淺談臨床檢驗abo血型鑒定的質(zhì)量控制方法

1、淺談臨床檢驗 ABO 血型鑒定的質(zhì)量控制方法1淺談臨床檢驗 ABO 血型鑒定的質(zhì)量控制方法摘要 目的：總結(jié)探討血型鑒定的影響因素。方法：對 418 例學(xué)生采用玻片法和試管法進(jìn)行血型鑒定。結(jié)果：玻片法和試管法存在一定結(jié)果不符，其準(zhǔn)確率低于試管法。結(jié)論：血型鑒定存在一定的影響因素，血型鑒定時，需要綜合考慮。關(guān)鍵詞 關(guān)鍵詞 ABO 血型；血型鑒定；抗體；血清學(xué)試驗正文內(nèi)容前言 血型是人類血液以血型抗原為表現(xiàn)形的遺傳性狀，ABO 血型系統(tǒng)和

2、 Rh 血型系統(tǒng)是紅細(xì)胞的兩大血型抗原抗體系統(tǒng)，在臨床輸血和血液遺傳學(xué)研究上有重要意義。血型鑒定(blood typing)是臨床輸血的首要問題，正確的血型鑒定是保證輸血安全的前提條件。臨床常用的血型鑒定方法有鹽水凝集法和凝膠微柱法。鹽水凝集法因簡單易行在臨床上廣泛應(yīng)用，其又分為玻片法和試管法，結(jié)果在實際操作中會受到諸多因素的影響。本文通過對 418 名學(xué)生的玻片法和試管法的血型鑒定結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析，探討 ABO 血型鑒定中的影響因素。

3、一 資料和方法對象：我校檢驗學(xué)院 2004 年 8 月 2009 年 10 月間 418 名學(xué)生，年齡 18～25 歲，平均年齡 21．4-t：2．5 歲。每名學(xué)生同時用玻片法和試管法兩種方法進(jìn)行 ABO 血型鑒定。標(biāo)本采集：抽取 EDTA 抗凝血，在 2 小時內(nèi)完成 ABO 血型鑒定操作。 ABO 血型鑒定方法：正定型法：① 玻片法：取清潔且?guī)в袌A形凹陷的推片 1 張，并注明 A、B：字樣。將抗 A 試劑、抗 B 試劑各 1 滴分別滴

4、于玻片上 A、B 處。分別取等體積待檢血樣(5％紅細(xì)胞懸液或全血)于抗 A 試劑和抗 B 試劑。另取潔凈推片 1 張，標(biāo)明 A 細(xì)胞、B 細(xì)胞和 0 細(xì)胞，用滴管各加受檢者血清 1 滴，再分別用滴管滴加 A、B 和 0 型試劑紅細(xì)胞懸液 1 滴。用不同的竹簽將分型試劑與待檢血樣調(diào)勻，同時不停的搖動玻片(或瓷盤)并觀察血型凝集(或溶血)反應(yīng)，也可用低倍鏡觀察結(jié)果。②試管法：取潔凈小試管(內(nèi)徑 10mm×60mm)2 支，分別標(biāo)上

5、抗A、B 字樣，分別加入抗 A、抗 B 標(biāo)準(zhǔn)血清各 1 滴，于相應(yīng)標(biāo)記的試管；然后分別淺談臨床檢驗 ABO 血型鑒定的質(zhì)量控制方法3又只用肉眼觀察結(jié)果，使之在血型抗原較弱的情況下，微弱、細(xì)小的凝集未看到，而造成定型報告錯誤。② 標(biāo)本新鮮，嚴(yán)防污染。細(xì)菌污染的標(biāo)本，紅細(xì)胞上T 抗原被激活，與標(biāo)準(zhǔn)血清中的抗 T 抗體結(jié)合，出現(xiàn)全凝集現(xiàn)象，干擾血型鑒定。某些疾病如多發(fā)性骨髓瘤所致的高球蛋白血癥在做 ABO 血型鑒定時出現(xiàn)假凝集，可加做自身血

6、清和紅細(xì)胞，自身紅細(xì)胞和生理鹽水對照試驗及結(jié)合反定型結(jié)果進(jìn)行鑒定。當(dāng)疑有血漿成分干擾血型鑒定時，可用生理鹽水反復(fù)洗滌紅細(xì)胞以除去干擾。③ 冷凝集素屬于冷反應(yīng)性的自身抗體，4℃ 條件下，正常人血清中的冷凝集素效價低于 1：16，冷凝集素效價增高是導(dǎo)致獻(xiàn)血者血型正反定型不符的常見廄 。在較低溫度條件下，冷凝集素能夠與標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞和自身紅細(xì)胞產(chǎn)生凝集現(xiàn)象，凝集強度隨著溫度的升高而減弱。低效價的冷凝集素在 37qC 不能凝集標(biāo)準(zhǔn) RBC 和自身

7、RBC，因此不會造成血型誤判，但高效價的冷凝集素在 37℃仍可產(chǎn)生較強凝集，容易造成血型誤判。如果獻(xiàn)血者血清中含有高效價的冷凝集素，在血型鑒定試驗中應(yīng)使用 37℃生理鹽水洗滌紅細(xì)胞或 45％熱放散，或用經(jīng) 4cI=處理的冷凝集素被自身紅細(xì)胞吸收后的血清進(jìn)行血型鑒定，以排除冷凝集素的干擾。在肺炎、支原體肺炎、肝硬化等疾病患者血清中，冷凝集素很高，嚴(yán)重干擾血型鑒定。④ ABO 亞型在血型血清學(xué)試驗中是導(dǎo)致正反定型不符的主要原因之一。亞型屬于

8、同一血型抗原，是由基因所決定的抗原結(jié)構(gòu)和位點數(shù)改變導(dǎo)致的弱表現(xiàn)型。在 A 抗原中主要為 A，和 A ，其他 A 亞型不多見，而 B 亞型通常比 A 亞型更少。⑤ ABO 血型抗體減弱：ABO 血型規(guī)則抗體合成量的不足也是造成正反定型不符的重要因素。當(dāng)獻(xiàn)血者血清中抗一 A 和抗一 B 效價減弱，其反定型格局總表現(xiàn)為 AB 型。在這種情況下，可以通過增加血清用量，降低反應(yīng)溫度，延長反應(yīng)時間，應(yīng)用低離子強度溶液等方法，檢出低效價的抗一 A 和

9、抗一 B。 3、實驗器材 ① 所用器材必須清潔、干燥，試管、滴管要專用，標(biāo)記清楚。②用試管法定型時，應(yīng)同時進(jìn)行正向和反向定型。每批測定均須設(shè)置對照。③紅細(xì)胞濃度按要求配制，紅細(xì)胞與相應(yīng)抗體的比例適當(dāng)。④反應(yīng)溫度、反應(yīng)時間、離心時間是血型鑒定的重要影響因素，要按操作規(guī)程嚴(yán)格控制。4、其它因素 ① 經(jīng)輸血或妊娠等免疫刺激產(chǎn)生，在獻(xiàn)血者中常見的不規(guī)則抗體是抗一 M、抗一 N 和抗一 A 等。在反定型試驗中，不規(guī)則抗體可以和標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞上相應(yīng)的