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文檔簡介
1、中文使用說明書Nth2South生物素標記和化學發(fā)光檢測試劑盒目錄號:17175（17075，37549，37555，89880）該試劑盒由探針標記，雜交洗膜和化學發(fā)光檢測三部分組成17075（探針標記，純化和定量）Nth2South?生物素隨機引物Kit(該試劑盒含有足以完成10次標記反應的試劑，每次可合成至少1ug的生物素標記的探針)產(chǎn)品名稱：貨號產(chǎn)品描述17075Nth2South?生物素隨機引物Kit10次標記反應，每次可合成至
2、少1ug的生物素標記的探針)Kit組分:Heptanucleotidemix(5X)100ldNTPmix(5X)(1mMdATP1mMdTTP1mMdGTPdCTP)80lReactionBuffer(10X)50lDNAPolymeraseKlenowfragment(35exo)(10unitsl)10lNonbiotinylatedcontrolDNA(250ngl)5鐘3.12000rpm4離心15分鐘4.觀察沉淀情況，小心吸
3、取出上清，風干沉淀5.用冰預冷的70％乙醇洗滌一次，12000rpm4離心15分鐘，觀察沉淀情況，小心吸取出上清，風干沉淀6.50ulTE或RNA酶free的水溶解沉淀（－20℃或－70℃長期保存）探針定量（17075）操作步驟：1.500ul去離子水，260nm調零2.充分混勻2.5ul探針和47.5ul去離子水（即稀釋20倍）分光光度計測定OD260值3.定量計算公式：1OD260dsDNA=50μgml；樣品濃度（μgml）=OD
4、值X50X稀釋倍數(shù)樣品濃度μgul=OD260值X50X201000樣品濃度ngul=OD260值X50X20（注：如果稀釋20倍，實際測定的OD260值應該在0.02－0.05之間）Note:大多數(shù)情況下，由于各實驗室用來測定核酸的儀器不同，檢測靈敏度不同以及樣品中的一些干擾物質，測出的OD值往往是0甚至是負值，如果出現(xiàn)這種情況，再進行核酸定量沒有實際價值，因此，根據(jù)經(jīng)驗，保守估計，在每次至少合成1ug探針的前提下，在雜交時，探針的用
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