多殺菌素（Spinosads）產(chǎn)生菌Saccharopolyspora spinosa產(chǎn)素能力的提高及發(fā)酵工藝的初步研究.pdf

1、多殺菌素(Spinosads)是由放線菌刺糖多孢菌(Saccharopolyspora spinosa)發(fā)酵產(chǎn)生的,兼具生物農(nóng)藥的安全性和化學(xué)合成農(nóng)藥的快速效果的新型殺蟲劑.國內(nèi)市場已有國外產(chǎn)品銷售,國內(nèi)對該產(chǎn)品的開發(fā)仍處于初始階段.該研究試圖分離多殺菌素高產(chǎn)菌株,為此進(jìn)行了菌株誘變和發(fā)酵工藝探索.首先,作者比較了9種固體培養(yǎng)基上多殺菌素產(chǎn)生菌的生長狀況,并根據(jù)比較結(jié)果最后選定固體培養(yǎng)基M作為Spinosads生產(chǎn)菌株的產(chǎn)孢培養(yǎng)基.然后

2、,作者采用TLC定性和HPLC定量相結(jié)合的方法,建立了搖瓶發(fā)酵和自動(dòng)罐發(fā)酵過程中樣品Spinosads含量的檢測方法.進(jìn)一步,作者通過正交實(shí)驗(yàn),優(yōu)化了發(fā)酵培養(yǎng)基配方.該培養(yǎng)基各組分的最佳配比為:葡萄糖4.0g,淀粉2.0g,精氨酸0.2g,黃豆粉2.5g,玉米漿3.0g,酵母浸出粉0.5g,CaCO<,3>0.3g.定容100ml,PH7.0.為了獲得多殺菌素高產(chǎn)菌種,作者采用離子束結(jié)合亞硝基胍交替誘變的方法,對Spinosads產(chǎn)生菌

3、進(jìn)行誘變篩選.在離子束最佳誘變劑量為5×10<'14> N<'+>/cm<'2>的條件下,最終得到誘變株XS-3-285.該菌株的Spinosads的產(chǎn)量比出發(fā)菌株提高了140﹪.作者采用質(zhì)譜、紅外光譜、核磁共振C<'13>-NMR譜對提取獲得的結(jié)晶進(jìn)行了分析,證明了該結(jié)晶為Spinosads.作者還對XS-3-285在5L自動(dòng)罐中的發(fā)酵工藝進(jìn)行了初步探索.該工藝包括:通過自動(dòng)流加5﹪硫酸的辦法控制pH值,通過增加通氣量和提高攪拌速率控