心衰大鼠下丘腦kv2.1表達(dá)與adh分泌的關(guān)系

1、中山大學(xué)碩士學(xué)位論文心衰大鼠下丘腦Kv2.1表達(dá)與ADH分泌的關(guān)系姓名：朱鶯鶯申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師：高修仁20100604中山大學(xué)碩士學(xué)位論文 心衰大鼠下丘腦K v 2 ．1 表達(dá)與A D H 分泌的關(guān)系腦、小腦和海馬中含量較多1 9 1 ，而在下丘腦中的表達(dá)與功能尚未見有報道。本課題研究下丘腦K v 2 ．1 的表達(dá)以及對A D H 分泌的影響，為心衰晚期稀釋性低鈉血癥的糾正提供分子生物學(xué)機(jī)制，期望為心衰治療探索新途

2、徑。目的1 ． 探討K V 2 ．1 在下丘腦的分布及與A D H 分泌陽性細(xì)胞的定位關(guān)系2 ． 探討心力衰竭大鼠下丘腦K v 2 ．1 的表達(dá)與A D H 分泌的變化3 ． 探討鉀通道阻滯劑對下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞A D H 表達(dá)的影響方法健康雄性S D 大鼠( 2 0 0 - 2 5 0 g ) 4 0 只隨機(jī)分成2 組，假手術(shù)組( G r o u p S H ，n = 1 0 ) 和心肌梗死心衰組( G r o u p M I - H

3、F ，n = 3 0 ) 。G r o u p M I —H F 大鼠左側(cè)開胸術(shù)，絲線結(jié)扎左前降支近端，心電圖確認(rèn)心肌梗死后，S P F 環(huán)境中喂養(yǎng)。8 周后，以心肌梗死面積> 3 0 ％、超聲心動圖心功能、血流動力學(xué)等指標(biāo)，篩選心力衰竭模型。G r o u p S H 大鼠相應(yīng)部位穿線不結(jié)扎，相同條件喂養(yǎng)。實驗結(jié)束處死動物，取其下丘腦組織，用R e a l T i m e ．P C R 測定下丘腦K v 2 ．1m R N A

4、水平，用W B 測定K v 2 ．1 的蛋白水平；免疫熒光檢測下丘腦K v 2 ．1 和A D H 的表達(dá)及分布；用放射免疫的方法測定血清中A D H 的含量，生化檢測血電解質(zhì)。在細(xì)胞水平上，培養(yǎng)S D 乳鼠下丘腦神經(jīng)元，并用K v 2 ．1 拮抗劑s t r o m a t o x i o n 干預(yù)培養(yǎng)，W B 測定干預(yù)后A D H 的蛋白水平。各實驗數(shù)據(jù)為實驗重復(fù)3 次的平均值，以均數(shù)4 - 標(biāo)準(zhǔn)差表示。用S P S S1 3 ．0

5、 統(tǒng)計軟件，以兩組比較的t - t e s t 分析組內(nèi)的差異，兩組數(shù)據(jù)間的相關(guān)性采用P e a r s o n 相關(guān)分析。結(jié)果1 ． G r o u pM I ．H F 血清A D H 濃度高于G r o u pS H ( 腳．0 5 ) ，并且A D H 與心臟射血分?jǐn)?shù)呈負(fù)相關(guān)。2 ． 免疫熒光提示，G r o u pM I —H F 與G r o u p S H 下丘腦均存在K v 2 ．1 的廣泛表達(dá)，A D H 在視上核( S