不同低溫刺激下大氣pm2.5對(duì)大鼠呼吸系統(tǒng)的影響及機(jī)制研究

1、 分類號(hào)： 分類號(hào)： 密級(jí)：公開 密級(jí)：公開 研 究 生 學(xué) 位 論 文 論文題目（中文） 論文題目（中文） 不同低溫刺激下大氣 不同低溫刺激下大氣 PM2.5 對(duì)大鼠 對(duì)大鼠 呼吸系統(tǒng) 呼吸系統(tǒng)的影響 影響及機(jī)制 及機(jī)制研究 研究 論文題目（外文） 論文題目（外文） Study on the Effect of Ambient PM2

2、.5 on Respiratory System under Different Cold Stresses and the Related Mechanism in Rats 研 究 生 姓 名 究 生 姓 名 晚亞雄 晚亞雄 學(xué) 科 、 專 業(yè) 學(xué) 科 、 專 業(yè) 公共衛(wèi)生與預(yù)防醫(yī)學(xué) 公共衛(wèi)生與預(yù)防醫(yī)學(xué)· 勞動(dòng)衛(wèi)生與環(huán)境衛(wèi)生學(xué) 勞動(dòng)衛(wèi)生與環(huán)境衛(wèi)生學(xué) 研 究 方 向 研 究 方 向 環(huán)境 環(huán)境毒理學(xué) 毒理學(xué) 學(xué) 位 級(jí)

3、 別 學(xué) 位 級(jí) 別 碩士 碩士 導(dǎo) 師 姓 名 、 職 稱 導(dǎo) 師 姓 名 、 職 稱 牛靜萍 牛靜萍 教授 教授 羅 斌 副教授 副教授 論文工作起止年月 論文工作起止年月 2014 年 9 月至 月至 2016 年 5 月 論 文 提 交 日 期 論 文 提 交 日 期 2016 年 5 月 論 文 答 辯 日 期 論 文 答 辯 日 期 2016 年 5 月 學(xué) 位 授 予 日 期 學(xué) 位 授 予 日 期 20

4、16 年 6 月 校址：甘肅省蘭州市 校址：甘肅省蘭州市I 不同低溫刺激下大氣 不同低溫刺激下大氣 PM2.5 對(duì)大鼠呼吸系統(tǒng) 對(duì)大鼠呼吸系統(tǒng)的影響 影響 及機(jī)制 及機(jī)制研究 研究 中文摘要 中文摘要 目的 目的 研究發(fā)現(xiàn)大氣顆粒物和低溫刺激對(duì)呼吸系統(tǒng)疾病入院率和死亡率具有不利影響， 并存在一定交互作用。 本研究擬通過觀察不同低溫刺激下大氣細(xì)顆粒物（PM2.5）所致炎性作用和氧化應(yīng)激等指標(biāo)來探討二者對(duì)呼吸系統(tǒng)影響的交互作用及作用機(jī)制。

5、方法 方法 1. 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：將 48 只健康雄性 Wistar 大鼠按體重隨機(jī)分成 6 組，每組 8只， 分別給予 0℃、 10℃及 20℃ （常溫對(duì)照） 的單純低溫刺激及低溫+PM2.5 暴露。低溫+PM2.5 暴露組給予低溫刺激及氣管滴注 PM2.5 懸液（每次 8mg/0.25ml） ，單純低溫刺激組給予無菌生理鹽水（每次 0.25ml/只） ，間隔 48 h，連續(xù) 3 次。末次染毒 48 h 后處死大鼠。 2. 體外實(shí)驗(yàn)：肺泡

6、巨噬細(xì)胞（AMs）原代培養(yǎng)技術(shù)分離和培養(yǎng) AMs，分成18℃（強(qiáng)低溫） 、24℃（中低溫） 、30℃（弱低溫） 、37℃（常溫）四個(gè)溫度組，每個(gè)溫度組又分為高劑量 （100μg/ml） 組、 中劑量 （50μg/ml） 組、 低劑量 （25μg/ml）組、空白對(duì)照組（0μg/ml）四個(gè)處理組培養(yǎng)。觀察倒置顯微鏡下 AMs 變化，四甲基偶氮唑鹽（MTT）法測(cè)定相對(duì)存活率，中性紅法測(cè)定吞噬功能。

7、3. 指標(biāo)測(cè)定： 細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)支氣管肺泡灌洗液 （BALF） 中炎性細(xì)胞數(shù)目，采用酶聯(lián)免疫法 （ELISA） 測(cè)定分析腫瘤壞死因子-α （TNF-α） 、 白介素-6 （IL-6） 、白介素-8（IL-8） 、C 反應(yīng)蛋白（CRP）、巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1α（MIP-1α） 、巨噬細(xì)胞清道夫受體 1（MSR1）以及中性粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子（GM-CSF）水平，試劑盒法測(cè)定超氧化物歧化酶（SOD） 、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-P

8、x）及丙二醛（MDA） 。 結(jié)果 結(jié)果 1. 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 各 PM2.5 暴露組 BALF 中觀察到顯著增高的總細(xì)胞和中性粒細(xì)胞 （P<0.05） ， 且各炎性因子水平均顯著高于相應(yīng)單純低溫刺激組 （P<0.05） 。各 PM2.5 暴露組中 SOD、GSH-Px 及 MDA 水平與相應(yīng)單純低溫刺激組相比呈現(xiàn)明顯不同（P<0.05） 。肺組織 IL-6 及 CRP 水平、血漿中 IL-6、IL-8 及 CRP 水