淺談校準曲線

1、淺談校準曲線淺談校準曲線校準曲線是描述待測物質濃度或量與檢測儀器響應值或指示量的校準曲線是描述待測物質濃度或量與檢測儀器響應值或指示量的定量關系的曲線。根據(jù)朗伯定量關系的曲線。根據(jù)朗伯——比耳定律，一束單色光通過一定厚比耳定律，一束單色光通過一定厚度吸光池的稀溶液時，吸光度與吸光物質（被測定的物質）的濃度度吸光池的稀溶液時，吸光度與吸光物質（被測定的物質）的濃度成正比。若以吸光度為縱軸，被測物質的含量為橫軸作圖，應得到成正比。若以吸光度

2、為縱軸，被測物質的含量為橫軸作圖，應得到一通過坐標原點的直線，這條直線既校準曲線（工作曲線或標準曲一通過坐標原點的直線，這條直線既校準曲線（工作曲線或標準曲線）。理論上講，自變量被測物質的含量與因變量吸光度是呈一次線）。理論上講，自變量被測物質的含量與因變量吸光度是呈一次線性函數(shù)關系，實際上，兩變量僅有直線趨勢，而且當標準溶液的線性函數(shù)關系，實際上，兩變量僅有直線趨勢，而且當標準溶液的濃度過大時，直線的上端將無直線趨勢?，F(xiàn)就工作中，校準

3、曲線的濃度過大時，直線的上端將無直線趨勢?，F(xiàn)就工作中，校準曲線的繪制，相關系數(shù)檢驗及截距檢驗、斜率檢驗，談點膚淺認識。繪制，相關系數(shù)檢驗及截距檢驗、斜率檢驗，談點膚淺認識。一、校準曲線的繪制一、校準曲線的繪制在實際工作中，不同濃度的標準溶液系列，用分光光度計測定在實際工作中，不同濃度的標準溶液系列，用分光光度計測定對應的吸光度是個隨機變量，以吸光度為縱軸，標準溶液濃度為對應的吸光度是個隨機變量，以吸光度為縱軸，標準溶液濃度為橫軸，點繪兩

4、變量關系圖時呈直線趨勢。若所用試劑和蒸餾水等橫軸，點繪兩變量關系圖時呈直線趨勢。若所用試劑和蒸餾水等含有與標準溶液相同的物質，則標準溶液系列中的零管所對應的含有與標準溶液相同的物質，則標準溶液系列中的零管所對應的吸光度將不等于零。故繪制標準曲線時，必須考慮基體的影響。吸光度將不等于零。故繪制標準曲線時，必須考慮基體的影響。通常做法是：首先將標準溶液系列所對應的吸光度進行試劑空白通常做法是：首先將標準溶液系列所對應的吸光度進行試劑空白校正

5、（系統(tǒng)誤差校正），然后根據(jù)最小二乘法原理進行回歸分析，校正（系統(tǒng)誤差校正），然后根據(jù)最小二乘法原理進行回歸分析，繪制標準曲線。繪制標準曲線。在實際工作中經(jīng)常遇到標準曲線不成直線的情況，特別是當在實際工作中經(jīng)常遇到標準曲線不成直線的情況，特別是當吸光物質的濃度較高時，明顯的表現(xiàn)標準曲線向下或向上偏離。吸光物質的濃度較高時，明顯的表現(xiàn)標準曲線向下或向上偏離。?求得的兩個回歸方程如下求得的兩個回歸方程如下?表1：y=0.060x0.0136?

6、表2：y=0.060x0.000從以上兩方程可知：兩方程斜率相等，截距不等，表從以上兩方程可知：兩方程斜率相等，截距不等，表1求得求得的截距的截距0.0136表示試劑空白的大小，它是圍繞它的總體均值零表示試劑空白的大小，它是圍繞它的總體均值零呈正態(tài)分布的隨機變量，是實驗室誤差在呈正態(tài)分布的隨機變量，是實驗室誤差在y軸上的反映。實驗誤軸上的反映。實驗誤差越小，截距越趨進于零，若實驗中存在正的或負的系統(tǒng)誤差，差越小，截距越趨進于零，若實驗中

7、存在正的或負的系統(tǒng)誤差，則截距也將總是正值或負值，遇此情況就應查明原因消除系統(tǒng)誤則截距也將總是正值或負值，遇此情況就應查明原因消除系統(tǒng)誤差。同時截距值也是校正曲線是否通過坐標原點的尺度。差。同時截距值也是校正曲線是否通過坐標原點的尺度。3、回歸校準曲線的斜率檢驗、回歸校準曲線的斜率檢驗回歸校準曲線的斜率檢驗即檢驗分析方法的靈敏度，方法靈回歸校準曲線的斜率檢驗即檢驗分析方法的靈敏度，方法靈敏度是隨實驗條件的變化而變化的。在完全相同的分析條

8、件下，敏度是隨實驗條件的變化而變化的。在完全相同的分析條件下，僅由于操作中的隨機誤差導致的斜率變化不應超出一定的允許范僅由于操作中的隨機誤差導致的斜率變化不應超出一定的允許范圍，此范圍因分析方法的精度不同而異。圍，此范圍因分析方法的精度不同而異。校準曲線的繪制校準曲線的繪制校準曲線是描述待測物質濃度或量與檢測儀器響應值或指示量校準曲線是描述待測物質濃度或量與檢測儀器響應值或指示量的定量關系的曲線。的定量關系的曲線。根據(jù)朗伯根據(jù)朗伯——比

9、耳定律，一束單色光通過一定厚度吸光池的稀比耳定律，一束單色光通過一定厚度吸光池的稀溶液時，吸光度與吸光物質（被測定的物質）的濃度成正比。若溶液時，吸光度與吸光物質（被測定的物質）的濃度成正比。若以吸光度為縱軸，被測物質的含量為橫軸作圖，應得到一通過坐以吸光度為縱軸，被測物質的含量為橫軸作圖，應得到一通過坐標原點的直線，這條直線既校準曲線（工作曲線或標準曲線）。標原點的直線，這條直線既校準曲線（工作曲線或標準曲線）。理論上講，自變量被測物