檢索課題

1、一、一、(一)檢索課題：檢索課題：一種侵染秋海棠的PVY病毒的鑒定（二）數(shù)據(jù)庫：（二）數(shù)據(jù)庫：中國學(xué)位論文（1）（三）檢索途徑：（三）檢索途徑：關(guān)鍵詞（四）檢索提問式：（四）檢索提問式：馬鈴薯Y病毒檢測鑒定（五）檢索結(jié)果：（五）檢索結(jié)果：1、作者作者：鄭世玲題目題目：貴州3種馬鈴薯病毒的DASELISA檢測及分子鑒定期刊名期刊名：中國學(xué)術(shù)期刊網(wǎng)絡(luò)出版總庫機(jī)構(gòu)：機(jī)構(gòu)：貴州3種馬鈴薯病毒的DASELISA檢測及分子鑒定語言語言：中文摘要摘要

2、：馬鈴薯是一種重要的全球性的經(jīng)濟(jì)作物，馬鈴薯病毒病是影響馬鈴薯生產(chǎn)的重要因子，馬鈴薯病毒是引起馬鈴薯退化的根本原因。馬鈴薯X病毒(PotatovirusX，PVX)、馬鈴薯Y病毒(PotatovirusY，PVY)、馬鈴薯卷葉病毒(Potatoleafrollvirus，PLRV)是嚴(yán)重危害我國馬鈴薯產(chǎn)量的三種主要病毒。本研究從貴州省六縣一市的馬鈴薯種植區(qū)，對不同馬鈴薯品種的3種馬鈴薯病毒的發(fā)生癥狀進(jìn)行了調(diào)查，并對采集的202份相關(guān)樣品

3、進(jìn)行了雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測定(DoubleAntibodySwichEnzymeLinkedImmunosbentAssay，DASELISA)的檢測技術(shù)的研究，從而建立了一套完整的酶聯(lián)免疫吸附測定(EnzymeLinkedImmunosbentAssay，ELISA)檢測PVX、PVY和PLRV程序。根據(jù)PVX、PVY和PLRV的外殼蛋白基因序列，分別設(shè)計(jì)合成了三對特異性引物。分別從DASELISA檢測的感染馬鈴薯X病毒、馬鈴薯Y

4、病毒和馬鈴薯卷葉病毒為陽性的馬鈴薯葉片為試材，對馬鈴薯Y病毒采取反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(ReverseTranionPolymerasechainreaction，RTPCR)和免疫捕獲反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(ImmunocaptureRTPCR，ICRTPCR)方法對PVY進(jìn)行了分子鑒定，測序得到兩條PVY外殼蛋白(coatprotein，CP)基因序列，長度為804bp。通過和其它己知PVY分離物CP基因序列的同源性比較和氨基酸序列差異

5、性分析，并建立了PVYCP核苷酸序列的系統(tǒng)發(fā)育樹及其類型的分析，序列已經(jīng)登錄了NCBI(GenBank登錄號分別為EF063710與EF063712)。用ICRTPCR方法對PVX、PLRV進(jìn)行了分子鑒定，測序得到兩條PVXCP與PLRVCP基因序列，長度分別為714bp和627bp，通過和其它已知分離物CP基因序列的同源性比較和氨基酸序列差異性分析，并建立了PVXCP、PLRVCP核苷酸序列的系統(tǒng)發(fā)育樹及其類型的分析，序列己經(jīng)登錄了N

6、ationalCenterfBiotechnologyInfmation(NCBI)，獲得GenBank登錄號分別為EF063709與EF063711。本文報(bào)道了三種簡捷、快速、靈敏、可靠的馬鈴薯病毒的檢測技術(shù)：ELISA、RTPCR和ICRTPCR檢測技術(shù)。ELISA可在不需提純病毒RNA的情況下實(shí)現(xiàn)對病毒的檢測，較RTPCR檢測技術(shù)快速、簡捷，更適合于大量樣品的檢測。ICRTPCR檢測技術(shù)與RTPCR檢測技術(shù)相比省去了病毒RNA的提

7、取這一煩瑣步驟，操作更簡單，靈敏度與RTPCR基本相同，而RTPCR與ICRTPCR檢測技術(shù)較ELISA檢測技術(shù)特異性更強(qiáng)。2、作者作者：李志勇題目題目：辣椒輕斑駁病毒和黃瓜花葉病毒分子鑒定與檢測技術(shù)期刊名期刊名：中國學(xué)術(shù)期刊網(wǎng)絡(luò)出版總庫機(jī)構(gòu)：機(jī)構(gòu)：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)，植物病理學(xué)，2005，碩士語言語言：中文摘要摘要：甜(辣)椒廣泛栽培于世界各地是重要的蔬菜之一。通常由病毒病造成甜椒減產(chǎn)達(dá)pGETeasy質(zhì)粒，轉(zhuǎn)入大腸桿菌并進(jìn)行測序。序列測定

8、結(jié)果與其他PVYCP基因序列比較，北京、青州和沈陽PVY分離物與類型Ⅲ其他分離物的核苷酸序列同源性分別為93.496.6％、92.094.0％、91.994.0％。依據(jù)PVY不同分離物的CP基因核苷酸序列同源性建立了PVY系統(tǒng)進(jìn)化樹。利用病毒的特異性引物，對TMV、CMV、PVY進(jìn)行了一步RT—PCR檢測，并以獲得的各自的重組質(zhì)粒為模板，PCR法合成了地高辛標(biāo)記的核酸探針，建立了三者的核酸斑點(diǎn)雜交檢測技術(shù)(Nucleicacidspot

9、hybridization，NASH)。一步RT—PCR檢測技術(shù)較常規(guī)RTPCR方法更加快捷，NASH檢測技術(shù)經(jīng)改進(jìn)，在不影響檢測效果的情況下，達(dá)到了簡便快速且成本降低的目的，使每個樣品的檢測成本降至約0.4元，此方法更適合大量樣品的檢測。依據(jù)這三種病毒檢測技術(shù)的研究結(jié)果，設(shè)計(jì)組裝了煙草主要三種病毒的NASH檢測試劑盒，使病毒檢測更為方便和快捷。4、作者作者：劉文洪題目題目：百合病毒的分子鑒定與重要病毒的檢測研究期刊名期刊名：中國學(xué)術(shù)期

10、刊網(wǎng)絡(luò)出版總庫機(jī)構(gòu)：機(jī)構(gòu)：浙江大學(xué)，微生物學(xué)，2003，碩士語言語言：中文摘要摘要：百合是重要的經(jīng)濟(jì)作物，在我國不僅有悠久的栽培歷史，近年來的栽培規(guī)模不斷擴(kuò)大，從國外大量引進(jìn)適合作為鮮切花和高檔蔬菜的品種也越來越多，在此同時，百合遭受病毒侵染和衰退的現(xiàn)象也越來越嚴(yán)重。本研究對侵染我國百合的植物病毒進(jìn)行了系統(tǒng)研究，結(jié)果表明黃瓜花葉病毒(CMV)、百合無癥病毒(LSV)、百合斑駁病毒(LMoV)是侵染百合的主要病毒病原，李壞死環(huán)斑病毒(PN

11、RSV)在百合上也有發(fā)生。同時，通過RNA斑點(diǎn)雜交研究了LSV、PNRSV在我國百合上的發(fā)生情況。通過田間調(diào)查發(fā)現(xiàn)我國百合普遍受到病毒侵染，病毒病癥狀相當(dāng)復(fù)雜。寄主反應(yīng)實(shí)驗(yàn)表明，侵染百合的植物病毒的寄主范圍往往都很窄，難以通過寄主反應(yīng)對它們進(jìn)行鑒定。用ELISA檢測發(fā)現(xiàn)：CMV在我國百合上普遍發(fā)生，在64個檢測的樣品中有25個受到CMV的侵染，侵染率為39.1％；電鏡檢測結(jié)果表明在75個樣品中有58個樣品被線狀病毒侵染，侵染率達(dá)77.3

12、％；組織病理學(xué)觀察結(jié)果顯示：在40個被線狀病毒侵染的樣品中有27個樣品檢測到風(fēng)輪狀內(nèi)含體，表明受到馬鈴薯Y病毒屬(Potyvirus)病毒成員的侵染，侵染率達(dá)67.5％。利用RTPCR方法，從百合上獲得2個CMV分離物(CMVLS、CMVZH)的CP基因序列。序列同源性分析結(jié)果表明：CMVLS、CMVZH的CP基因序列與亞組Ⅰ和亞組Ⅱ成員的CP基因序列同源性分別為88.2％～99.7％和68.6％～78.3％；CMVLS和CMVZH的C

13、P基因氨基酸序列與亞組Ⅰ成員和亞組Ⅱ成員CP基因氨基酸序列的同源性分別為94.1％～99.1％和65.7％～78.5％，CMVLS和CMVZH均屬于亞組Ⅰ成員；進(jìn)一步對不同來源的CMV分離物的系統(tǒng)進(jìn)化樹分析結(jié)果表明：來自各地百合上的CMV分離物在進(jìn)化樹中單獨(dú)成簇，形成明顯的株系分化趨勢，侵染百合的出現(xiàn)寄主適應(yīng)性變異現(xiàn)象。利用RTPCR方法，從百合上獲得2個LMoV分離物(LMoVG、LMoVX)的3′末端cDNA片段。序列同源生分析結(jié)果

14、表明：LMoVG、LMoVX與已報(bào)道的百合斑駁病毒分離物核苷酸序列的同源性為85.9％99.6％，NIb基因序列的同源性為84.7％～100.0％，NIb基因氨基酸序列的同源性為82.9％～100.0％，CP基因序列同源性為85.9％～100.0％、CP基因氨基酸序列同源性為87.0％～100.0％，3′UTR區(qū)核苷酸序列同源摘要性為93.1%一100.0%。用于侵染百合和郁金香的Po鉚l’rus在分類上尚處于混亂不清的現(xiàn)狀，本研究結(jié)果