲勞作用，而奶牛奶雖有一定的緩解疲勞效果，但效果不顯著;(2)巴氏殺菌水牛奶對雌性的抗疲勞效果優(yōu)于雄性。
　　3.水牛奶對衰老模型小鼠學習記憶能力的影響
　　為了分析水牛奶對衰老模型小鼠學習記憶能力的作用和熱處理方式對這種作用的影響，本研究采用頸背部皮下注射D-gal構建小鼠衰老模型，即學習記憶障礙

8、模型。將50只小鼠隨機分為5組，每組10只，除1組（正常對照組）每天注射生理鹽水外，其余4組除每天注射800mg/(kg.d) D-gal溶液制備衰老模型外，另配備飲用水（衰老模型對照組）、400mg/(kg.d)腦復康水溶液（陽性對照組）、巴氏殺菌水牛奶（巴氏水牛奶組）和高溫熱處理水牛奶（高溫水牛奶組），讓其自由飲用，連續(xù)處理8周。各組自由采食飼料、自由飲水。飼喂8周后，應用新物體實驗(ORT)和新位置實驗(OLT)測定各組小鼠的優(yōu)先

9、指數(shù)(PID)和辨別指數(shù)(DI)，并取全部小鼠的大腦測定總腦蛋白含量和抗氧化酶活性。
　　結果發(fā)現(xiàn):與正常組相比，衰老模型對照組在ORT和OLT中的優(yōu)先指數(shù)和辨別指數(shù)顯著下降(P＜0.05)，小鼠腦中蛋白質含量降低，腦內抗氧化酶GSH-PX、 SOD活性顯著降低（P＜0.05），MDA含量顯著上升（P＜0.05）。巴氏殺菌水牛奶和高溫熱處理水牛奶均能夠顯著提高衰老小鼠在ORT和OLT中的優(yōu)先指數(shù)和辨別指數(shù)(P＜0.05)，促進腦蛋

10、白質的合成和利用，提高D-gal衰老小鼠大腦內GSH-PX、SOD活性，降低MDA含量。分析熱處理方式對水牛奶改善衰老小鼠學習記憶能力的影響，在ORT中，高溫水牛奶組小鼠的優(yōu)先指數(shù)和辨別指數(shù)高于巴氏水牛奶組;在OLT中，巴氏水牛奶組小鼠的優(yōu)先指數(shù)和辨別指數(shù)高于高溫水牛奶組。因此認為:(1)水牛奶對學習記憶能力的改善與提高大腦的抗氧化能力有關;(2)高溫熱處理水牛奶對改善非空間學習記憶能力作用較好，而巴氏殺菌水牛奶對改善空間學習記憶能力的