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1、第九章 血清學(xué)反應(yīng),,4/1/2024,2,一 血清學(xué)反應(yīng)的概念及一般特點(diǎn) 抗原及相應(yīng)抗體在體內(nèi)或體外均能發(fā)生特異性結(jié)合,在體外結(jié)合能發(fā)生可見免疫反應(yīng)。由于抗體主要存在于血清中,故稱為血清學(xué)反應(yīng)。 血清學(xué)反應(yīng)根據(jù)抗原性質(zhì)、反應(yīng)條件、參與反應(yīng)物質(zhì),則表現(xiàn)出反應(yīng)有多種多樣。其反應(yīng)的一般特點(diǎn)是:,第一節(jié) 概 述,4/1/2024,3,(一)特異性和交叉性 血清學(xué)反應(yīng)具有高度特異性??乖荒芘c相應(yīng)抗體結(jié)合,而不能
2、與其他抗體相結(jié)合。 生物體的組成是復(fù)雜的,包含有多種抗原成分,在進(jìn)化過程中形成不同的種類,有各不相同的特異性抗原,在親緣種系中往往含有部分相同的抗原成分,能引起交叉反應(yīng)。,4/1/2024,4,(二)結(jié)合的可逆性 抗原抗體結(jié)合是分子表面結(jié)合,這一結(jié)合受理化因素的影響,當(dāng)溫度超過60?C或pH降至3以下時(shí),則抗原抗體復(fù)合物又重新離群。離群后的抗原、抗體,其理化性質(zhì)、免疫活性保留。,4/1/2024,5,(三)最適比與帶現(xiàn)
3、象 抗原與抗體結(jié)合,其比例適當(dāng)時(shí)才可出現(xiàn)可見反應(yīng)。比例最適合,出現(xiàn)反應(yīng)最快,反應(yīng)產(chǎn)物愈多。 如果抗原或抗體過多,抗體和抗原結(jié)合點(diǎn)的聚合一開始時(shí)即達(dá)到飽和,形成小的復(fù)合物則不能繼續(xù)與相鄰抗原、抗體結(jié)合,不出現(xiàn)可見反應(yīng),謂之區(qū)帶現(xiàn)象或帶現(xiàn)象。為了避免血清學(xué)反應(yīng)的帶現(xiàn)象,需要將抗原或抗體作適當(dāng)?shù)南♂尅?4/1/2024,6,,4/1/2024,7,比例不適合—不能完成第二步反應(yīng) —帶現(xiàn)象,4/1/2024,8,(四)反應(yīng)的階段
4、性 抗原與抗體進(jìn)行結(jié)合,可分為兩個(gè)階段: 第一階段為抗原與抗體的特異性結(jié)合階段,反應(yīng)快,幾秒鐘至幾分鐘即完成,但無(wú)可見反應(yīng); 第二階段為抗原與抗體的反應(yīng)可見階段,表現(xiàn)為凝集、沉淀、補(bǔ)體結(jié)合等,反應(yīng)進(jìn)行較慢,需幾分鐘或更久。第二階段受電解質(zhì)、溫度、pH值等影響。兩個(gè)階段在反應(yīng)進(jìn)行中無(wú)嚴(yán)格界限。,4/1/2024,9,(五)影響反應(yīng)的因素1.電解質(zhì) 血清學(xué)反應(yīng)須在適當(dāng)濃度的電解質(zhì)參與下,才出現(xiàn)可見反應(yīng)。
5、在凝集、沉淀反應(yīng)操作時(shí),一般用生理鹽水或8%—10%高滲鹽水作稀釋,才出現(xiàn)較強(qiáng)反應(yīng)。,4/1/2024,10,2.溫度 溫度升高,可增加抗原與抗體分子運(yùn)動(dòng)而碰撞接觸,加速反應(yīng)的出現(xiàn),故通常將抗原抗體混合后,放置37?C溫箱或水浴箱中,保持一定時(shí)間,促進(jìn)反應(yīng)。溫度高,加速反應(yīng);溫度低,反應(yīng)時(shí)間延長(zhǎng),但反應(yīng)結(jié)合充分,故在補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)、免疫吸附實(shí)驗(yàn)中,采用低溫放置過夜。,4/1/2024,11,3.酸堿度 血清學(xué)反應(yīng)通
6、常用pH6~8,過酸或過堿都可使復(fù)合物離群,pH值在等電點(diǎn)時(shí),可引起非特異凝集。,4/1/2024,12,二 血清學(xué)反應(yīng)的類型 沉淀、凝集、瓊脂擴(kuò)散、中和、補(bǔ)體結(jié)合和免疫吸附試驗(yàn)等。,,4/1/2024,13,三 血清學(xué)反應(yīng)的應(yīng)用方式和目的 抗原抗體反應(yīng)是特異性的,在應(yīng)用時(shí)必須有一個(gè)是已知的,通過反應(yīng)來(lái)鑒定另一個(gè)未知的。例如鑒定某一病原微生物時(shí),多用已知抗體。診斷傳染病時(shí),對(duì)慢性病可用已知的抗原檢測(cè)未知的特異性抗體;診斷急性
7、病則用已知的抗體檢測(cè)未知的抗原(病原),如炭疽病等。,4/1/2024,14,(一)抗原與抗體的快速檢測(cè) 在診斷傳染病、寄生蟲病、變態(tài)反應(yīng)、腫瘤、自身免疫疾病時(shí),均已廣泛應(yīng)用血清學(xué)方法檢查抗體或抗原(細(xì)菌、病毒)的存在,作為診斷疾病的手段?,F(xiàn)已應(yīng)用的間接血凝技術(shù)、對(duì)流電泳、標(biāo)記抗體技術(shù),均能快速、簡(jiǎn)便的確診抗原或抗體。,4/1/2024,15,(二)生物活性物質(zhì)的超微定量 應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)、放射免疫等技術(shù),抗
8、原抗體檢測(cè)的敏感度均大為提高,已達(dá)到能精確測(cè)出Pg的水平,其敏感度已大大超過了常規(guī)的化學(xué)分析。此類技術(shù)已應(yīng)用于測(cè)定動(dòng)物體內(nèi)的激素、維生素、藥物及其他病理過程中的微量產(chǎn)物。,4/1/2024,16,(三)抗原或抗體在細(xì)胞與亞細(xì)胞水平的定位 用熒光抗體、酶標(biāo)抗體技術(shù),可以檢測(cè)病毒或細(xì)菌在動(dòng)物各種組織細(xì)胞中的分布。應(yīng)用免疫酶組化法及鐵蛋白標(biāo)記技術(shù)進(jìn)行免疫電鏡觀察,可以測(cè)定病毒在亞細(xì)胞水平的定位,也可測(cè)定淋巴細(xì)胞表面免疫球蛋白及抗體的
9、產(chǎn)生情況。據(jù)此可分析傳染病發(fā)生的機(jī)制及對(duì)免疫機(jī)理的探討。,4/1/2024,17,(四)微生物的鑒定與分析 應(yīng)用交叉凝集實(shí)驗(yàn)、凝集吸收實(shí)驗(yàn)、沉淀實(shí)驗(yàn)等血清學(xué)實(shí)驗(yàn),進(jìn)行微生物的鑒定及區(qū)別微生物的血清型,從而確定微生物的類型及其親緣關(guān)系。還可應(yīng)用瓊脂擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)、免疫電泳等技術(shù),對(duì)微生物的抗原組分進(jìn)行分析。,4/1/2024,18,(五)血型鑒定 用細(xì)胞直接凝集實(shí)驗(yàn)、血凝抑制實(shí)驗(yàn)、溶血實(shí)驗(yàn)等技術(shù),可作血型鑒定、親子關(guān)系的
10、確定、新生兒和出生幼畜溶血病的診斷。,4/1/2024,19,第二節(jié) 沉淀試驗(yàn),可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合,在適量電解質(zhì)存在下,形成肉眼可見的絮狀白色沉淀,稱之為沉淀試驗(yàn)(Precipitationreaction test)。 可溶性抗原 +免疫血清 出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象 (血清蛋白、病毒) (抗體) 比例適合 沉淀原
11、 沉淀素 比例不適合 不出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象,,0.85%NaCl,4/1/2024,20,一 液相沉淀試驗(yàn) 1.環(huán)狀沉淀試驗(yàn) 原理:試管內(nèi),下層沉淀素與上層 沉淀原在液界面應(yīng)形成白色沉淀環(huán)。 用途:檢測(cè)皮毛中的炭疽 桿菌抗原(Ascoli試驗(yàn)) 2.絮狀沉淀試驗(yàn) 抗原與抗體在試管內(nèi)混合,在電解質(zhì)的存在下抗原抗體復(fù)合物可形成絮狀凝聚物。此法多用于毒素和抗毒素測(cè)定。,4/1/2024,21,二
12、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),瓊脂是一種含有硫酸基的多糖,加熱溶解于水,冷卻后凝固成凝膠,瓊脂凝膠是一種多孔結(jié)構(gòu),其孔徑大小與瓊脂含量有關(guān),1%瓊脂凝膠孔徑為85nm,能使許多可溶性抗原與抗體在凝膠中擴(kuò)散。當(dāng)抗原與抗體在凝膠中的一定位置上相遇時(shí),則兩者結(jié)合形成沉淀線。沉淀線的位置與抗原、抗體顆粒的大小、濃度,沉淀線的數(shù)目和所含抗原組分有關(guān)。瓊脂擴(kuò)散可分為單擴(kuò)散(抗原或抗體中一種成分?jǐn)U散)和雙擴(kuò)散。 根據(jù)其擴(kuò)散的方向可分為單向單擴(kuò)、單向雙擴(kuò)、雙向
13、單擴(kuò)、雙向雙擴(kuò),其中雙向雙擴(kuò)應(yīng)用最廣。,4/1/2024,22,1 .單向單擴(kuò)散,將0.6%-1%瓊脂加熱熔化后,加入定量經(jīng)預(yù)熱的稀釋抗血清,混合均勻后,加入小試管中,待凝固后加入0.5ml抗原于其上,直立,置于37?C中,2-3h后出現(xiàn)沉淀線。由于抗原的擴(kuò)散,使沉淀線不斷向下推移,而最初形成的沉淀帶隨抗原的擴(kuò)散而向下推移,最后穩(wěn)定。沉淀帶距抗原愈近,其濃度愈大,可作抗原濃度測(cè)定。,4/1/2024,23,2 .單向雙擴(kuò)散 基
14、本作法同上,但在抗原與抗體之間加一層不含抗體的鹽水瓊脂,抗原與抗體均向中間瓊脂擴(kuò)散,形成沉淀帶。主要用于抗原成分的分析。,4/1/2024,24,3 .雙向單擴(kuò)散 亦稱輻射擴(kuò)散。在平皿或玻板上進(jìn)行。用2%緩沖瓊脂鹽水,加熱融化,待冷后加入經(jīng)預(yù)熱的抗血清(用1:5-10倍稀釋),混合后倒入平皿或玻板上,厚2-3mm。凝固后在凝膠板上打孔,孔徑2-3mm,孔內(nèi)滴加抗原液,放置濕盒中37?C下擴(kuò)散??乖诳變?nèi)向四周擴(kuò)散,與凝膠中的抗
15、體接觸,形成白色沉淀環(huán),白環(huán)的大小隨抗原的濃度而增大。此法在獸醫(yī)臨床上用于蛋白質(zhì)定量實(shí)驗(yàn)。,4/1/2024,25,4.雙向瓊脂擴(kuò)散(瓊擴(kuò)) 此法系采用1%瓊脂倒于平皿或玻片上,制成凝膠板,可按需要打孔。將抗原、抗體分別滴入孔內(nèi),放置濕盒中,在37?C濕箱中24-72h后觀察。在抗原與抗體孔間形成沉淀帶。每一種抗原成分出現(xiàn)一條沉淀帶。,4/1/2024,26,結(jié)果判斷: 如兩個(gè)相鄰孔之間抗原相同,則沉淀帶融合;抗原則
16、不同,則互相交叉;部分相同則部分融合,另外不同部分則交叉。,4/1/2024,27,特點(diǎn):簡(jiǎn)便、敏感性低、耗時(shí)、應(yīng)用最廣用途:常用于細(xì)菌、病毒的鑒定,抗血清效價(jià)的測(cè)定,抗原組分的分析及傳染病的診斷等,如馬傳染性貧血病的診斷。,4/1/2024,28,第三節(jié) 凝集試驗(yàn),細(xì)菌、紅細(xì)胞等顆粒狀態(tài)的抗原與相應(yīng)的抗體結(jié)合后,在電解質(zhì)存在時(shí)相互凝集成絮片狀團(tuán)塊,這種試驗(yàn)稱為凝集試驗(yàn)(Agglutiation test)。 參與反
17、應(yīng)的抗原叫凝集原;參與反應(yīng)的抗體稱為凝集素,主要有IgG、IgM。凝集實(shí)驗(yàn)有直接凝集試驗(yàn)和間接凝集試驗(yàn)兩種。,4/1/2024,29,基本原理: 生理鹽水顆粒性抗原 + 相應(yīng)抗血清 顆粒凝集 (細(xì)菌、紅細(xì)胞) 比例適合 凝集原 凝集素 過多
18、 后帶現(xiàn)象 (稀釋血清),,4/1/2024,30,一、直接凝集試驗(yàn) 顆粒性抗原與相應(yīng)抗體在電解質(zhì)的參與下,直接結(jié)合,凝集成團(tuán)的現(xiàn)象,稱直接凝集試驗(yàn)。按其操作方法可分為玻片發(fā)和試管法。,4/1/2024,31,1.玻片凝集試驗(yàn) 將已知的抗血清1-2滴,滴于清潔玻片上,取待檢菌液(抗原)加于其上,混合均勻,數(shù)分鐘后可出現(xiàn)顆粒狀或絮片狀凝集,謂之陽(yáng)性反應(yīng)。
19、特點(diǎn):簡(jiǎn)單、快速 用途:定性,細(xì)菌鑒定、血型鑒定。如用已知的沙門氏菌血清,鑒定沙門氏桿菌的抗原組分以定型。此法也用于畜禽傳染病診斷,如用已知的雞白痢有色平板抗原,檢查雞血清中有無(wú)相應(yīng)抗體,進(jìn)行雞白痢檢疫,4/1/2024,32,2.試管凝集試驗(yàn),是一種定性與定量相結(jié)合的方法。試驗(yàn)時(shí)用一列試管,將待檢血清用0.5%石炭酸生理鹽水作10倍遞進(jìn)稀釋,每管維持量為0.5ml,一管不加血清作對(duì)照。每管中加入一定濃度的抗原0.5ml,混合均
20、勻,在37?C或室溫下靜置數(shù)小時(shí),觀察液體的亮度及沉淀物,視不同的凝集程度記錄為++++(100%菌體凝集),+++(75%凝集),+(25%凝集)。,4/1/2024,33,凡能與一定量抗原發(fā)生50%凝集(++)的血清最高稀釋度,為血清的凝集價(jià)或效價(jià)(滴度)。在試驗(yàn)時(shí),必須建立陰性、陽(yáng)性血清對(duì)照管。 特點(diǎn):準(zhǔn)確、耗時(shí) 用途:診斷布氏桿菌病,測(cè)定抗體的凝集價(jià)(定量),4/1/2024,34,二、間接凝集試驗(yàn) 基本原理: 可
21、溶性抗原+惰性載體(聚苯乙烯乳膠微粒、炭粒、綿羊紅細(xì)胞等) 抗原致敏載體 抗原致敏載體+相應(yīng)免疫血清(抗體) 電解質(zhì) 被動(dòng)載體凝集(間接乳膠凝集、間接炭素凝集、間接紅細(xì)胞凝集等 ),,,4/1/20
22、24,35,特點(diǎn):敏感(在微量反應(yīng)板中進(jìn)行試驗(yàn))、快速。用途:用已知抗原致敏的載體可檢測(cè)血清中的特異抗體及其效價(jià)。 若用已知免疫血清(Ab)致敏的紅細(xì)胞,則可檢測(cè)病毒等可溶性抗原——稱為反向間接血凝試驗(yàn)。,4/1/2024,36,,4/1/2024,37,(正向)間接凝集反應(yīng)原理示意圖,4/1/2024,38,(反向)間接凝集反應(yīng)原理示意圖,4/1/2024,39,間接凝集抑制反應(yīng)原理示意圖A:標(biāo)本中含抗原 B:標(biāo)本中
23、不含抗原,4/1/2024,40,第四節(jié) 與補(bǔ)體有關(guān)的試驗(yàn),一、補(bǔ)體的性質(zhì) 補(bǔ)體是存在于正常動(dòng)物血清中的一組蛋白質(zhì)。 補(bǔ)體沒有特異性,它能與任何抗原抗體復(fù)合物相結(jié)合,但不能與游離的抗原或抗體相結(jié)合。 補(bǔ)體與抗原抗體的復(fù)合物結(jié)合后,可出現(xiàn)溶血反應(yīng)、溶菌反應(yīng)、補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)、凝集反應(yīng)、免疫黏膜試驗(yàn)等。由于補(bǔ)體具有這一特性,故常用其來(lái)檢驗(yàn)抗原或抗體是否發(fā)生特異性結(jié)合,特異性抗原或抗體是否存在。,4/1/2024,4
24、1,二、溶解試驗(yàn)1.溶血試驗(yàn) 紅細(xì)胞與相應(yīng)的抗體(溶血素)相結(jié)合后,在補(bǔ)體的參與下,可發(fā)生溶血反應(yīng)(直接溶血反應(yīng)),以作補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)的指示系統(tǒng)。 吸附抗原的紅細(xì)胞與抗體結(jié)合后,在補(bǔ)體存在下可以引起溶血反應(yīng),這種反應(yīng)稱為間接溶血反應(yīng)。間接溶血反應(yīng)只能用新鮮紅細(xì)胞,而新鮮紅細(xì)胞不易保存,限制了本法的應(yīng)用。,4/1/2024,42,2.溶菌試驗(yàn) 某些細(xì)菌(如霍亂弧菌)與抗體結(jié)合后,如有補(bǔ)體存在,可發(fā)生細(xì)菌溶解或被殺死
25、,這種反應(yīng)稱為溶菌反應(yīng)或殺菌反應(yīng)。,4/1/2024,43,三.補(bǔ)體參與的試驗(yàn)—補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn) 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)是應(yīng)用可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合,其抗原抗體復(fù)合物可以結(jié)合補(bǔ)體,但這一反應(yīng)肉眼看不到,如再加入致敏紅細(xì)胞,即可根據(jù)是否出現(xiàn)溶血反應(yīng)判斷反應(yīng)系統(tǒng)中是否存在相應(yīng)的抗原和抗體.,4/1/2024,44,1.參與反應(yīng):抗原抗體反應(yīng)系統(tǒng)、補(bǔ)體(豚鼠血清)、指示系統(tǒng)(綿羊紅細(xì)胞、溶血素)。2.反應(yīng)原理:(如下圖所示)。3.特點(diǎn):敏感性
26、特異性高。 正式試驗(yàn)前要進(jìn)行下列測(cè)定,操作較繁(溶血素效價(jià)、補(bǔ)體效價(jià)、抗原效價(jià))。4.用途:用于牛肺疫、副結(jié)核、布氏桿菌病、錐蟲病、馬傳貧、鼻疽等的檢疫。,4/1/2024,45,4/1/2024,46,中和試驗(yàn)(病毒、毒素中和試驗(yàn))原理:病毒與抗血清中抗體特異結(jié)合后失去感染易 感動(dòng)物、雞或雞胚、細(xì)胞活性。例1 NDV 9~11d雞胚 24~48h 雞胚死亡NDV+抗
27、血清 9~11d雞胚 雞胚不死亡,,,,第四節(jié) 中和試驗(yàn),,4/1/2024,47,例2 口蹄疫病毒(FMDV) 4~7d乳鼠 乳鼠死亡 FMDV+抗血清 4~7d乳鼠 乳鼠不死亡 用途:1.用已知血清鑒定病毒——診斷病毒病2.用已知病毒檢測(cè)血清抗體——診斷病毒感染,測(cè)定病毒免疫血清效價(jià)(中和價(jià))。,,,,,4/1/2024,
28、48,第六節(jié) 免疫標(biāo)記技術(shù),免疫標(biāo)記技術(shù)即是將某一個(gè)特定的易于檢測(cè)的分子或原子,聯(lián)結(jié)在抗體或抗原上,利用抗體(或抗原)能與相應(yīng)的抗原(或抗體)結(jié)合的特性,從而檢測(cè)抗原或抗體的存在及所在部位(定位)。 免疫標(biāo)記技術(shù)是近年來(lái)研究血清學(xué)反應(yīng)的一項(xiàng)新技術(shù)。它不僅可以用于抗原抗體的定性、定量,還可用于抗原抗體的定位。由于其反應(yīng)的特異性敏感性高,不但在診斷疾病時(shí)廣為應(yīng)用,亦可應(yīng)用于生物領(lǐng)域其他方面。,4/1/2024,49,1.熒光
29、標(biāo)記抗體技術(shù)(免疫熒光技術(shù)) 免疫熒光技術(shù)是將熒光染料標(biāo)記在抗體球蛋白分子上,制成熒光抗體。當(dāng)熒光抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合時(shí),就形成帶有熒光的抗原抗體復(fù)合物,在熒光顯微鏡下,可觀察到此復(fù)合物發(fā)出的熒光??蓹z測(cè)標(biāo)本中某種抗原的存在或抗原所在的部位(定位)。 原理:熒光素(F)+ Ab AbF(FITC))
30、 AbF + Ag Ag- AbF Ag- AbF 用途:用AbF檢測(cè)抗原 (定性、定位) 特點(diǎn):敏感,需熒光顯微鏡,,,,紫外光,4/1/2024,50,方法: 直接法 F 間接法
31、 F Ag Ag比較: 檢測(cè)一種抗原 標(biāo)記一種動(dòng)物的免疫 就須標(biāo)記特異 球蛋白AbF,就能
32、 的一種AbF 檢測(cè)多種抗原 較特異 較敏感,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,4/1/2024,51,2.酶標(biāo)記抗體技術(shù)(酶免疫測(cè)定技術(shù))(1) 間接法 (2)雙抗體夾心法原理:用途:已知抗原、酶標(biāo) 已知血清抗體、酶 抗體測(cè)血清抗體
33、 標(biāo)抗體測(cè)抗原,4/1/2024,52,3. 放射免疫測(cè)定法原理:Ag+AbR Ag-AbR 或 AgR+Ab AgR-Ab 用液相閃爍儀測(cè)R放出的射線量特點(diǎn):敏感性極高,需高級(jí)閃爍儀 同位素對(duì)人有放射性危害用途:用于藥物、激素、酶、腫瘤抗原等測(cè)定,4/1/2024,53,四、其他免疫標(biāo)記技術(shù),(一)免疫電鏡技
34、術(shù)(二)生物素-親和素標(biāo)記技術(shù)(三)核酸探針技術(shù),4/1/2024,54,第七節(jié) 葡萄球菌A蛋白及其應(yīng)用,葡萄球菌A蛋白是大多數(shù)金黃色葡萄球菌細(xì)胞壁上所含的一種成分,具有多種生物學(xué)特性,能與人及多種哺乳動(dòng)物的IgG的Fc段呈非特異性結(jié)合,結(jié)合后仍保持其抗體活性。同時(shí)與酶、熒光顏料偶聯(lián),因而應(yīng)用于免疫領(lǐng)域。,4/1/2024,55,一、葡萄球菌A蛋白的主要特性,葡萄球菌A蛋白是金黃色葡萄球菌細(xì)胞壁上的一種成分,存在于細(xì)菌表面,結(jié)合于
35、黏肽中。對(duì)熱穩(wěn)定,經(jīng)100度1h后仍保持與IgG結(jié)合的活性。 葡萄球菌A蛋白可以與人及多種哺乳動(dòng)物(如豬、兔、小白鼠)的IgG結(jié)合,并在瓊脂中形成沉淀線。這種結(jié)合是一種假免疫反應(yīng),是一種與IgG Fc段非特異的化學(xué)結(jié)合,結(jié)合后能激活補(bǔ)體,亦仍保持Fab的免疫活性。這一活性,已應(yīng)用于免疫學(xué)領(lǐng)域中。,4/1/2024,56,二、 葡萄球菌A蛋白在免疫學(xué)上的應(yīng)用,(一)協(xié)同凝集試驗(yàn) 細(xì)胞壁上葡萄球菌A蛋白與抗體結(jié)合,被覆著
36、特異性抗體的金黃色葡萄球菌與相應(yīng)的抗原結(jié)合時(shí),就可使互相聯(lián)結(jié)引起協(xié)同凝集反應(yīng)。這種方法應(yīng)用于多種細(xì)菌和某些病毒的快速診斷。 試驗(yàn)方法常采用玻片法,也可采用試管凝集法,每種方法均應(yīng)設(shè)不含葡萄球菌A蛋白的陰性菌液對(duì)照。,4/1/2024,57,(二)標(biāo)記葡萄球菌A蛋白技術(shù) 從富含葡萄球菌A蛋白的菌株中,提取葡萄球菌A成分,用酶、熒光染料標(biāo)記,代替標(biāo)記第二抗體,用于檢測(cè)抗體或抗原。此法可避免制造第二抗體的麻煩,保存期長(zhǎng)
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