微生物培養(yǎng)及藥敏結(jié)果解讀內(nèi)容

1、微生物培養(yǎng)、藥敏試驗(yàn)的流程及意義微生物培養(yǎng)、藥敏試驗(yàn)的流程及意義一、微生物培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)的總述一、微生物培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)的總述微生物培養(yǎng)就是使用體外試驗(yàn)的方法檢測(cè)可能導(dǎo)致感染的病原菌，并給以藥敏結(jié)果，為臨床醫(yī)生針對(duì)某一特定的臨床感染提供依據(jù)。而藥敏試驗(yàn)則是承接微生物培養(yǎng)的一項(xiàng)工作，即對(duì)于培養(yǎng)得到的病原菌進(jìn)行體外試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)菌對(duì)于抗菌藥物的耐藥性，來(lái)預(yù)測(cè)抗菌藥物的臨床治療效果，從而為臨床醫(yī)生提供選用抗菌藥物的依據(jù)來(lái)治療感染。對(duì)于檢測(cè)到的可能的

2、致病菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)時(shí)選擇的藥物是參照美國(guó)的CLSI推薦的標(biāo)準(zhǔn)制定的。尤其，使用全自動(dòng)微生物分析儀進(jìn)行藥敏試驗(yàn)時(shí)有固定的藥敏組合，不是人為可以隨意添加或減少的。（一）微生物的培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)的流程基本為：①將標(biāo)本進(jìn)行處理（不是所有的標(biāo)本都需要處理）；②將標(biāo)本接種于不同的培養(yǎng)皿中在不同條件的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)（不同的標(biāo)本所含菌的種類不同，不同菌的生長(zhǎng)條件不同，因此需要接種于不同的培養(yǎng)皿中）；③24h后觀察培養(yǎng)皿中細(xì)菌的生長(zhǎng)情況：a.此時(shí)若無(wú)細(xì)菌

3、培養(yǎng)，繼續(xù)放回培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，若仍然無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)則判定為陰性結(jié)果，因此陰性結(jié)果出具的時(shí)間為48h以后。b.若有細(xì)菌生長(zhǎng)，要根據(jù)形態(tài)和氣味等對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的判定，若能判定出細(xì)菌的種類，則進(jìn)行相應(yīng)的藥敏試驗(yàn)。貼有藥敏片的培養(yǎng)皿在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后進(jìn)行藥敏結(jié)果的解讀，然后報(bào)告結(jié)果，這種微生物培養(yǎng)及藥敏結(jié)果報(bào)告出具的時(shí)間就是48h以后。由于不同的細(xì)菌的生長(zhǎng)的速度不同，有些細(xì)菌在培養(yǎng)24h后不能完全判定結(jié)果甚者24h培養(yǎng)后無(wú)法觀察到明顯的細(xì)菌

4、生長(zhǎng)的則需要繼續(xù)培養(yǎng)24h，即連續(xù)培養(yǎng)48h后同樣根據(jù)菌落的形態(tài)、氣味等來(lái)觀察判定細(xì)菌的種類然后進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。這種微生物培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)結(jié)果出具需要72h以后。而血液、骨髓等標(biāo)本則是利用不同于上述培養(yǎng)方式的方法進(jìn)行培養(yǎng)。它有專門(mén)的培養(yǎng)瓶和儀器。這種儀器會(huì)自動(dòng)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)瓶中的變化來(lái)判定有無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)，若有細(xì)菌生長(zhǎng)儀器會(huì)發(fā)出警報(bào)。在培養(yǎng)5天內(nèi)任何時(shí)間發(fā)出警報(bào)的培養(yǎng)瓶都要抽取瓶中的物質(zhì)在培養(yǎng)皿中進(jìn)行接種培養(yǎng)，同樣在菌種鑒定后進(jìn)行藥敏試驗(yàn)；若在培養(yǎng)5

5、天內(nèi)不發(fā)出警報(bào)的培養(yǎng)瓶則視為陰性結(jié)果。因此血培養(yǎng)出具結(jié)果的時(shí)間為5～7天。菌落的鑒定需要有雄厚的工作經(jīng)驗(yàn)和熟練的相關(guān)基礎(chǔ)知識(shí)。常規(guī)鑒定的方法有形態(tài)特征和理化特性。形態(tài)特征包括顯微形態(tài)和培養(yǎng)特征；理化特性包括營(yíng)養(yǎng)類型、碳氮源利用能力、各種代謝反應(yīng)、酶反應(yīng)和血清學(xué)反應(yīng)。在微生物室學(xué)習(xí)時(shí)發(fā)現(xiàn)，很多時(shí)候在不太確定細(xì)菌的種類時(shí)，檢驗(yàn)人員也會(huì)結(jié)合理化特性來(lái)判定細(xì)菌種類。（二）革蘭氏染色、應(yīng)用及意義由于微生物的生長(zhǎng)有時(shí)間限定，因此微生物培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)

6、沒(méi)有急查的說(shuō)法。最快的結(jié)果也只能是通過(guò)涂片來(lái)判定有無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)和細(xì)菌染色后的顏色和形態(tài)，來(lái)給臨床醫(yī)生的用藥提供依據(jù)。革蘭氏陽(yáng)性菌和陰性菌因?yàn)榧?xì)胞壁的結(jié)構(gòu)不同，在革蘭氏染色時(shí)染成不同的顏色。革蘭氏陽(yáng)性菌顯示紫色、革蘭氏陰性菌顯紅色或粉色。由于細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)不同，導(dǎo)致這兩類細(xì)菌在染色性、抗原性、毒性、對(duì)某些藥物的敏感性等方面均有較大差異。一般情況下，大多數(shù)化膿性球菌都屬于革蘭氏陽(yáng)性菌，它們能產(chǎn)生外毒素使人致病，而大多數(shù)腸道菌多屬于革蘭氏陰性菌，

7、它們差生內(nèi)毒素，靠?jī)?nèi)毒素使人致病。在治療上，大多數(shù)革蘭氏陽(yáng)性菌對(duì)青霉素敏感（結(jié)核桿菌對(duì)青霉素不敏感），革蘭氏陰性菌對(duì)青霉素不敏感（但奈瑟氏菌中德流行性腦膜炎雙球菌和淋病雙球菌對(duì)青霉素敏感），①感染菌對(duì)同一種藥物的MIC越小，效果越好；②不同種抗菌藥物之間MIC無(wú)可比性；③目前很多儀器報(bào)告的是檢測(cè)折點(diǎn)，而不是真正的MIC。5、培養(yǎng)陽(yáng)性的細(xì)菌都需要用抗菌藥物治療嗎？①不是的；②培養(yǎng)陽(yáng)性?感染，可能為污染（血培養(yǎng)），可能為定植（痰培養(yǎng)）；③任

8、何結(jié)果必須結(jié)合臨床情況進(jìn)行評(píng)價(jià)（很重要）；④感染部位的清創(chuàng)、引流、換藥比使用抗菌藥物更加重要；⑤改善患者全身情況：器官功能支持，糾正酸堿平衡，電解質(zhì)紊亂，低蛋白血癥，高血糖等。6、選擇藥敏報(bào)告敏感的藥物，為什么臨床治療無(wú)效？①體外藥敏試驗(yàn)只能預(yù)測(cè)體內(nèi)治療效果，并不等同；一般來(lái)說(shuō)，耐藥＝治療無(wú)效；敏感≠治療有效；②可能不是真正的致病菌（污染或定植菌）；③細(xì)菌本身因素（如誘導(dǎo)耐藥，生物被膜）；④感染部位與藥代動(dòng)力學(xué)因素；⑤細(xì)菌的MIC，給藥

9、劑量和用藥方式；⑥藥敏試驗(yàn)藥物中有些藥物單獨(dú)使用無(wú)效，但可以與其他藥物聯(lián)合用藥；⑦藥物劑型及生物利用度（純品、商品）。7、涂片鏡檢結(jié)果與培養(yǎng)結(jié)果不吻合？①涂片鏡檢是報(bào)告所有檢見(jiàn)的細(xì)菌，而培養(yǎng)的目的是檢出致病菌因此會(huì)產(chǎn)生涂片和培養(yǎng)結(jié)果不一致的情況；②一些苛氧菌需在特殊的環(huán)境或培養(yǎng)基上才能生長(zhǎng)，因此可能在培養(yǎng)后才能得到。8、取的明顯就是膿液標(biāo)本，為何鑒定報(bào)告為無(wú)菌生長(zhǎng)？①我們做的是有氧培養(yǎng)，膿液可能為厭氧菌感染。②可能細(xì)菌被大量的中性粒細(xì)胞

10、吞噬。9、鑒定結(jié)果明明寫(xiě)著四聯(lián)球菌、革蘭氏陽(yáng)性桿菌，為何沒(méi)有藥敏結(jié)果？①四聯(lián)球菌為微球菌，一般不引起人體致病，為非致病菌，故考慮污染可能；②藥敏結(jié)果參照CLSI標(biāo)準(zhǔn)，目前革蘭氏陽(yáng)性菌沒(méi)有參照標(biāo)準(zhǔn)，故暫不能做藥敏試驗(yàn)，若需治療可參照陽(yáng)性球菌用藥。10、一般培養(yǎng)不是三天出結(jié)果嗎，今天第四天了怎么還沒(méi)出來(lái)？一般培養(yǎng)經(jīng)48小時(shí)后，即第三天出報(bào)告，若需分離致病菌的則第四天出報(bào)告。11、今天的培養(yǎng)結(jié)果怎么與前天的不一樣？①取材是否規(guī)范。②痰標(biāo)本，有