云芝子實(shí)體多糖的提取分離、結(jié)構(gòu)鑒定及生物活性研究.pdf

1、多糖是云芝中重要的生物活性物質(zhì)之一，在保健食品和醫(yī)藥方面應(yīng)用廣泛。通過Box-Benhnken設(shè)計(jì)響應(yīng)面優(yōu)化閃式提取云芝子實(shí)體多糖工藝，得到條件為閃式提取時(shí)間為2.88min，轉(zhuǎn)速為16667.25r/min,料液比1:40。最優(yōu)條件下云芝子實(shí)體多糖得率為4.94％。多糖提取液經(jīng)分級醇沉得到三種醇沉組分CVPS30、CVPS60、CVPS80，CVPS30組分多糖含量最高為59.14%，所以選用CVPS30進(jìn)行分離純化。
　　粗多

2、糖CVPS30經(jīng)過瓊脂糖凝膠離子柱層析和Sephacryl S聚丙烯酰胺葡聚糖系列（S-200和S-500）凝膠柱層析純化后得到CVPS30-2aI，經(jīng)高效液相色譜和近紅外光譜分析，其分子量為1.937×106 Da，屬于中性多糖。
　　對CVPS30-2aI進(jìn)行乙酰化處理后用氣相-質(zhì)譜聯(lián)用檢測其單糖組成。研究表明，CVPS30-2aI的單糖組成為D-葡萄糖。甲基化分析檢測到7種甲基化產(chǎn)物，說明CVPS30-2aI主要有4-Glc

3、p、4,6-Glcp、3,6-Glcp和T-Glcp四種連接方式，其摩爾比為3.33：2.25：1：2.82。
　　通過對云芝子實(shí)體多糖進(jìn)行體外抗氧化實(shí)驗(yàn)和小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)CVPS30、CVPS60、CVPS80具有較好的抗氧化活性，且隨著濃度的升高而增強(qiáng)。對ABTS自由基、羥基自由基的清除能力較強(qiáng)，而對DPPH自由基的清除能力則相對略弱。采用MTT法檢測脾淋巴細(xì)胞的增殖，用實(shí)驗(yàn)組吸光值與對照組吸光值的差值的大小表示增