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文檔簡介
1、生物傳感器檢測環(huán)境污染越來越多使用全細(xì)胞生物傳感器被發(fā)明出來運(yùn)用于環(huán)境污染和毒性的檢測。這些生物傳感器通過啟動(dòng)子在響應(yīng)于相關(guān)的環(huán)境條件下而被融合構(gòu)建的,能夠簡單地監(jiān)測報(bào)告基因。根據(jù)報(bào)告基因的選擇,表達(dá)可通過產(chǎn)生的顏色,光,熒光或電化學(xué)反應(yīng)來進(jìn)行監(jiān)視。在這方面的最新進(jìn)展包括緊湊尺寸的生物傳感器,這些傳感器使線上和在大量的環(huán)境參數(shù)的監(jiān)測上的發(fā)展。介紹生物修復(fù)技術(shù)(即利用植物或微生物來清理環(huán)境中的污染)在近些年來看到了可喜的進(jìn)展。傳統(tǒng)上,生物
2、修復(fù)的效率是有化學(xué)反應(yīng)的效率決定,通過測量總污染物的濃度的變化,通常是由色譜分析結(jié)果實(shí)現(xiàn)的(氣相色譜與氣相色譜質(zhì)譜法)。然而,近來,人們已經(jīng)嘗試使用生物傳感器,特別是微生物全細(xì)胞生物傳感器,去監(jiān)測污染物消除速率。生物傳感器被定義為基于使用生物或生物衍生反應(yīng)的監(jiān)測系統(tǒng)。例如,整個(gè)生物體,如水蚤或小型魚類,正被用于監(jiān)測水質(zhì)的毒性和酶作為氧氣或葡萄糖的生物傳感器。生物傳感器的主要缺點(diǎn)是,因?yàn)樗鼈円蕾囉谏锵到y(tǒng),它們比化學(xué)方法更少可再現(xiàn)所獲得的
3、值通常是相對(duì)的而不是絕對(duì)的。然而,它們可以是相當(dāng)多的時(shí)間,有效和具有成本效益的,并構(gòu)成用于監(jiān)視更改或在線處理的良好工具。生物傳感器的另一個(gè)重要優(yōu)點(diǎn)是,它們僅檢測生物活性污染物,并響應(yīng)正比于毒性的水平。這次審查的重點(diǎn)在于全細(xì)胞上,“人造”的生物傳感器以重組DNA為基礎(chǔ)。這些生物傳感器通過熔接污染物應(yīng)答基因的啟動(dòng)子的基因編碼,可以很容易量化的蛋白質(zhì)構(gòu)成。在一個(gè)這樣的示例中,大腸桿菌K12菌株為了更好的適應(yīng)芳烴的檢測而被改造。在大腸桿菌細(xì)胞中
4、攜帶從惡臭假單胞菌的xylS基因(誘導(dǎo)芳香烴)的啟動(dòng)子融合至啟動(dòng)子的熒光素酶操縱子(來自哈氏弧菌或螢火蟲)。熒光素酶的表達(dá)是通過芳族化合物的存在下誘導(dǎo)的并且可以通過光發(fā)射進(jìn)行測定。類似的生物傳感器的構(gòu)造,可以監(jiān)視附加的環(huán)境污染物,如辛烷水平。最近,新的全細(xì)胞生物傳感器已研制,其中基因的表達(dá)通過電化學(xué)手段進(jìn)行監(jiān)測。這些啟動(dòng)子為基礎(chǔ)的,全細(xì)胞生物傳感器適于在線和污染物的原位監(jiān)測。一個(gè)例子示于圖1,它顯示了一個(gè)重組基因構(gòu)建有效的生物感測重金屬
5、。在此構(gòu)造中,zntA基因的啟動(dòng)子和N末端區(qū)域,參與重金屬外排,融合至啟動(dòng)子的lacZ基因,其編碼β半乳糖苷酶。細(xì)菌通過誘導(dǎo)產(chǎn)生β半乳糖苷酶,可以很容易地通過比色法和電化學(xué)反應(yīng)進(jìn)行監(jiān)測的酶的攜帶到重金屬的存在這種基因融合響應(yīng)。圖省略(復(fù)制不上去)其他的系統(tǒng)已經(jīng)使用細(xì)菌或螢火蟲熒光素酶基因(勒克司或luc的)作為報(bào)告者或基因綠色熒光蛋白(GFP)。生物發(fā)光報(bào)告基因(勒克司)編碼的酶的熒光素酶是一種用于生物傳感器的結(jié)構(gòu)用于監(jiān)測環(huán)境壓力,烴或
6、重金屬主要存在的主要基因。在這種情況下,由感測細(xì)菌所發(fā)射的光成比例的污染物的濃度。這些發(fā)光系統(tǒng)具有信號(hào)分子具有短壽命的優(yōu)點(diǎn)——一次發(fā)射的光不留在對(duì)比中β——半乳糖苷酶或堿性磷酸酶的酶反應(yīng)所產(chǎn)生的顏色。此外,該發(fā)光系統(tǒng)可用于遙感。然而,這些系統(tǒng)具有一些嚴(yán)重的缺點(diǎn)。在實(shí)際方面,用于確定發(fā)光的儀器是大而有在不存在外部光的情況下使用。在生物側(cè)面,發(fā)光系統(tǒng)需要相當(dāng)高的能量源,并且可以在厭氧條件下不發(fā)揮作用。現(xiàn)場和在線檢測生物感測環(huán)境中的污染物的一
7、個(gè)重要方面是在原位和優(yōu)選的在線監(jiān)視的能力。具有生物傳感器,可在現(xiàn)場使用省去了,必須把樣品送到實(shí)驗(yàn)室,并使得污染水平的實(shí)時(shí)評(píng)估。上線和在基因表達(dá)的原位監(jiān)測可通過使用報(bào)告酶的活性可以以電化學(xué)進(jìn)行監(jiān)視來進(jìn)行[8]。電化學(xué)測試是高度敏感,重復(fù)性好,采用緊湊的分析儀和一次性電極。這些系統(tǒng)使多個(gè)樣品的同時(shí)測量。另外,作為測量結(jié)果不光,也能夠進(jìn)行測量的原油或渾濁溶液水系統(tǒng)中,甚至在土壤監(jiān)測污染物時(shí)的重要考慮因素。電化學(xué)系統(tǒng)也被用于在細(xì)菌,酵母和甚至在
8、哺乳動(dòng)物組織培養(yǎng)物的監(jiān)測基因中表達(dá)。隨時(shí)隨地利用生物傳感系統(tǒng)檢測生物傳感器是快速,具成本效益,并注明“相關(guān)的”有毒物質(zhì)的水平。它們的主要缺點(diǎn)是,它們不給絕對(duì)化學(xué)值。此外,因?yàn)樗鼈円蕾囉谏锵到y(tǒng),他們只能表示相對(duì)水平,從來沒有絕對(duì)的水平。對(duì)于主管部門,如環(huán)保局,與法規(guī)目前設(shè)定,無法確定絕對(duì)的濃度是一個(gè)缺點(diǎn)。然而,因?yàn)闆]有方法來確定在實(shí)時(shí)毒物的絕對(duì)濃度,使用生物傳感器的應(yīng)建議至少為在線,實(shí)時(shí)的毒性水平的測定。這么好的在線監(jiān)測系統(tǒng)可以通過絕對(duì)
9、的化學(xué)測定,定期進(jìn)行補(bǔ)充。生物傳感器的另一個(gè)重要優(yōu)點(diǎn)是,它們可以被用來監(jiān)測一般毒性?;瘜W(xué)測量確定唯一的已知的和可能的毒物意想不到毒物的存在將通過標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)測量被錯(cuò)過。這一事實(shí)進(jìn)一步證實(shí)了支持使用組合系統(tǒng)生物監(jiān)測在線以及周期性的化學(xué)測定。生物傳感器的未來發(fā)展方向有開發(fā)生物傳感器幾個(gè)明顯的方向。一種與利用生物材料的主要問題之一是保持恒定的活性很長一段時(shí)間的難度。對(duì)環(huán)境的生物傳感器也很重要,以使長期在室溫下儲(chǔ)存。為了滿足這些需求,各種保護(hù)技術(shù)已
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