1.livin反義脫氧核苷酸抗癌作用相關(guān)研究2.dcqa食蟹猴長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)及伴隨毒代動(dòng)力學(xué)研究

1、中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院博士學(xué)位論文1.livin反義脫氧核苷酸抗癌作用相關(guān)研究 2.DCQA食蟹猴長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)及伴隨毒代動(dòng)力學(xué)研究姓名：張華東申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：藥理學(xué)指導(dǎo)教師：陳惠鵬;袁守軍20050601博士學(xué)位論文( 一) ：I j v i n 反義脫氧桉苷酸的抗癌作用相關(guān)研究A B S T R A C TA na n t i —c a n c e rs t u d yo fa n t i s e n s e o l i

2、 g o n u c l e o t i d e s t a r g e t i n g t o跏覷m R N AZ H A N GH u a —D o n g ，Y U A NS h o u —J u n ，C H E NH ui —P e n g0 D e p 8 f t l n e n t o fp h a f I n a c o i o g y ．i n s t i t u t eo ff a d i a t i o nm e

3、d i c i n e ．a(chǎn) c a d e m yo fm i l i t a r ym e d i c a l s c i e n c e s 。B e i j i n gi 0 8 8 5 0 ．c h i n 由A n o v e lm e m b e r o f h u m a nI A P s ，d e s i 髓a t e d l i v i n ，w 粥d i s c o V e r e dr e c e n t l y

4、 ．I t ss e c o n d a r ys t r u c t u r ew a sc o m p u t e dw i t hR N A d r a wa n dS f 0 1 da n d2 0a n t i s e n s e0 1i g o n u c l e o t i d e s ( 2 0 n t ) t a r g e t i n gd i f f e r e n tr e g i o n s o f l i v

5、 i nm R N A w e r ed e s i g n e d ， w h i c h w e r e s y n t h e s i z e d a s p h o s p h o r o t h i o a t e d e r i V a t i V e s ． T h ea c t i v i t yo fa n t i s e n s e0 1 i g o n u c l e o t i d e st oi n d u c

6、 ea p o p t o s i si nS K —M E L lw a sm e a s u r e du s i n gM T T ．T h e r e s u l t s s h o wt h a t t h eo li g o n u c l e o t id eN o ．5c o u l de f f e c t i v e l y i n h i b i t c e l l v i 曲i l i t y b y 5 2 ．

7、6 ％． A f t e r t r a n s f e c t i o n o f0 1 i g o n u c l e o t i d eN o ．5 ，m i c r o t u b u l e so f H e l ac e l l s1 】r i t h i 咖n o f l u o r e s c e n c es t a i n i n g a n d n u c l e u s s p e c j f i c a l l

8、 y s t a i n e d w i t h H o e c h e s c 3 3 2 5 8 w e r ep h o t o g r a p h e du n d e r1 a s e rc o f o c a lm i c r o s c o p e ．T h e s ei m a g e ss h o w e dt h a tt h ec e l l sh a dm o r p h o l o g i c a l c h

9、a n g e s ，c e l lr o u n d i n g u pa n dc e 兒s h r i n k a g e ．I Lw a s o b s e r v e d a l s o s t r u c t u r a l a l t e r n a t i o n j n c y t o s k e l e t o n i n c l u d i n gd i s o r d e ra r r a n g e m e n

10、 to fm i c r o t u b u l e s ，d i s r u p t i o no fm i c r o t u b u l e s ，n u c l e a rc o n d e n s a t i o n ．f o r m a t i o n o fm u l t i n u c l e a t e dc e l l s a n d a b e r r a n tm i t o s i s ．H e l ac e

11、】1 s w e r et r a n s f e c t e dw i t ho n g o n u c l e o t i d eN o ．5a t c o n c e n t r a t j o no f 】0 0a n d2 0 0n m 0 1 ·L ，t h e i rf 『l i t o c h o n d r i a l m e m b r a n ep o t e n t i a lr e d u c e d

12、b y6 ．4 7 ％a n d2 4 ．6 3 ％r e s p e c t i v e l ya n dc a s p a s e 3a c t i v i t yh a da n i n c r e a s e ．T h e1 e V e lo f l i v i n m R N A o f H e l a t r a n s f e c t e d w i t h 0 1i g u n u c l e o t i d e N o

13、 ．5 r e d u c e ds i g n i f i c a n t l y u s i n g s e m i —q u a n t i t a t i V e F ’C R ．T h ee x p r e s s i o no ft h eg e n e i nM C F ，H e l a ，R a j i ，S K —M E L l ，n o t i nB 1 6a n dH E L Fc e l l sw e r e i