hsv1病毒蛋白icp34.5羧基端結(jié)構(gòu)與功能的研究

1、1 8 2 8 8 0 3南開大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解南開大學(xué)關(guān)于收集、保存、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意如下各項內(nèi)容：按照學(xué)校要求提交學(xué)位論文的印刷本和電子版本；學(xué)校有權(quán)保存學(xué)位論文的印刷本和電子版，并采用影印、縮印、掃描、數(shù)字化或其它手段保存論文；學(xué)校有權(quán)提供目錄檢索以及提供本學(xué)位論文全文或者部分的閱覽服務(wù)；學(xué)校有權(quán)按有關(guān)規(guī)定向國家有關(guān)部門或者機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版；在不以贏利為目的的前提下，學(xué)?？梢赃m當(dāng)復(fù)制論文的部

2、分或全部內(nèi)容用于學(xué)術(shù)活動。學(xué)位敝儲繇值約 砒年鄉(xiāng)月巧日經(jīng)指導(dǎo)教師同意，本學(xué)位論文屬于保密，在∥年解密后適用＼本授權(quán)書。指導(dǎo)教師簽名： 協(xié)位學(xué)位論文作者簽名： 廈鈞解密時間： 夠侈年鄉(xiāng)月吻日各密級的最長保密年限及書寫格式規(guī)定如下：摘要摘要I 型單純皰疹病毒( H e r p e sS i m p l e x V i r u s T y p e I ，H S V - 1 ) 是一種國在人群中感染率極高的D N A 病毒。初次感染后，H S

3、V - 1 通常會在人體神經(jīng)細(xì)胞中潛伏。病毒會在一些條件下反復(fù)發(fā)作，嚴(yán)重的會導(dǎo)致死亡率極高的病毒性腦炎或者其它病毒如H W - 1 的超感染。H S V - 1 干擾宿主后會激活先天性免疫，其中包括I型干擾素的產(chǎn)生。干擾素會及激活許多重要的干擾素激活基因的表達(dá)，其中包括一個重要的抗病毒蛋白一雙鏈R N A 依賴的蛋白質(zhì)激酶( P K R ) 。同時H S V - 1病毒復(fù)制過程中會產(chǎn)生病毒d s R N A ，并進(jìn)一步激活P K R 。

4、被激活的P K R 能夠一個重要的蛋白翻譯起始調(diào)節(jié)因子e l f 一2 0 【磷酸化進(jìn)而終止包括病毒蛋白翻譯起始在內(nèi)的所有蛋白翻譯起始。H S V 一1 的7 1 3 4 ．5 基因編碼一個重要的病毒因子_ I C P 3 4 ．5 。I C P 3 4 ．5 對于病毒的致病性以及通過抵御干擾素誘導(dǎo)的宿主抗病毒應(yīng)答非常重要。H S V 一1 ( F 毒株)的I C P 3 4 ．5 通過與宿主的蛋白磷酸酶1 ( P P l ) 結(jié)合，介

5、導(dǎo)e I F 一2 a 的去磷酸化，使蛋白合成繼續(xù)進(jìn)行，因而逆轉(zhuǎn)P K R 的作用和宿主抗病毒功能。I C P 3 4 ．5 結(jié)構(gòu)上分為三個區(qū)域。N 端1 6 0 個氨基酸負(fù)責(zé)病毒從細(xì)胞核中釋放成熟以及抵御宿主抗病毒的自噬( a u t o p h a g y ) ，然后是由1 0 個三聯(lián)氨基酸( A l a —T h r —P r o ) 重復(fù)構(gòu)成的區(qū)域影響病毒的神經(jīng)侵染能力，最后是由7 3 個氨基酸構(gòu)成的羧基端。其中羧基端對于I C

6、 P 3 4 ．5 介導(dǎo)的e I F ～2 c c 脫磷酸化非常重要。該區(qū)域首先包括一個經(jīng)典的P P l 結(jié)合模序( 1 9 3 —1 9 5 位氨基酸) 位于該區(qū)域的，并且該模序?qū)τ贗 C P 3 4 ．5脫磷酸化功能必不可少。除此之外有一個假想的效應(yīng)區(qū)域( 2 4 8 —2 6 3 位氨基酸)在I C P 3 4 ．5 的脫磷酸化過程中的作用并不清楚。我們的研究發(fā)現(xiàn)，在I C P 3 4 ．5 羧基端的效應(yīng)區(qū)有一個精氨酸富集的區(qū)域，

7、其中的2 4 9 、2 5 1 以及2 5 5 位點的精氨酸位點高度保守。將2 5 5 位點精氨酸突變?yōu)楸彼?、天冬氨酸或者賴氨酸對I C P 3 4 ．5 的功能沒有太大影響，但將2 4 9 、2 5 1與2 5 5 位的精氨酸突變?yōu)楸彼峄蛘邘喾措姾傻陌被釙r，I C P 3 4 ．5 的脫磷酸化能力大大減弱。同時這種效應(yīng)與減弱的H S V - 1 感染后的細(xì)胞內(nèi)e I F 一2 a 的磷酸化水平、降低的病毒蛋白合成以及病毒蛋白復(fù)