5 食用菌接種與培養(yǎng)技術

1、第五章 接種與培養(yǎng),第一節(jié) 母種轉管及培養(yǎng),第二節(jié) 再生母種擴繁成原種,第四節(jié) 菌種質量鑒定菌種保存,第三節(jié) 栽培種接種與培養(yǎng),教學目的：熟練掌握各級培養(yǎng)基接種的方法 ，并掌握菌種質量鑒定與保藏的方法。,教學重點：培養(yǎng)基接種 。,第一節(jié) 母種轉管及培養(yǎng),,一、母種轉管無菌操作技術要點：1.將接種用品及原始母種放入接種箱內。2.用菇保1號、氣霧消毒盒（2g/m3）或甲醛進行熏蒸，時間要在30分鐘以上。3.手、臺面、接

2、種工具、母種管用酒精棉球擦試消毒。4.點燃酒精燈，火焰灼燒接種鎬至燒紅后冷卻，凡能伸進試管的桿部均過火滅菌。,5．左手大拇指和其他四指并攏握住菌種管和待接試管，斜面向上，并保持水平。,6．右手小指、無名指及手掌拔掉棉塞，用火焰灼燒試管口并不斷攪動。,7．先棄去前端1cm處，然后用接種鎬快速移取黃豆粒大小的菌種入待接試管斜面培養(yǎng)基中央。,8．灼燒試管口，并將棉塞在火焰上迅速過一下然后塞上。 9．用接種鎬挑持住母種管，另一只

3、手換待接管，重復上述操作。 10．收拾臺面。 11.貼標簽,二、母種培養(yǎng)　　接種后，于22℃左右的環(huán)境避光培養(yǎng)，每天都有要仔細觀察，對污染的試管及時挑除。原始母種的培養(yǎng)初期一定要天天檢查，以免菌絲將污染處蓋住，難以挑出，造成巨大損失。 一般7-10d左右可以長滿管。長滿管后，一部分用于擴繁，另一部分用于保存。于+5℃的水箱冷藏層中至少可以保存2個月。,作業(yè) 1.簡述接菌前須作的準備工作。（包括

4、藥品、接種工具、如何消毒等工作） 2.詳述母種培養(yǎng)基的制作過程。 3.詳述母種轉管的動作要領。,第二節(jié) 再生母種擴繁成原種,一、原種接種技術操作要點少量原種接種：可利用接種箱。(1)手、母種管、接種工具酒精消毒，點燃酒精燈(2)左手持母種管、右手持接種鎬并灼燒(豎直、橫拉)(3)拔掉棉塞并用手夾住，灼燒管口，并以火焰封住管口(4)將接種鎬伸進母種管內，待冷涼，棄除前端1cm處的培養(yǎng)基，接種鎬一經滅菌后不許接

5、觸未經滅菌的物體。,(5)將母種菌種切成5段，迅速移進原種瓶口，菌種不能掉外面（同時另一人將瓶口打開，并以火焰封口）。 (6)要以原種瓶口迎母種管口，不能反向。,封瓶口,示接種塊位置,大量原種制作：常利用塑料接種帳或接種室，按照無菌操作規(guī)程，三人配合。一人挖取菌種，一人掀瓶口，一人擺瓶。,二、培養(yǎng) 準確貼好標簽， 接種后于22℃左右的培養(yǎng)室暗光培養(yǎng)。培養(yǎng)的最初10d，每天都要檢查，及時挑選污染菌種瓶，妥善處理。及時挑選了

6、污染菌種瓶，檢查生長情況并進行詳細記錄。培養(yǎng)室不能過于干燥，濕度要保持在60%左右，否則菌種瓶失水過快。,第三節(jié) 栽培種接種與培養(yǎng),栽培種制作的接種方法，與原種相似。一般罐頭瓶栽培種制作也是三人配合，用接種匙挖取菌種。配合熟練，可在短時間內大量接種，效果也很好。 如果栽培種制作采用塑料袋做容器，則接種時采取四人配合的形式。一人負責挖取菌種，一人負責把持袋口，另外兩個人負責打開袋口和封口。封口時可利用皮套或釘書釘封口。培養(yǎng)方法基本同

7、原種原始培養(yǎng)方法。,第四節(jié) 菌種質量鑒定菌種保存,一、菌種質量鑒定 菌種質量的優(yōu)劣，不單純是盈利問題，而且是能否在激烈的菌種銷售競爭中求得生存的問題，是關系到廣大栽培者的生產利益的大問題。作為菌種生產者要有高度的責任心，也要有職業(yè)道德，嚴格把住菌種質量關執(zhí)行跟蹤服務，從菇農那里獲得信息反饋，使菌種質量精益求精。作為菌種購買者也應懂得菌種質量鑒定的一般方法，確保生產成功,1.外觀鑒定很多栽培者都直接購買栽培種或購買原種用于擴接栽培

8、種或用生產栽培。具體的選購方法歸納起看即“提、聞、看”三個字。提：即用手抓住棉花塞輕輕提起，看棉花塞松緊適度。過松或過緊均達不到過濾空氣的目的，從而無法保證制作優(yōu)質菌種。同時也可手測重量判斷失水情況和菌齡。,聞：在一批菌種中隨機抽樣檢查。把棉花塞拔起后，半瓶口、袋口或管口靠近鼻子嗅菌種氣味。若菌種中散發(fā)出酸、霉、臭等氣味，則說明菌種有雜菌的污染，不是純培養(yǎng)的菌絲,純培養(yǎng)的菌種具有特殊香味。,看：首先是看菌種外觀，看是否破管、破瓶、破袋

9、。再看菌種是否“純、正、壯、潤”。,2.液體鑒定在同PDA培養(yǎng)基同樣料的液體培養(yǎng)基中接種待鑒定菌種，如培養(yǎng)后出現渾濁或稀薄現象，說明該菌種不可用于栽培，如結果為潔白的菌絲球，該菌種可以放心用于生產。,3.出菇試驗大規(guī)模生產前，進行出菇試驗，是保證生產成功的重要方面。只有出菇試驗，才能夠最終直觀地體現菌種質量情況。大規(guī)模生產基地，應該有示范場。,二、菌種的保藏菌種是主要生產資料，必須很好保藏。做到不死亡、不衰退、不被雜菌污染，能長期

10、在生產上應用。菌種一般都以試管種形式保藏。保藏的基本原理是使菌絲的生理代謝活動盡量降低，通常采用的手段是低溫、干燥和減少氧氣供應。,1.斜面低溫保藏首先將要保存的菌種移接到適宜的斜面培養(yǎng)基上。一般不宜用營養(yǎng)貧乏的合成培養(yǎng)基，而要用營養(yǎng)豐富的半合成培養(yǎng)基，瓊脂用量加到2.5%。并增加每管培養(yǎng)基的裝量，不少于12ml。每隔3-4個月轉管一次。如用膠塞石蠟封口，轉管期可延遲至6個月。,2.液體石蠟保藏也叫礦油保藏。在斜面菌種上灌注液體石蠟