以牛肺表面活性物質(zhì)為載體的的rhVEGF165療法對高氧誘導(dǎo)新生鼠BPD模型的干預(yù)研究.pdf

1、目的：VEGF信號通路受損可導(dǎo)致肺泡損害、肺血管密度下降，從而出現(xiàn)BPD樣改變。目前以病毒介導(dǎo)VEGF基因療法或單純肌肉注射VEGF蛋白，干預(yù)BPD模型動物的方式為主，但VEGF可以增加血管通透性，且全身應(yīng)用對其它組織器官具有一定影響，本實驗提出以牛肺表面活性物質(zhì)為載體，氣道內(nèi)局部給予適量VEGF，觀察其對BPD肺組織結(jié)構(gòu)的改善情況。
　　方法：
　　方法一新生1d SD大鼠24只平均分為2組，一組為空氣對照組，一組置于75

2、%氧環(huán)境建立高氧誘導(dǎo)新生鼠BPD模型。于生后14d建模成功后，脫離氧環(huán)境，兩組均采用自制而成的氣管插管，經(jīng)聲門氣管插管方式，氣道內(nèi)給予2ul/g生理鹽水，觀察兩組新生鼠體重、氣管插管時間、干預(yù)后一周新生鼠存活率，新生鼠活力，并于生后21d處死，取肺組織行蘇木精-伊紅染色，觀察其結(jié)構(gòu)形態(tài)學(xué)變化。方法二將生后1d SD大鼠置于氧環(huán)境或空氣中13d，于生后14d，高氧組大鼠脫離氧環(huán)境，置于空氣中。其中，將空氣組大鼠平均分為空白對照組（R組），

3、生理鹽水組（RN組）；氧暴露組大鼠平均分為生理鹽水對照組（HN組）、VEGF組（HV組）、牛肺表面活性物質(zhì)組（HC組）和牛肺表面活性物質(zhì)與VEGF混合液組（HCV組），各干預(yù)組大鼠數(shù)目相同。均于生后14d，連續(xù)3d，每日氣道內(nèi)給予2ul/g﹒d體積的各組相應(yīng)干預(yù)物，其中，牛肺表面活性物質(zhì)（珂立蘇）用量為50mg/Kg﹒d，rhVEGF165用量為20ug/Kg﹒d。各組大鼠于生后21d處死，留取肺標(biāo)本，通過測定輻射狀肺部計數(shù)（RAC）和

4、肺血管密度，觀察肺組織形態(tài)學(xué)變化，通過Western-blot檢測肺組織中VEGF蛋白的表達水平，免疫組化測定eNOS蛋白和HGF蛋白表達量，探討VEGF干預(yù)的可能機制。
　　結(jié)果：氣道內(nèi)給予該體積生理鹽水，對肺組織形態(tài)無明顯損害；高氧對照組RAC和肺血管密度下降，VEGF、eNOS和HGF蛋白表達量減少；氣道內(nèi)給予牛肺表面活性物質(zhì)及VEGF的混合液，相對于高氧生理鹽水組，增加了RAC和肺血管密度，上調(diào)了VEGF、eNOS和HGF

5、蛋白表達量，且與空氣對照組相比，均無統(tǒng)計學(xué)差異；VEGF組和牛肺表面活性物質(zhì)組，在一定程度上改善了肺組織形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)，對蛋白表達水平影響，相對于高氧生理鹽水組，氣道內(nèi)給予VEGF在一定程度上增加了VEGF、eNOS蛋白表達量，氣道內(nèi)給予牛肺表面活性物質(zhì)增加了HGF表達量，且均低于空氣對照組。
　　結(jié)論：新生大鼠置于高氧環(huán)境可引起肺形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生類BPD樣改變，以牛肺表面活性物質(zhì)為載體，氣道內(nèi)給予適量rhVEGF165，可能通過調(diào)控eN