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1、項目名稱:重要病毒的入侵機制研究重要病毒的入侵機制研究首席科學(xué)家:胡勤學(xué)胡勤學(xué)中國科學(xué)院武漢病毒研究所中國科學(xué)院武漢病毒研究所起止年限:20102010年1月20142014年8月依托部門:中國科學(xué)院中國科學(xué)院結(jié)構(gòu)域晶體結(jié)構(gòu)已經(jīng)解析,但對受體選擇使用的機制仍然了解甚少;gB有可能在融合中起關(guān)鍵作用,但僅有g(shù)B是不能完成HSV膜融合的;gH、gL在所有皰疹病毒中高度保守,并且對病毒的入侵與膜融合是必需的;目前對病毒入侵過程中g(shù)B、gD、g
2、H、gL如何協(xié)同作用還不清楚。3、HCoVHKU、JEV、HSV包膜蛋白與受體互作的包膜蛋白與受體互作的結(jié)構(gòu)基構(gòu)基礎(chǔ)和入侵抑制仍是未知和入侵抑制仍是未知領(lǐng)域HCoVHKUS蛋白、JEVE蛋白和HSVgB、gD、gH、gL蛋白是病毒入侵的關(guān)鍵蛋白,除對gD、gB胞外結(jié)構(gòu)域晶體結(jié)構(gòu)進行了解析外,對HCoVHKUS蛋白、JEVE蛋白和HSVgH、gL蛋白的結(jié)構(gòu)仍不了解,也尚無針對HCoVHKU、JEV、HSV的入侵抑制劑。揭示以上包膜蛋白與受
3、體互作的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)將為藥物和疫苗設(shè)計提供理想的靶位點。【研究內(nèi)容研究內(nèi)容】1、病毒的、病毒的細胞受體及受體介胞受體及受體介導(dǎo)的內(nèi)化的內(nèi)化1.1、HCoVHKU入侵受體、入侵受體、靶細胞入侵途徑胞入侵途徑的研究的研究由于缺少細胞培養(yǎng)模型,HCoVHKU侵染和致病機制的研究受到很大的局限。我們將通過建立多種假病毒系統(tǒng),結(jié)合膜蛋白熒光差異2D技術(shù)分析A549、NIH3T3等細胞膜蛋白的差異點,用標記及磁珠免疫共沉淀的方法,尋找與冠狀病毒S蛋白和
4、或與其粘附相關(guān)的分子(如HLACw0702)相互作用的病毒細胞受體或輔助因子,并確認這些蛋白的功能及與S蛋白相互作用方式。包膜病毒結(jié)合相應(yīng)受體后,可以直接和細胞膜融合(如HIV),也可以經(jīng)內(nèi)化后與胞內(nèi)體進行膜融合(如流感病毒,HIV)。有些冠狀病毒采用直接膜融合途徑,而有些冠狀病毒采用胞內(nèi)體膜融合途徑。本課題將對HCoVHKU的膜融合途徑進行詳盡的研究。1.2、JEV病毒受體分子的病毒受體分子的發(fā)現(xiàn)發(fā)現(xiàn)與確定與確定JEV能夠感染多種細胞
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