生化分離

1、第1章緒論緒論生化分離技術：生物技術下游加工過程生化物質的提取分離精制，是生物化學工程的一個重要組成部分。從發(fā)酵液或酶反應液或動植物細胞培養(yǎng)液中分離、純化生物產(chǎn)品的過程。生物技術下游加工過程的意義：基因工程產(chǎn)物，提高了產(chǎn)量、降低了成本。但是下游加工過程是十分艱難代價：原料稀溶液產(chǎn)物高純度高活性。生化分離的特點：組分復雜：細胞細胞碎片、蛋白質、核酸、脂類、糖類，無機鹽等濃度低：青霉素：3.6%、慶大霉素：0.2%，胰島素：0.001%分離

2、過程中容易失活：pH，離子強度、溫度等變化性質不穩(wěn)定：空氣氧化、微生物污染、蛋白質水解等具經(jīng)驗性，均一性的相對性下游加工過程遵循的原則：時間短、溫度低、pH適中、勤清洗、消毒。第2章細胞分離破碎細胞分離破碎預處理的目的：改變發(fā)酵液的物理性質，促進從懸浮液中分離固形物的速度，實現(xiàn)工業(yè)規(guī)模的過濾；盡可能使產(chǎn)物轉入便于后處理的相中（一般是液相）；同時除去發(fā)酵液中部分雜質。原理：改變發(fā)酵液的膠體狀態(tài)、使產(chǎn)物轉相（一般為液相）方法：在活性物質穩(wěn)定

3、性范圍內，酸化和加熱以降低發(fā)酵液的黏度；加入絮凝劑，使細胞或溶解的大分子聚結成較大顆粒。重力沉降：是化工過程中常用的氣固、液固、液液分離的手段，在生物下游加工過程也是最基本的分離技術之一。特點：簡便易行，缺點：細胞菌體體積小，沉降速度慢凝聚：加入中性鹽，降低雙電層排斥作用。由壓縮雙電層機理作用，膠體脫穩(wěn)引起的聚集成為凝聚。絮凝：加入聚丙烯酸酰胺、聚乙烯亞胺，由天然高分子物質吸附架橋作用使微粒相互黏結的過程是絮凝。作用：絮凝和凝集加快重力

4、沉降，大大提高過濾分離單元的速度和質量。離心沉降：分離細胞，除去或回收菌體或細胞、血球細胞、細胞器、病毒、蛋白質的分離。（一）差速離心法原理：采用逐漸增加離心速度或低速和高速交替進行離心，使沉降速度不同的顆粒在不同的分離速度及不同的離心時間下分批分離的方法，稱為差速離心法。常用于從組織勻漿中分離細胞和病毒。（二）速率—區(qū)帶離心原理：不同顆粒之間存在沉降系數(shù)差時，在一定離心力作用下，顆粒各自以一定速度沉降，在密度梯度不同區(qū)域上形成區(qū)帶的方

5、法。介質梯度應預先形成，介質的最大密度要小于所有樣品顆粒的密度。可用來分離核酸、蛋白質、核糖體亞基及其它成分不同破碎方法的比較第三章第三章初級分離初級分離泡沫分離：根據(jù)表面吸附的原理利用通氣鼓泡在液相中形成的氣泡為載體對液相中的溶質或顆粒進行分離。泡沫分餾：分離對象：真溶液、可溶解物質、表面活性劑金屬粒子、陰離子、蛋白質、酶條件：必須能和某類表面活性劑結合泡沫浮選：不溶解物質礦物浮選、粗粒浮選、微粒浮選、離子浮選、分子浮選、沉淀浮選、吸