實驗報告-不同因素對酶的影響_第1頁
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文檔簡介

1、實驗報告課程名稱:指導老師:成績:實驗名稱:實驗類型:分離鑒定實驗同組學生姓名:一、實驗目的和要求(必填)二、實驗內容和原理(必填)三、主要儀器設備(必填)四、操作方法和實驗步驟五、實驗數據記錄和處理六、實驗結果與分析(必填)七、討論、心得Ⅰ.Ⅰ.酶的基本性質酶的基本性質——底物專一性底物專一性一、實驗目的和要求一、實驗目的和要求1.了解酶的專一性。2.掌握驗證酶的專一性的基本原理及方法。3.學會排除干擾因素,設計酶學實驗。二、實驗基本

2、原理二、實驗基本原理酶是一種具有催化功能的蛋白質。酶蛋白結構決定了酶的功能——酶的高效性,酶催化的反應(酶促反應)要比相應的沒有催化劑的反應快1031017倍。酶催化作用的一個重要特點是具有高度的底物專一性,即一種酶只能對某一種底物或一類底物起催化作用,對其他底物無催化反應。根據各種酶對底物的選擇程度不同,它們的專一性可以分為下列幾種:1.相對專一性一種酶能夠催化一類具有相同化學鍵或基團的物質進行某種類型的反應。2.絕對專一性:有些酶對

3、底物的要求非常嚴格只作用于一種底物,而不作用于任何其他物質。如脲酶只能催化尿素進行水解而生成二氧化碳和氨。如麥芽糖酶只作用于麥芽糖而不作用其它雙糖,淀粉酶只作用于淀粉,而不作用于纖維素。3.立體異構專一性有些酶只有作用于底物的立體異構物中的一種,而對另一種則全無作用。如酵母中的糖酶類只作用于D型糖而不能作用于L型的糖。本實驗以唾液淀粉酶、蔗糖酶對淀粉、蔗糖水解反應的催化作用來觀察酶的專一性。采用Benedict試劑檢測反應產物。Bene

4、dict試劑是堿性硫酸銅溶液,具有一定的氧化能力,能與還原性糖的半縮醛羥基發(fā)生氧化還原反應,生成磚紅色氧化亞銅沉淀。Na2CO32H2O2NaOHH2CO3CuSO42NaOHCu(OH)2Na2SO4還原糖(—CHO—C=O)2Cu(OH)2Cu2O(磚紅色或黃色)2H2O糖的氧化產物在分子結構上,淀粉幾乎沒有,而蔗糖、棉子糖全無半縮醛基,它們均無還原性,因此它專業(yè):姓名:學號:日期:地點:裝訂線生物化學實驗(甲)酶的基本性質實驗——

5、底物專一性劑、激活劑和抑制、最適溫度注:可增加一組蔗糖酶液經100℃加熱3min處理后的樣品對照組。六、結果分析討論各試管觀察結果依次是:(一):1號藍綠色,2號藍色,3號藍色Benedict試劑是堿性硫酸銅溶液,具有一定的氧化能力,能與還原性糖的半縮醛羥基發(fā)生氧化還原反應,生成磚紅色氧化亞銅沉淀。3只試管都為藍色說明幾只試管中都沒有果糖和葡萄糖,說明在不加酶時,淀粉和蔗糖不易水解。試劑無干擾因素的存在。(1號試管是藍綠色可能是因為有少

6、部分的淀粉水解)(二):1號土黃色,2號黃綠色,3號藍色加入唾液淀粉酶,1號試管底物是淀粉,所以很容易水解成葡萄糖,與Benedict試劑共熱,即產生紅棕色Cu2O沉淀。所以1號顏色變化比較大。(2號可能是因為蔗糖在37℃恒溫水浴中也有少部分水解,所以顏色變化,但變化不明顯。)總的來看可以看出唾液淀粉酶只對淀粉有催化活性,不能催化蔗糖水解,具有對淀粉的底物專一性。3號是對照。(三):1號藍色,2號紅棕色,3號藍色加入蔗糖酶,2號試管底物

7、是蔗糖,所以很容易水解成果糖和葡萄糖,與Benedict試劑共熱,即產生紅棕色Cu2O沉淀。所以2號顏色變化比較大。(1號可能是因為淀粉在37℃恒溫水浴中也有部分水解,所以有顏色變化,但變化不明顯。)從這三支試管看出蔗糖酶只對蔗糖的水解有催化作用,對淀粉無催化作用,具有對蔗糖的底物專一性。3號是對照。七、思考題1觀察酶專一性實驗為什么要設計這3組實驗?每組各有何意義?蒸餾水有何用?第一組作為整個實驗的空白對照組,檢測Benedict試劑

8、對實驗結果的顏色有何影響,排除干擾因素的存在。第二組作為檢測淀粉酶的專一性實驗組,第三組作為檢測蔗糖酶的專一性的實驗組。蒸餾水作為每一個組中的空白對照,與組內其余兩組進行對照。2將酶液煮沸10min后,重做二、三的操作,觀察有何結果?各試管都為藍色,因為酶在煮沸過程中已經變性,失去催化活性,故不能催化各自對應底物的水解反應。3在此實驗中,為什么要用0.5%淀粉(0.3%NaCl)溶液?0.3%NaCl的作用是什么?0.3%NaCl中的C

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