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1、1實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)6LB培養(yǎng)基的配置培養(yǎng)基的配置一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康拿鞔_培養(yǎng)基配置原理通過對LB培養(yǎng)基的配置,掌握配置培養(yǎng)的一般方法二、實(shí)驗(yàn)原理LB培養(yǎng)基是一種應(yīng)用最廣泛和最普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基。它含有酵母提取物、蛋白胨和NaCl。其中酵母提取物為微生物提供碳源和能源,磷酸鹽、蛋白胨主要提供氮源,而NaCl提供無機(jī)鹽。在配制固體培養(yǎng)基時(shí)還要加入一定量瓊脂作凝固劑。瓊脂在常用濃度下96℃時(shí)溶化,一般實(shí)際應(yīng)用時(shí)在沸水浴中或下面墊以石棉網(wǎng)煮沸溶化,以免瓊脂燒
2、焦。瓊脂在40℃時(shí)凝固,通常不被微生物分解利用。固體培養(yǎng)基中瓊脂的含量根據(jù)瓊脂的質(zhì)量和氣溫的不同而有所不同。由于這種培養(yǎng)基多用于培養(yǎng)細(xì)菌,因此,要用稀酸或稀堿將其pH調(diào)至中性或微堿性,以利于細(xì)菌的生長繁殖。LB培養(yǎng)基的配方如下:酵母提取物5g蛋白胨10gNaCl5g瓊脂15~20g水1000mLpH7.4~7.6三、實(shí)驗(yàn)設(shè)備試管,三角燒瓶,燒杯,量筒,玻棒,培養(yǎng)基分裝器,天平,牛角匙,高壓蒸汽滅菌鍋,pH試紙(pH5.5~9.0),棉花
3、,牛皮紙,記號筆,麻繩,紗布等。四、實(shí)驗(yàn)試劑酵母提取物,蛋白胨,NaCl,瓊脂;1molLNaOH,1molLHCl;五、操作步驟1稱量按培養(yǎng)基配方比例依次準(zhǔn)確地稱取酵母提取物、蛋白胨、NaCl放入燒杯中。蛋白胨很易吸潮,在稱取時(shí)動(dòng)作要迅速。另外,稱藥品時(shí)嚴(yán)防藥品混雜,一把牛角匙用于一種藥品,或稱取一種藥品后,洗凈、擦干,再稱取另一藥品,瓶蓋也不要蓋錯(cuò)。38擱置斜面將滅菌的試管培養(yǎng)基冷至50℃左右,將試管棉塞端擱在玻棒上,擱置的斜面長度
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