南寧市寵物貓外耳炎細(xì)菌分離鑒定及藥敏試驗(yàn)

1、1 0 2廣西畜牧獸醫(yī) 2 0 1 5 年 V o 1 ． 3 1( 2 )南 寧市 寵物 貓 外耳 炎 細(xì)菌 分 離鑒 定及 藥敏 試 驗(yàn) 龔寒春 ， 曾蕓 ， 黃 曉玲 ， 黃 益 ， 韋子才( 1 ． 廣西大學(xué) ， 廣西南寧 5 3 0 0 0 4 ； 2 ． 欽州市動(dòng)物疫病預(yù)防控制 中心 ， 5 3 5 0 0 9；3 ． 欽州市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督 所 ， 5 3 5 0 0 9 )中圖分類號(hào) ： $ 8 5 8 ． 2 9

2、 3 ． 5 1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 ： B文章編號(hào) ： 1 0 0 2— 5 2 3 5 ( 2 0 1 5 ) 0 2— 0 1 0 2一 O 3摘要 ： 為 了解南寧 市貓外 耳道疾 病發(fā)生 規(guī)律 及流 行特 點(diǎn) ， 無菌取寵物 貓耳 道分 泌物 ， 用 普通 瓊脂 、 T S T培養(yǎng) 基分離培養(yǎng)病原菌 ， 分離得到 1 3 株優(yōu)勢菌 ， 其 中桿菌 9株 ， 球菌 4 株 。生化試 驗(yàn)結(jié) 果表 明分離 菌 為出血 性 巴氏桿菌 、 陰溝腸

3、桿 菌 、 小腸結(jié) 核耶 爾森 氏菌 、 肺炎 克雷 伯 氏菌 、 流感嗜血 桿菌 、 模仿 葡萄球 菌 、 金黃 色葡 萄球 菌 、 木糖葡萄球 菌各 1 株。藥敏試 驗(yàn)結(jié) 果表 明病 原分 離菌對慶大霉素 、 阿米 卡星 、 頭孢 曲松 敏感 ， 可作 為治 療外耳炎的首選藥物 ； 分離菌對 氨芐西林 、 阿莫西林耐 藥 。關(guān)鍵詞 ： 寵物貓 ； 外耳炎 ； 分離鑒定 ； 藥敏試驗(yàn) 外耳炎是一種由多因素引起的耳部疾病， 包括 寄生蟲

4、 、 真菌 、 異物、 過敏疾病 、 角質(zhì)化異常和 自身 免疫性疾病 ， 這些原 因都可 以導(dǎo)致貓外耳 炎 的發(fā) 生 。某些 因素可提高動(dòng)物易感性 ， 比如耳道形態(tài) 、耳道浸漬 、 氣候變化 、 治療失誤 、 耳道阻塞 、 肛囊疾 病 、 發(fā)熱和全身性疾病 ， 這些因素或單獨(dú)或共 同作 用于耳道， 打破微生物和宿主之間微生態(tài) 的平衡 ，增加了外耳炎的患病幾率¨ J 。如繼發(fā)感染金黃色 葡萄球菌 、 鏈球菌 、 變形桿菌及大腸桿

5、菌等， 或皮屑 芽孢菌屬 、 大小芽孢菌等真菌也可引起外耳炎 』 。國外關(guān)于貓外耳道正常微生物菌群 、 外耳炎病原微 生物及其治療方法的報(bào)道很多， 但國內(nèi)尚無詳細(xì)資 料報(bào)道 。本試驗(yàn)的 目的在于通過微生物分離培養(yǎng) 、鑒定 ， 了解貓外耳道微生物種類 ， 并對其進(jìn)行體外 藥敏試驗(yàn) ， 為臨床治療貓耳部疾病提供用藥參考 ，減少 用藥 的盲 目性 。1 材料和方法 1 ． 1 材料 2 0 1 4年 9月在南寧市某寵物診所 內(nèi)， 對 因耳

6、部不適前來就診的寵物貓 ， 用一次性滅菌棉拭子采 集其外耳道分泌物。1 ． 2 主要試 劑 普通培養(yǎng)基 、 T S T培養(yǎng)基 、 M H A培養(yǎng)基 ， 購 自北京陸橋技術(shù)有 限公司 ； 革蘭氏染液 、 微量生化反 應(yīng)管和抗生素藥敏紙片購 自杭州天和微生物試劑 有限公司 ， 按說明書要求配制使用。1 ． 3 細(xì)菌分離和形態(tài)學(xué)觀察 用接種環(huán)無菌取采集到的貓外耳道分泌物 ， 分 別劃線接種于普通 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上 ， 置于 3 7 ％恒溫培養(yǎng)

7、 箱 中培養(yǎng) 1 8 h一 2 4 h ， 觀察菌 落的形態(tài) 。挑取優(yōu)勢生長 的菌落進(jìn)行純 培養(yǎng) ， 挑單個(gè) 菌落涂 片 、 革蘭 氏染色 、 鏡檢 。1 ． 4 生化 試驗(yàn) 分離培養(yǎng)并純化后得到的 4種球菌和 9種桿 菌 ， 逐一對其進(jìn)行生化試驗(yàn)。參照《 伯杰細(xì)菌鑒定 手冊》的操作方法 。將 分離菌純培養(yǎng) 物分別 接 種于山梨醇 、 乳糖 、 麥芽糖 、 蔗糖 、 棉籽糖等生化反 應(yīng)管， 置于 3 7 ℃恒溫培養(yǎng)箱中 ， 培養(yǎng) 2 4

8、 h～ 4 8 h觀 察生化反應(yīng)結(jié)果 ， 并參照《 伯杰細(xì)菌鑒定手冊》 進(jìn) 行結(jié)果判定。1 ． 5 體外藥敏試驗(yàn) 根據(jù)培養(yǎng)得到菌落的形態(tài) 、 顏色 、 光澤度 ， 以及 染色情況 ， 分離得到若干種細(xì)菌。剔除貓耳部正常 微生物菌落 ， 對分離到的細(xì)菌進(jìn)行體外藥敏試驗(yàn)。無菌從培養(yǎng)基上挑取細(xì)菌菌落 ， 配制成 0 ． 5麥 氏比濁( 1 ． 5 x 1 0c f u ／ m L ) 的細(xì)菌液 ， 用無菌棉簽將 細(xì)菌液涂布在 M H A培養(yǎng)基

9、平板上 ， 待干后將 1 6種抗生素藥敏紙片緊貼表面， 置 3 7 c c 恒溫箱培養(yǎng) ，1 8 h 后測量抑菌圈大小 J 。藥敏試驗(yàn)判定標(biāo)準(zhǔn) ： 抑 菌圈直徑≥2 0 r a m， 為高度敏感； 1 5 m m≤抑菌 圈直 徑≥1 9 r a m， 為中度敏感 ； 抑菌圈直徑 < 1 5 m m， 為耐 藥 。2結(jié) 果 2 ． 1 細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果 本試驗(yàn)共接種 2 3份樣 品， 在普通培養(yǎng)基上生 長出灰乳 白色至灰黃色、 直徑在