人卵巢癌裸鼠移植腹水瘤模型的建立

1、基礎(chǔ)研究人卵巢癌裸鼠移植腹水瘤模型的建立陳愛平①高國蘭王和彭芝蘭白紹槐本課題受國家自然科學(xué)基金和CMB基金資助(批準(zhǔn)號39470721)作者單位:610041華西醫(yī)科大學(xué)附二院婦產(chǎn)科(陳愛平、高國蘭、王和、彭芝蘭、白紹槐)①現(xiàn)工作單位為青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科【摘要】目的建立人卵巢癌裸鼠移植腹水瘤模型為研究人卵巢癌發(fā)病機制、生物學(xué)特性以及轉(zhuǎn)移方式提供工具。方法將1例人卵巢癌的腹水直接接種于裸鼠腹腔觀察裸鼠腹水形成以及腫瘤生長和轉(zhuǎn)移情

2、況做腹水細(xì)胞學(xué)計數(shù)、涂片以及染色體和腫瘤標(biāo)志物的檢查腫瘤和器官作病理學(xué)檢查。結(jié)果成功建成1個人卵巢癌裸鼠移植腹水瘤模型并己傳至第18代傳代移植成功率100.0%組織學(xué)和超微結(jié)構(gòu)形態(tài)證實保持了原人卵巢癌特征具有人類腫瘤染色體特征有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移行為可在體外培養(yǎng)并傳代。結(jié)論本研究所建立的人卵巢癌腹水瘤裸鼠移植腹水瘤模型與患者臨床情況相似通過對40只裸鼠的實驗觀察該方法穩(wěn)定可靠?！娟P(guān)鍵詞】人卵巢癌裸鼠移植腹水瘤模型中圖分類號:R737.31R73

3、35文獻標(biāo)識碼:A文章編號:10015930(2000)02011303TransplantableitesTumModelsofHumanOvarianCarcinomainNudeMiceCHENAipingGAOGuolanWANGHeetal.DepartmentofObstetricsGyneeologyTheSecondAffiliatedHospitalWestChinaUniversityofMedicalScience

4、Chengdu610041【Abstract】ObjectiveToestablishatransplantableitestummodelofhumanovariancarcinomainnudemice.MethodsTumitesofhumanovariancarcinomaweredirectlyimplantedperitoneallyintonudemice.Productionofitesmetastasismpholog

5、icalacteristicsoftransplantedtumwerestudiedbylightmicroscopyelectronmicroscopy.Chromsometummarkerwerealsoanalysed.ResultsOnetransplanteditestumwasestablishedsuccessfullyithadbeenpassagedinvivof18generations.Themphologica

6、lacteristicschromsomalkaryotypetummarkerweresimilartotheiginalhumanovariancarcinoma.ConclusionThemodelprovideusefultoolfthestudyofhumanovarlancarcinoma.【Keywds】HumanovariancarcinomaitestransplanteditestumNudemicemodel(Th

7、ePracticalJournalofCancer200015:113～115)建立裸鼠卵巢癌腹腔播散模型是深入研究卵巢癌生物機制和治療方法的基礎(chǔ)工作。我們于1998年9月將1例卵巢癌并腹水患者的腹水標(biāo)本直接接種于裸鼠腹腔建立了人卵巢癌裸鼠移植腹水瘤模型。已傳至第18代現(xiàn)報告如下。1材料和方法1.1人體腫瘤標(biāo)本來源病例為1例44歲卵巢癌患者臨床分期為Ⅲc期雙側(cè)卵巢腫塊伴大量腹水和盆腔內(nèi)有廣泛轉(zhuǎn)移癌結(jié)節(jié)。病理診斷為雙側(cè)卵巢漿液性乳頭狀囊腺

8、癌(低分化型)。1.2實驗動物BULBC(nunu)裸小鼠由華西醫(yī)科大學(xué)動物中心提供鼠齡4～12周雌鼠。實驗鼠飼養(yǎng)于無菌室的凈化空氣層流架中。室內(nèi)定期進行紫外線照射籠、墊料、飲水、飼料均高壓消毒。1.3移植方法手術(shù)中取腹水45ml置于消毒離心管內(nèi)離心后留取沉淀以空針吸取并注入裸鼠腹腔接種工作在標(biāo)本離心后40min內(nèi)完成。1.4模型檢測①定期觀察裸鼠腹部膨脹及消瘦情況。②處死裸鼠及對自然死亡的裸鼠作尸體解剖腹水做細(xì)胞學(xué)涂片檢查及細(xì)胞學(xué)計數(shù)

9、腹腔內(nèi)腫瘤及器官作病理學(xué)檢查。③腹水作染色體檢查。④裸鼠血及腹水作腫瘤標(biāo)志物檢測。⑤體外培養(yǎng):第8、第12代移植腹水將腹水瘤瘤細(xì)胞計數(shù)后接種于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入含10%胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液內(nèi)置37℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)。113實用癌癥雜志2000年3月第15卷第2期ThePracticalJournalofCancerMarch2000Vol.15No.2CEA值均在正常范圍這與人卵巢漿液性囊腺癌病例的臨床情況相一致。該模型可以在體外進行

10、連續(xù)傳代。實驗表明用人卵巢癌腹水移植于裸鼠體內(nèi)做成卵巢癌腹水瘤模型是1種方便、有效、可行的方法且該模型腹水形成的快慢和荷瘤生存時間與接種細(xì)胞數(shù)相關(guān)從而有利于實驗條件的控制。腹水瘤的生長與原人體來源的腫瘤組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)、轉(zhuǎn)移方式、生物學(xué)特性均保持一致。該腹水瘤的建立為人卵巢癌提供了較理想的動物模型對深入研究卵巢癌的發(fā)病和轉(zhuǎn)移機制、治療方法以及化學(xué)治療耐藥性都具有重要的作用。參考文獻[1]孫慧戰(zhàn)忠利黃建英等.人卵巢癌裸鼠移植瘤模型的建立及其

11、生物學(xué)特性的實驗應(yīng)用研究〔J〕.中國腫瘤臨床199421(4):786.[2]DaviesBRAuerspergNWsleySDetal.TransfectionofratovariansurfaceepitheliumwitherbB2reuinducestransfmed〔J〕.AmJPathol199852(1):297.[3]RismaKAClayCMMettTMetal.Targetedoverexpressionoflute

12、inizinghmoneintransgenicmiceleadstoinfertilitypolycysticovariesovariantums〔J〕.ProcNatlAcadSciUSA199592(5):1322.[4]FuXHoffmanRM.Humanovariancarcinomametastaticmodelsconstructedinnudemicebythotopictransplantationofhistolog

13、icallyintactpatientspecimens〔J〕.AnticancerRes1993139(2):283.[5]HamiltonTCYoungRCLouieKGetal.acterizationofaxenograftmodelofhumanovariancarcinomawithpruductsitesintraabdominalcarcinomatosisinmice〔J〕.CancerRes198444(11):52

14、86.[6]吳秉拴.人類腫瘤異種移植和癌生物學(xué)研究〔J〕.北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報198921(3):239.[7]YoshidaYKamitaniNSasakiLLetal.Establishmentofalivermetastaticmodelofhumanovariancancer〔J〕.AnticancerRes1998181(1):327.[8]吳秉拴孫毓凱鄭杰.裸鼠體內(nèi)建立的人類高轉(zhuǎn)移癌系〔J〕.中華腫瘤雜志19857(5):324

15、.(收稿日期19991019修回日期1999)膀胱癌肉瘤2例報告鄭家文樊克武嚴(yán)小娟陳慧石群立作者單位:210002南京軍區(qū)南京總醫(yī)院病理科(鄭家文、嚴(yán)小娟、陳慧、石群立)210006南京市第一醫(yī)院病理科(樊克武)關(guān)鍵詞:膀胱腫瘤癌肉瘤中圖分類號:R737.14文獻標(biāo)識碼:D文章編號:10015930(2000)020115011病例報告例1.男性72歲。無痛性肉眼血尿1月余于1994年1月25日入院。尿常規(guī):紅細(xì)胞()白細(xì)胞3～4HP蛋

16、白()。CT及B超檢查提示膀胱癌。膀胱鏡檢查:見膀胱頂部有一息肉狀腫物基底部有一短蒂大小為4.0cm2.5cm2.5cm表面及蒂部有明顯出血。膀胱鏡下行腫物切除術(shù)。送組織病理及電鏡檢查。隨訪1年4個月后腫瘤復(fù)發(fā)再行腫物切除輔以放療、化療目前恢復(fù)良好。例2.男性75歲。肉眼血尿1年余于1994年5月9日入院。尿常規(guī):紅細(xì)胞()。B超示雙腎萎縮。尿液找癌細(xì)胞3次均為陰性。膀胱鏡檢查:見膀胱左側(cè)壁有一圓形腫物直徑2cm基底部有蒂表面無出血膀胱

17、鏡下行腫物切除術(shù)腫瘤組織送病理檢查。2病理資料例1為暗紅色破碎腫塊組織1堆7.6cm2.5cm2.5cm大小例2為暗紅色不規(guī)則破碎組織1堆2.5cm2.5cm2.0cm2例質(zhì)地均較韌。光鏡下2例細(xì)胞形態(tài)相似。呈2種形態(tài)一部分形態(tài)呈巢狀分布細(xì)胞為多邊形大小不一核異型性明顯核分裂像易見。另一部分區(qū)域細(xì)胞為梭形呈條索狀排列細(xì)胞核異型性明顯兩者交錯混雜排列。組織化學(xué)及免疫組化:部分區(qū)域網(wǎng)狀纖維圍繞腫瘤細(xì)胞巢分布梭形細(xì)胞區(qū)域圍繞單個瘤細(xì)胞分布。巢

18、狀細(xì)胞區(qū)域細(xì)胞角蛋白(CK)陽性、波形蛋白(Vim)陰性梭形細(xì)胞區(qū)域Vim陽性而CK則陰性。例1梭形細(xì)胞灶性區(qū)域Actin陽性。2例SMA、S100、Desmin均為陰性。例1常規(guī)電鏡取材及制片。JEM1200型透射電鏡下部分腫瘤細(xì)胞呈多邊形或不規(guī)則狀核質(zhì)比大核呈圓形或不規(guī)則狀染色質(zhì)豐富核仁不明顯見粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核糖體和中間絲細(xì)胞間可見橋粒樣結(jié)構(gòu)胞膜外可見基底膜結(jié)構(gòu)。梭形細(xì)胞有較多的細(xì)胞突起無細(xì)胞間連接胞質(zhì)豐富內(nèi)質(zhì)網(wǎng)多見見電子密度較低的物質(zhì)