兩例亞細胞器定位性近紅外熒光探針.pdf

1、熒光生物成像技術是在亞細胞層次展現(xiàn)生物組織形貌的一個很有力的方法，在熒光成像中，最基本也是最關鍵的是熒光探針?；跓晒馓结樀臒晒夥治龇ㄓ捎谄涓哽`敏性、高選擇性、易于操作、實時檢測、無損檢測以及對生物樣品具有良好的相容性的特點已廣泛應用于對各種物種的檢測中。近年來，熒光成像技術迅猛發(fā)展，其已經(jīng)成為對活細胞和動物體內各種微小物種進行檢測和成像不可或缺的工具。
　　肼是一種大家熟知的高能推進劑，其廣泛應用于工農業(yè)的各個領域，但肼具有致命

2、的毒性。由此，開發(fā)可靠、靈敏的分析手段用于肼的精確檢測是非常重要的。我們基于七甲川菁染料甲川鏈上π共軛體系的調節(jié)，合成了一例定位于線粒體且能在近紅外光區(qū)選擇性比率檢測肼的熒光探針Cy7A。Cy7A對肼有比較好的響應，在肼的作用下，Cy7A能被選擇性地肼解，其吸收和發(fā)射光譜均會發(fā)生很大的變化(最大吸收波長從784 nm藍移到520 nm，最大發(fā)射波長從810 nm藍移到582 nm)。其他離子和小分子對肼的檢測不會有明顯干擾，Cy7A對肼

3、的檢測限達到0.81 ppb。Cy7A具有可忽略的細胞毒性，且定位于細胞中的線粒體，這對肼在細胞層次的毒理學研究具有一定的促進意義。Cy7A能用于對實際水樣中肼定量檢測，還能對細胞中的肼進行比率成像，而且首次通過兩個通道的熒光信號變化監(jiān)測了小鼠體內的肼。
　　溶酶體及與溶酶體相關的細胞器由真核細胞中呈酸性的囊狀結構組成，其內部的pH為4.0-5.0，它們其中包含了大量的具有各種功能的酶和分泌蛋白。利用雙光子激發(fā)的雙光子熒光成像技術

4、能真實地展現(xiàn)溶酶體在活細胞和組織中的分布，是生命科學研究中的一個十分重要的工具。我們合成了一例近紅外雙光子染料PBC，PBC具有明顯的溶劑化效應和較好的光穩(wěn)定性，PBC的最大發(fā)射波長能達到近紅外并且具有很大的Stokes shift(大于170 nm)。PBC對對活細胞（不管是癌細胞還是正常細胞）均有比較好的染色效果。將PBC分別與商業(yè)化的溶酶體定位染料Lyso Tracker Green和商業(yè)化的內質網(wǎng)定位染料ER Tracker G