微生物技術(shù)分子生物技術(shù)中英文資料外文翻譯--ao法活性污泥中氨氧化菌群落的動(dòng)態(tài)與分布

1、中文 中文 6200 字出處： 出處：Water research, 2011, 45(18): 6207-6216A/O 法活性污泥中氨氧化菌群落的動(dòng)態(tài)與分布摘要：我們研究了在厭氧—好氧序批式反應(yīng)器（SBR）中氨氧化菌群落（AOB）和亞硝酸鹽氧化菌群落（NOB）的結(jié)構(gòu)活性和分布。在研究過程中，分子生物技術(shù)和微型技術(shù)被用于識(shí)別和鑒定這些微生物。污泥微粒中的氨氧化菌群落結(jié)構(gòu)大體上與初始的接種污泥中的結(jié)構(gòu)不同。與顆粒形成一起，由于過程條件中

2、生物選擇的壓力，AOB 的多樣性下降了。DGGE 測(cè)序表明，亞硝化菌依然存在，這是因?yàn)樗鼈兡苎杆俚倪m應(yīng)固定以對(duì)抗洗滌行為。DGGE 更進(jìn)一步的分析揭露了較大的微粒對(duì)更多的 AOB 種類在反應(yīng)器中的生存有好處。在 SBR 反應(yīng)器中有很多大小不一的微粒共存，顆粒的直徑影響這 AOB 和 NOB 的分布。中小微粒（直徑0.9mm）可以使含氧量降低從而限制 NOB 的生長(zhǎng)。所有這些研究提供了未來對(duì) AOB 微粒系統(tǒng)機(jī)制可能性研究的支持。關(guān)鍵詞：

3、氨氧化菌（AOB） ，污泥微粒，菌落發(fā)展，微粒大小，硝化菌分布，發(fā)育多樣性1. 簡(jiǎn)介在濃度足夠高的條件下，氨在水環(huán)境中對(duì)水生生物有毒，并且對(duì)富營(yíng)養(yǎng)化有貢獻(xiàn)。因此，廢水中氨的生物降解和去除是廢水處理工程的基本功能。硝化反應(yīng)，將氨通過硝化轉(zhuǎn)化為硝酸鹽，是去除氨的一個(gè)重要途徑。這是分兩步組成的，由氨氧化和亞硝酸鹽氧化細(xì)菌完成。好氧氨氧化一般是第一步，硝化反應(yīng)的限制步驟：然而，這是廢水中氨去除的本質(zhì)。對(duì) 16S rRNA 的對(duì)比分析顯示，大多

4、數(shù)活性污泥里的氨氧化菌系統(tǒng)的跟 ß-變形菌有關(guān)聯(lián)。然而，一系列的研究表明，在氨氧化菌的不同代和不同系有生理和生態(tài)區(qū)別，而且環(huán)境因素例如處理常量，溶解氧，鹽度，pH，自由氨例子濃度會(huì)影響氨氧化菌的種類。因此，廢水處理中氨氧化菌的生理活動(dòng)和平衡對(duì)廢水處理系統(tǒng)的設(shè)計(jì)和運(yùn)行是至分析方法-TOC、TN、TP、MLSS、SVI 都根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方法定期檢測(cè)。污泥大小分布由篩法決定。4 個(gè)干凈的直徑為 5cm 鋼制篩，篩孔直徑分別0.9,0.6,

5、0.45,和 0.2mm，這 4 個(gè)篩子被全程監(jiān)控。用友刻度的圓柱從反應(yīng)器中取100mL 的污泥，然后放到 0.9mm 篩孔的篩子上。隨后用蒸餾水沖洗，直徑小于0.9mm 的顆粒通過這個(gè)篩子，到達(dá)篩孔更小的篩子上。沖洗過程要重復(fù)幾次，以分開污泥團(tuán)。不同面上收集到的顆?；謴?fù)用蒸餾水反沖洗。每一部分都手機(jī)在不同的燒杯里，然后用量化的濾紙過濾來測(cè)定 TSS。一旦留在各個(gè)篩子上 TSS的數(shù)量確定了，就可以確定不同大小的顆粒占污泥總重的比例了。2

6、.2 DNA 提取和 PCR-DGGE來自大約 8mg 的 MLSS 種的污泥被轉(zhuǎn)化成 1.5mL 的 Eppendorf 管，然后在14000g 條件下離心 10 分鐘。移除上清液，向其中加入 1mL 磷酸鈉緩沖液，然后在無菌條件下研磨以分離顆粒。使用 E.Z.N.A.Soil DNA 工具，離心物種 DNA 染色體被分離。為了放大氨氧化菌特征 16s rRNA 來進(jìn)行 DGGE，一個(gè)巢式 PCR 被用為先前描述。30µl

7、的巢式 PCR 放大劑被加載并被在聚丙烯酰胺凝膠上的加了線性分布為 35%-55%的變性劑 DGGE 分開。這個(gè)膠體在維持 60 度、140V、1×TAE 緩沖液中(通用突變檢測(cè)系統(tǒng))運(yùn)行 6.5h。電泳結(jié)束后，銀染色和膠體的發(fā)展表現(xiàn)正如Sanguinetti 所表述。接下來是空氣干燥和用凝膠成像分析系統(tǒng)掃描。凝膠掃描圖像用 Quantity One 分析，版本號(hào) 4.31。成對(duì)群落相似性的色子指數(shù)是計(jì)算評(píng)估氨氧化菌群落在 D

8、GGE 中線路相似性的。這個(gè)用 Quantity One 測(cè)出的指數(shù)范圍從 0%(無共同頻帶)到 100%(頻帶相同)。Shannon 多樣性指數(shù)（H）是用來衡量將一個(gè)菌群中每個(gè)菌種的豐富度和比例加入考慮的微生物多樣性。H 用下列等式計(jì)算：其中，ni/N 表示 i 菌種占總?cè)郝涞谋壤?i 條帶亮度在條帶總亮度中的比例)。微生物系統(tǒng)樹圖模板相似性使用 Quantity One 不用非加權(quán)配對(duì)組算術(shù)平均數(shù)（UPGMA 法）算法就能計(jì)算出來。