黃腐酸中黃酮類化合物的提取及純化工藝研究.pdf

1、研究表明，天然生物黃酮類物質(zhì)具有清除自由基、抗菌、抗癌、調(diào)節(jié)人體免疫系統(tǒng)等生理功能，本文以黃腐酸為原料，研究了黃腐酸中黃酮類物質(zhì)的提取工藝、純化工藝，及通過(guò)特征顏色反應(yīng)初步定性了黃腐酸提取物，并同時(shí)利用HPLC對(duì)五種黃酮類物質(zhì)進(jìn)行了分離檢測(cè)。
　　本研究分為四個(gè)部分：第一章闡述了黃酮類化合物的基本性質(zhì)、生理功能、提取方法及純化方法，并總結(jié)了研究背景、意義、內(nèi)容及展望。第二章建立了超聲波法提取黃腐酸黃酮類物質(zhì)提取工藝。通過(guò)單因素試驗(yàn)

2、考察了不同提取劑、料液比、浸泡時(shí)間、超聲溫度、超聲時(shí)間對(duì)黃酮提取效率的影響，在單因素試驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)上，通過(guò)設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)優(yōu)化獲得黃腐酸黃酮類化合物的最優(yōu)提取工藝條件：提取劑為甲醇，料液比為1:14(g:mL)、浸泡時(shí)間為2 h、超聲溫度為51~55℃、超聲時(shí)間為60 min。該工藝簡(jiǎn)單方便、可行性強(qiáng)，黃酮提取率較高。第三章建立了HP-20大孔樹脂純化黃腐酸中黃酮類物質(zhì)的方法。通過(guò)黃酮顏色反應(yīng)考察了黃腐酸提取物是否含有黃酮類物質(zhì)；通過(guò)HP-

3、20大孔樹脂靜態(tài)吸附、解析試驗(yàn)，考察了樹脂的飽和吸附量、飽和吸附率及解析率；通過(guò)吸附動(dòng)力學(xué)研究，考察了上樣速度、洗脫劑濃度、洗脫速率對(duì)黃腐酸中黃酮類化合物純化影響，并獲得最優(yōu)純化工藝。研究結(jié)果表明，顏色反應(yīng)初步定性黃腐酸提取物中含有黃酮類或黃酮醇類物質(zhì)；HP-20大孔吸附樹脂的飽和吸附量、飽和吸附率及解析率分別為3.7 mg/g、87.2％、84.2%， HP-20樹脂對(duì)黃腐酸黃酮類物質(zhì)的純化效果較好，上樣速度4 mL/min、洗脫劑濃

4、度為60%乙醇-水溶液及洗脫速率為4 mL/min是純化黃腐酸黃酮的最佳工藝。第四章建立了五種黃酮類物質(zhì)的HPLC分離檢測(cè)方法?？疾炝瞬煌鲃?dòng)相比例、流速、柱溫、流動(dòng)相酸度等因素對(duì)色譜分離效果的影響，并得到最佳色譜分離條件；考察了五種黃酮線性相關(guān)性、方法檢出限、方法精密度及方法穩(wěn)定性。結(jié)果表明，其最佳分離條件：檢測(cè)波長(zhǎng)為260 nm、流速為1.5 mL/min、流動(dòng)相為V甲醇：V水(含0.05%乙酸)=55:45、柱溫為25℃(室溫)，