專接本生物工程導(dǎo)論考試題目_第1頁
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1、(一)36.限制性內(nèi)切酶識別和切割dsDNA分子內(nèi)特殊核苷酸順序的酶統(tǒng)稱為限制性內(nèi)切酶,簡稱限制酶37.代謝工程利用基因重組技術(shù)強化細(xì)胞中某一代謝途徑或賦予細(xì)胞新的代謝能力是代謝工程的主要研究內(nèi)容38.愈傷組織植物體受到切割等傷害后會產(chǎn)生愈傷組織,愈傷組織的形成實際上是一種創(chuàng)傷反應(yīng),使植物脫分化的結(jié)果,產(chǎn)生愈傷組織的植物器官可以是種子,根,莖葉等。39.神經(jīng)干細(xì)胞神經(jīng)干細(xì)胞位于成體神經(jīng)組織中,具有再生神經(jīng)元。星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突狀細(xì)胞的潛

2、在能力40.基因組重排育種基因組重排技術(shù)可以用來改造細(xì)菌的基因組,實現(xiàn)表型的改良。重排技術(shù)具有多親本雜交的優(yōu)勢。對細(xì)菌群體進(jìn)行重復(fù)的基因組重排可以有效構(gòu)建新菌株的組合文庫。如果將它應(yīng)用到帶表型篩選的細(xì)菌群體中,就會產(chǎn)生很多表型有顯著改良的新菌株酵母菌的生長特性酵母菌是一類最簡單的真核微生物。細(xì)胞中有結(jié)構(gòu)完整的細(xì)胞核。絕大多數(shù)酵母菌是單細(xì)胞,但體積比細(xì)菌要大得多,一般呈球形,卵形或檸檬型。出芽生殖是酵母菌最常見的生殖方式。有些酵母細(xì)胞也能

3、以與細(xì)菌類似的裂殖方式來產(chǎn)生后代。這兩種生殖方式都是無性繁殖。很多酵母菌還能通過產(chǎn)生子囊孢子的形式進(jìn)行有性繁殖。若出芽形成的字細(xì)胞未能與母細(xì)胞分開,又長了新芽,形成成串的細(xì)胞,看起來像絲狀,稱為假菌絲,這類酵母稱為假絲酵母。酵母菌在自然界中分布很廣,尤其喜歡偏酸性且含糖較多的環(huán)境。我們每天吃的面包饅頭,喝的啤酒葡萄酒等各類酒類飲料,是酵母菌參與制造的,酵母菌還可以用于生產(chǎn)微生物,甘油,酶制劑,菌體蛋白?;蚪M文庫的篩選方法構(gòu)建基因文庫后

4、,就要鑒定出文庫中帶有目的基因序列的克隆。有三種通用的鑒定方法:1是用標(biāo)記的DNA探針進(jìn)行DNA雜交。2是用抗體對蛋白質(zhì)進(jìn)行免疫雜交。3是對蛋白質(zhì)的活性進(jìn)行鑒定1)DNA雜交法:熱處理或減變性后的雙鏈DNA分子會變成單鏈DNA分子。加熱后若緩慢降低溫度,那么DNA雙鏈結(jié)構(gòu)就會在堿基配對作用下重新恢復(fù)(復(fù)性)退火后的DNA分子探針和來,它是人們認(rèn)識最早的干細(xì)胞之一。在間歇發(fā)酵過程中如何結(jié)合微生物的生長特征實現(xiàn)發(fā)酵過程中的優(yōu)化操作。在間歇培

5、養(yǎng)中,當(dāng)微生物種子罐接種到發(fā)酵罐后,為了適應(yīng)新的環(huán)境需要一段緩沖期稱為遲滯期。為接下來的快速生長做好必要的準(zhǔn)備工作,適應(yīng)了新的環(huán)境后,微生物數(shù)量開始成倍增長,這個時期稱為指數(shù)生長期。在間歇培養(yǎng)過程中,當(dāng)微生物對數(shù)生長期維持一段時間后,由于某些養(yǎng)分消耗殆盡,微生物生長代謝過程中產(chǎn)生了抑制微生物生長的代謝產(chǎn)物,以及因為微生物密度已經(jīng)很高造成氧供應(yīng)不足等原因,微生物生長速度開始減慢,而同時有一部分微生物逐漸死亡。此時為了延長細(xì)胞處于穩(wěn)定期的時

6、間,極大可能的增加某些代謝產(chǎn)物的生成,有必要對發(fā)酵罐內(nèi)為環(huán)境進(jìn)行調(diào)整,比如補加酸堿以維持恒定的pH環(huán)境,補加cn以滿足微生物生長代謝的營養(yǎng)需要,這都要求對發(fā)酵過程的參數(shù)進(jìn)行實時控制和優(yōu)化。過程控制是保證發(fā)酵過程穩(wěn)定,降低成本,提高效益的主要手段之一。過程控制的兩個基本要素如下:1過程參數(shù)的測量與操作變量的調(diào)節(jié)。準(zhǔn)確的參數(shù)測量是了解和掌握過程當(dāng)前狀態(tài)的基礎(chǔ),操作變量的調(diào)節(jié)技術(shù)是實現(xiàn)控制的基本手段,這些都構(gòu)成過程控制的硬件2過程的模型化與控

7、制策略。通過模型可以將不同的過程參數(shù)動態(tài)的關(guān)聯(lián)起來,了解這些參數(shù)反映的過程變化情況。根據(jù)控制目標(biāo)和實際狀況的差別,可以采用合適的策略調(diào)節(jié)某些可以控制的參數(shù)。過程參數(shù)的測量是了解發(fā)酵過程的窗口??蓽y量的參數(shù)可分為環(huán)境參數(shù)和操作變量兩大類。在環(huán)境參數(shù)方面,Ph值,溫度,溶氧值,出口co2濃度的在線測量技術(shù)已經(jīng)成熟。菌體濃度和部分底物或產(chǎn)物的在線測量技術(shù)也已經(jīng)基本成熟。操作變量方面,攪拌轉(zhuǎn)速,通氣量,冷卻水流量,罐壓,酸堿泵流速,流加速率等的

8、測定和控制也已經(jīng)不存在技術(shù)問題。只要知道了間歇培養(yǎng)時細(xì)胞生長的動力學(xué)模型和細(xì)胞生長和次級代謝生成兩者之間的關(guān)系,就可以通過參數(shù)優(yōu)化控制的方式進(jìn)行發(fā)酵過程的優(yōu)化操作如何實現(xiàn)基因工程菌的高效表達(dá)要實現(xiàn)基因工程菌的高效表達(dá),第一要選擇適宜的啟動子。真核細(xì)胞的啟動子不能被大腸桿菌RNA聚合酶識別,因此必須將外源基因置于大腸桿菌啟動子控制下。翻譯水平影響外源基因表達(dá)的重要因素是翻譯起始區(qū)。二目的基因的不溶性高效表達(dá)。采用目的蛋白與帶純化標(biāo)記的細(xì)菌

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