生物技術(shù)制藥第二版課后思考題及答案(全)

1、1.生物技術(shù)制藥分為哪些類(lèi)型？生物技術(shù)制藥分為哪些類(lèi)型？生物技術(shù)制藥分為四大類(lèi)：生物技術(shù)制藥分為四大類(lèi)：（1）應(yīng)用重組DNA技術(shù)(包括基因工程技術(shù)、蛋白質(zhì)工程技術(shù))制造的基因重組多肽，蛋白質(zhì)類(lèi)治療劑。（2）基因藥物，如基因治療劑，基因疫苗，反義藥物和核酶等（3）來(lái)自動(dòng)物、植物和微生物的天然生物藥物（4）合成與部分合成的生物藥物2生物技術(shù)制藥具有什么特征？生物技術(shù)制藥具有什么特征？（1）分子結(jié)構(gòu)復(fù)雜（2）具有種屬特異性（3）治療針對(duì)性強(qiáng)，

2、療效高（4）穩(wěn)定性差（5）基因穩(wěn)定性（6）免疫原性（7）體內(nèi)的半衰期短（8）受體效應(yīng)（9）多效性（10）檢驗(yàn)的特殊性3.生物技術(shù)制藥中有哪些應(yīng)用？生物技術(shù)制藥中有哪些應(yīng)用？應(yīng)用主要有：應(yīng)用主要有：（1）基因工程制藥：包括基因工程藥物品種的開(kāi)發(fā)，基因工程疫苗，基因工程抗體，基因診斷與基因治療，應(yīng)用基因工程技術(shù)建立新藥的篩選模型，應(yīng)用基因工程技術(shù)改良菌種，產(chǎn)生新的微生物藥物，基因工程技術(shù)在改進(jìn)藥物生產(chǎn)工藝中的應(yīng)用，利用轉(zhuǎn)基因動(dòng)植物生產(chǎn)蛋白質(zhì)

3、類(lèi)藥物（2）細(xì)胞工程制藥：包括單克隆抗體，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，植物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)次生代謝產(chǎn)物（3）酶工程制藥（4）發(fā)酵工程制藥4.基因工程藥物制造的主要程序有哪些？基因工程藥物制造的主要程序有哪些？基因工程藥物制造的主要步驟有：目的基因的克隆，構(gòu)造DNA重組體，構(gòu)造工程菌，目的基因的表達(dá)，外源基因表達(dá)產(chǎn)物的分離純化產(chǎn)品的檢驗(yàn)5.影響目的的基因在大腸桿菌中表達(dá)的因素有哪些？影響目的的基因在大腸桿菌中表達(dá)的因素有哪些？（1）外源基因的計(jì)量（2）外源

4、基因的表達(dá)效率：a、啟動(dòng)子的強(qiáng)弱b、核糖體的結(jié)合位點(diǎn)c、SD序列和起始密碼的間距d、密碼子組成（3）表達(dá)產(chǎn)物的穩(wěn)定性（4）細(xì)胞的代謝付荷（5）工程菌的培養(yǎng)條件6.質(zhì)粒不穩(wěn)定分為哪兩類(lèi)，如何解決質(zhì)粒不穩(wěn)定性？質(zhì)粒不穩(wěn)定分為哪兩類(lèi)，如何解決質(zhì)粒不穩(wěn)定性？質(zhì)粒不穩(wěn)定分為分裂分為分裂不穩(wěn)定和結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定。質(zhì)粒的分裂不穩(wěn)定是指工程菌分裂時(shí)出現(xiàn)一定比例不含質(zhì)粒的子代菌的現(xiàn)象；質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定是DNA從質(zhì)粒上丟失或堿基重排，缺失所致工程菌性能的改變。提

5、高質(zhì)粒穩(wěn)定性的方法如下：（1）選擇合適的宿主細(xì)菌2）選擇合適的載體（3）選擇壓力（4）分階段控制培養(yǎng)（5）控制培養(yǎng)條件（6）固定化7.影響基因工程菌發(fā)酵的因素有哪些？如何控制發(fā)酵的各種參數(shù)？影響基因工程菌發(fā)酵的因素有哪些？如何控制發(fā)酵的各種參數(shù)？影響因素：（1）培養(yǎng)基（2）接種量（3）溫度（4）溶解氧（5）誘導(dǎo)時(shí)機(jī)的影響（6）誘導(dǎo)表達(dá)程序（7）PH值8.什么是高密度發(fā)酵？影響高密度發(fā)酵的因素有哪些？可采取哪些方法來(lái)實(shí)現(xiàn)高密度發(fā)什么是高密

6、度發(fā)酵？影響高密度發(fā)酵的因素有哪些？可采取哪些方法來(lái)實(shí)現(xiàn)高密度發(fā)酵？酵？高密度發(fā)酵：是指培養(yǎng)液中工程菌的菌體濃度在50gDCWL以上，理論上的最高值可達(dá)200gDCWL影響因素：（1）培養(yǎng)基（2）溶氧濃度（3）PH(4)溫度（5）代謝副產(chǎn)物實(shí)現(xiàn)高密度發(fā)酵的方法：（1）改進(jìn)發(fā)酵條件：a、培養(yǎng)基b、建立流加式培養(yǎng)基c、提高供養(yǎng)能力（2）構(gòu)建出產(chǎn)乙酸能力低的工程菌宿主菌：a、阻斷乙酸產(chǎn)生的主要途徑b、對(duì)碳代謝流進(jìn)行分流c、限制進(jìn)入糖酵解途徑的

7、碳代謝流d、引入血紅蛋白基因（3）構(gòu)建蛋白水解酶活力低的工程化宿主菌15.動(dòng)物細(xì)胞生物反應(yīng)器必須具備哪些基本要求？有哪些類(lèi)型？特定是什么？動(dòng)物細(xì)胞生物反應(yīng)器必須具備哪些基本要求？有哪些類(lèi)型？特定是什么？動(dòng)物細(xì)胞反應(yīng)器具備的基本要求：（1）制造生物反應(yīng)器所采用的一切材料，尤其是與培養(yǎng)基，細(xì)胞直接接觸的材料，對(duì)細(xì)胞必須是無(wú)毒性的。（2）生物反應(yīng)器的結(jié)構(gòu)必須使之具有良好的傳質(zhì)、傳熱和混合的性能（3）密封性良好，可避免一切外采的不需要的微生物污

8、染。（4）對(duì)培養(yǎng)基環(huán)境中多種物理化學(xué)參數(shù)能自動(dòng)檢測(cè)和調(diào)節(jié)控制，控制的精度高，而且能保持環(huán)境質(zhì)量的均一。（5）可長(zhǎng)期連續(xù)運(yùn)轉(zhuǎn)，這對(duì)于培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的生物反應(yīng)器顯得尤其重要。（6）容器加工制造時(shí)要求內(nèi)面光滑，無(wú)死角，以減少細(xì)胞或微生物的沉積。（7）拆裝，連結(jié)和清潔方便，能耐高壓蒸汽消毒，便于操作維修（8）設(shè)備成本盡可能低。反應(yīng)器類(lèi)型及特點(diǎn)：（1）攪拌罐式生物反應(yīng)器：主要用于是懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，微載體培養(yǎng)，微囊和巨載體培養(yǎng)以及結(jié)團(tuán)培養(yǎng)（2）氣升式生

9、物反應(yīng)器：氣體通過(guò)裝在罐底的噴管進(jìn)入反應(yīng)器的導(dǎo)流管，致使該部液體的密度小于導(dǎo)流管外部的液體形成循環(huán)流。（3）中空纖維式生物反應(yīng)器：占地空間小，產(chǎn)品產(chǎn)量、質(zhì)量高，生產(chǎn)成本低，不能重復(fù)使用，不能耐高壓蒸汽滅菌，需用環(huán)氧乙烷或其它消毒劑滅菌，難以取樣檢測(cè)。（4）透析袋或膜式生物反應(yīng)器：可使細(xì)胞達(dá)到高密度，又可隨意組合進(jìn)行操作，對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行濃縮純化。（5）固定床或流化床生物反應(yīng)器：結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，裝填材料易得。16.動(dòng)物細(xì)胞制藥有哪些新進(jìn)展？動(dòng)物細(xì)胞制

10、藥有哪些新進(jìn)展？①改進(jìn)表達(dá)載體，提高表達(dá)水平和產(chǎn)量②利用代謝工程改進(jìn)培養(yǎng)工藝③抑制細(xì)胞凋亡，延長(zhǎng)培養(yǎng)周期④采用糖基化工程，提高產(chǎn)品質(zhì)量⑤轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的研究⑥組織工程研究17.什么是單克隆抗體？單克隆抗體有哪些不足？什么是單克隆抗體？單克隆抗體有哪些不足？單克隆抗體：是針對(duì)一個(gè)抗原決定簇的抗體，又是單一的B淋巴細(xì)胞克隆產(chǎn)生的抗體。不足：（1）單克隆抗體均是鼠源性抗體，應(yīng)用于人體內(nèi)可產(chǎn)生人抗鼠抗體，加速了排斥反應(yīng)，在人體內(nèi)半衰期只有56h，難

11、以維持有效藥物作用靶組織時(shí)間。（2）完整的抗體分子，即Ig的相對(duì)分子質(zhì)量過(guò)大，難以穿透實(shí)體腫瘤組織，達(dá)不到有效治療濃度。18如何制備雜交瘤細(xì)胞？如何制備雜交瘤細(xì)胞？將兩個(gè)細(xì)胞（例如B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞）通過(guò)誘導(dǎo)融合形成雜交細(xì)胞，具體操作時(shí)為了提高成功率會(huì)用多個(gè)細(xì)胞同時(shí)雜交，然后篩選出目的細(xì)胞，再進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)使其有絲分裂而增值，得到大量目的細(xì)胞（雜交瘤細(xì)胞）。19基因工程抗體有哪些類(lèi)型？其特性和制備方法有什么不同？基因工程抗體有哪些類(lèi)型