農(nóng)藥高分辨質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫的建立及應(yīng)用研究.pdf

1、通過對大量采集數(shù)據(jù)進行有效分析，從而實現(xiàn)對有害化學(xué)物質(zhì)的篩查與識別，一直是食品安全與檢測領(lǐng)域所面臨的挑戰(zhàn)。本論文利用高效液相色譜-高分辨四級桿飛行時間質(zhì)譜（HPLC-QTOF-MS）建立了多種農(nóng)藥的精確質(zhì)量數(shù)數(shù)據(jù)庫和全掃描碰撞能量誘導(dǎo)裂解（CID）碎片離子高分辨參考質(zhì)譜圖數(shù)據(jù)庫，并以此為基礎(chǔ)建立了果蔬樣品中農(nóng)藥化合物快速識別和多信息點予以確證的多殘留快速篩查技術(shù)。
　　通過選用兩種高分辨飛行時間質(zhì)譜及數(shù)據(jù)庫管理軟件，利用農(nóng)藥標準品

2、參考物分別建立了包括427種農(nóng)藥化學(xué)品的ESI+模式MS1精確質(zhì)量數(shù)數(shù)據(jù)庫和全掃描CID-MS2碎片離子高分辨譜圖庫，同時對影響數(shù)據(jù)庫應(yīng)用的精確質(zhì)量數(shù)準確度、色譜保留時間和碰撞能量等因素進行了分析，為非靶向農(nóng)藥殘留物篩查奠定了方法基礎(chǔ)，并利用不同質(zhì)譜工作模式，建立了兩種不以農(nóng)藥標準品為參考，而基于精確質(zhì)量數(shù)數(shù)據(jù)庫和全掃描碎片離子參考譜圖庫的果蔬樣品中多農(nóng)殘快速篩查方法。
　　方法一利用HPLC-QTOF-MS建立了基于MS1識別和

3、MS2確證相結(jié)合的快速篩查方法。該方法中，每個樣品需進行兩次數(shù)據(jù)采集：首先利用HPLC-QTOF-MS的全質(zhì)量數(shù)掃描模式，對樣品中可能存在的農(nóng)藥殘留進行一級精確質(zhì)荷比掃描，并將采集數(shù)據(jù)與建立的MS1精確質(zhì)量數(shù)數(shù)據(jù)庫進行比較，找出疑似陽性結(jié)果；然后利用HPLC-QTOF-MS的目標二級掃描模式對疑似陽性結(jié)果進行CID碎片離子高分辨質(zhì)譜掃描，與已建立的碎片離子高分辨參考譜圖庫進行比對，實現(xiàn)對結(jié)果的準確確證。本方法結(jié)合傳統(tǒng)的SPE樣品制備技術(shù)

4、，以黃瓜和橙子兩種實際樣品為代表，通過優(yōu)化檢索參數(shù)，對其中317種農(nóng)藥進行了篩查方法驗證，結(jié)果表明，其中266種農(nóng)藥（占83.9％）的篩查限SDLs≤10μg/kg，且在50μg/kg的添加水平下，假陰性率僅為4.7%，同時各農(nóng)藥的確證識別限（LOIs）≤10μg/kg的占77.6%，LOI s≤50μg/kg的占83.9%，滿足日常農(nóng)藥殘留檢測的要求。
　　方法二利用 UHPLC-TripleTOFTM-MS基于人工智能碎片離子

5、掃描方式，建立了僅需一次進樣即可實現(xiàn)多種農(nóng)藥殘留化合物的精確質(zhì)荷比識別和高分辨碎片離子確證的快速篩查方法。方法采用信息關(guān)聯(lián)采集（information dependent acquisition，IDA）模式，通過一次進樣分析，實現(xiàn)全質(zhì)荷比范圍（100-1000）內(nèi)一級高分辨質(zhì)譜采集和全掃描高分辨碎片離子質(zhì)譜數(shù)據(jù)采集，通過與創(chuàng)建的包括1700多張高分辨CID質(zhì)譜圖的數(shù)據(jù)庫比對，實現(xiàn)可不依賴農(nóng)藥標準品參考物的快速篩查，并探討了全掃描一級精

6、確質(zhì)荷比數(shù)據(jù)在目標化合物定量中的適用性。定性篩查方法驗證結(jié)果表明，所有測試樣品，對于數(shù)據(jù)庫包括的427種農(nóng)藥，有93.2%（97.4%）的農(nóng)藥SDLs≤10μg/kg（50μg/kg），且其中84.8%的碎片離子可以通過與創(chuàng)建的參考譜圖數(shù)據(jù)庫進行比對而得以確證。定量方法驗證結(jié)果表明，對于經(jīng)常檢出的106種農(nóng)藥，大部分農(nóng)藥線性范圍為5-500μg/kg，在蘋果，柑橘，番茄和菠菜四種基質(zhì)中，10和100μg/kg兩種添加水平下，回收率在80

7、%-110%范圍內(nèi)的農(nóng)藥分別占88.7%和86.8%，全部添加樣品回收率的相對標準偏差（RSD，n=12）小于20%的農(nóng)藥分別占94.3%（10μg/kg）和98.1%（100μg/kg），表明定量性能良好。
　　經(jīng)實際樣品驗證后，本論文利用已建立的兩種篩查方法，對市售2583個水果蔬菜樣品進行了高通量多農(nóng)藥殘留的篩查，在其中1869個樣品中檢出農(nóng)藥殘留結(jié)果5607個，并對篩查結(jié)果進行了分析。結(jié)果表明，本論文提出的篩查方法成本低廉