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1、水芹是一種具有特殊風(fēng)味的藥食同源蔬菜,具有清熱解毒、降壓降糖等功能。研究發(fā)現(xiàn)水芹中功效成分是多酚物質(zhì)。本課題研究水芹多酚的提取、組分、抗氧化性和對(duì)糖尿病的特異抑制活性,最后開(kāi)發(fā)水芹多酚產(chǎn)品,重點(diǎn)在能使其功效放大化的多酚微膠囊,以期為水芹的功能研究和深加工提供理論依據(jù)。
(1)超聲輔助優(yōu)化水芹多酚和黃酮提取工藝:本實(shí)驗(yàn)在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,通過(guò)響應(yīng)面法優(yōu)化超聲波輔助提取水芹多酚與黃酮工藝。所建響應(yīng)面分析模型與實(shí)際情況擬合較好,得
2、出水芹葉片多酚的最佳提取條件為料液比為1∶31(g/mL)、超聲時(shí)間為51 min、提取溫度為62℃、乙醇體積分?jǐn)?shù)為80%,在此條件下,水芹葉片多酚提取量為0.961 g/100gFW,水芹莖稈多酚提取量為0.242 g/100g FW。水芹葉片黃酮的最佳提取條件為料液比為1∶38(g/mL)、超聲時(shí)間為62 min、提取溫度為69℃、乙醇體積分?jǐn)?shù)為80%,在此條件下,水芹葉片黃酮提取量為0.820 g/100g FW,水芹莖稈黃酮提取
3、量為0.098 g/100g FW。
(2) HPLC-MS/MS法水芹多酚成分分析:本實(shí)驗(yàn)通過(guò)超聲波輔助法提取鮮樣、鼓風(fēng)干燥、真空干燥、冷凍干燥水芹莖桿和葉片中的多酚物質(zhì),并采用HPLC-MS/MS分離分析,該方法成功檢測(cè)出經(jīng)過(guò)不同方式干燥的水芹中金絲桃苷、異鼠李素、阿魏酸、山奈酚、香芹酚、咖啡酸、槲皮素、芹菜素、蘆丁、木犀草素、沒(méi)食子酸的含量,發(fā)現(xiàn)這11種多酚活性成分的含量在不同樣品中存在差異。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明真空干燥和鼓風(fēng)干
4、燥會(huì)不同程度的破壞水芹中的多酚類(lèi)物質(zhì),冷凍干燥對(duì)水芹中多酚類(lèi)物質(zhì)破壞最小,說(shuō)明鮮樣水芹更適合冷凍干燥的干燥加工方式,而HPLC-MS/MS方法可為水芹的質(zhì)量控制提供可靠的分析手段。
(3)水芹多酚抗氧化活性研究:本實(shí)驗(yàn)測(cè)定鮮樣和不同方式干燥水芹的多酚提取物對(duì)DPPH自由基、羥自由基和超氧陰離子O2-·的清除能力,及其還原力和總抗氧化能力,四種水芹提取物對(duì)各自由基清除能力大小為鮮樣水芹>冷凍干燥水芹>真空干燥水芹>鼓風(fēng)干燥水芹。
5、最后將新鮮和不同方式干燥后水芹多酚提取物中11種活性成分分布及含量規(guī)律和其抗氧化特性結(jié)合,運(yùn)用主成分分析法分析其主效成分,結(jié)果說(shuō)明水芹多酚提取物的抗氧化能力與芹菜素、沒(méi)食子酸、金絲桃苷、槲皮素、蘆丁和咖啡酸這幾種成分密切相關(guān)。
(4)水芹多酚對(duì)糖尿病關(guān)鍵酶的抑制作用研究:本實(shí)驗(yàn)直接從新鮮水芹提取多酚物質(zhì),考察了其對(duì)糖尿病關(guān)鍵酶的體外抑制作用。結(jié)果顯示新鮮水芹多酚提取物對(duì)α-淀粉酶、葡萄糖苷酶和蔗糖酶的半數(shù)抑制濃度大小分別為1.
6、000、3.024和7.910 mg/mL,說(shuō)明水芹多酚提取物對(duì)三種酶都有一定的抑制作用。然后分別考察槲皮素、木犀草素和山奈酚這三種單體化合物對(duì)糖尿病關(guān)鍵酶的抑制作用,結(jié)果說(shuō)明槲皮素和木犀草素對(duì)α-淀粉酶有較好的抑制效果,抑制率最高達(dá)到80.34%,山奈酚對(duì)葡萄糖苷酶有很好的抑制效果,抑制率達(dá)到82.27%,三種單體化合物對(duì)蔗糖酶均有一定的抑制作用,但抑制率都低于50%。
(5)水芹多酚微膠囊的制備:本實(shí)驗(yàn)主要研究了水芹多酚微
7、膠囊的制備工藝,通過(guò)正交試驗(yàn),得到水芹多酚微膠囊的最佳壁材配方∶芯壁比為1∶6,β-環(huán)糊精和CMC的比例為1∶4,單甘酯的用量為8%。穩(wěn)定性測(cè)試表明制備出的水芹多酚微膠囊具有一定的抗還原能力和抗氧化能力。體外釋放實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)水芹多酚微膠囊在人造胃液中100 min后釋放率達(dá)到最大;而在人造腸液中60 min后釋放率達(dá)到最大。在環(huán)境掃描電子顯微鏡下觀察到,水芹多酚微膠囊大部分保持良好狀態(tài),保證了其穩(wěn)定性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明該配方與工藝簡(jiǎn)單實(shí)用,可作
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