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1、理論塔板數(shù)1、定義理論塔板數(shù)(theeticalplatenumber)N,色譜的柱效參數(shù)之一用于定量表示色譜柱的分離效率(簡(jiǎn)稱柱效)。N取決于固定相的種類、性質(zhì)(粒度、粒徑分布等)、填充狀況、柱長(zhǎng)、流動(dòng)相的種類和流速及測(cè)定柱效所用物質(zhì)的性質(zhì)。如果峰形對(duì)稱并符合正態(tài)分布,N可近似表示為:理論塔板數(shù)=5.54(保留時(shí)間半高峰寬)2柱效率用理論塔板數(shù)定量地表示:N=16(tw)2。其中,t是溶質(zhì)從進(jìn)樣到最大洗脫峰出現(xiàn)的時(shí)間,w為該溶質(zhì)的洗脫
2、峰在基線處的寬度。在一色譜柱中用相同的洗脫條件時(shí)候,不同化合物的滯留時(shí)間與其洗脫峰寬度之比接近常數(shù)。因此理論塔板數(shù)大的色譜柱效率高。當(dāng)然,N的大小和柱子長(zhǎng)度有密切關(guān)系:理論塔板高度H=柱長(zhǎng)N,用H可以衡量單位長(zhǎng)度的色譜柱的效率,H越小,則色譜柱效率越高。N為常量時(shí),W隨tR成正比例變化。在一張多組分色譜圖上,如果各組份含量相當(dāng),則后洗脫的峰比前面的峰要逐漸加寬,峰高則逐漸降低。長(zhǎng)時(shí)間在緩沖溶液中使用和進(jìn)樣,將導(dǎo)致色譜柱離子交換能力下降,
3、用稀酸緩沖溶液沖洗可以使陽(yáng)離子柱再生,反之,用稀堿緩沖溶液沖洗可以使陰離子柱再生。另外,還可以選擇能溶解柱內(nèi)污染物的溶劑為流動(dòng)相做正方向和反方向沖洗,但再生后的色譜柱柱效是不可能恢復(fù)到新柱的水平的。如果柱子裝反了可以調(diào)回來(lái),但可能會(huì)造成柱內(nèi)擔(dān)體塌陷,在不得已的情況下盡量不要反裝色譜柱。提問(wèn)一:塔板理論困惑?(塔板數(shù)和峰寬有關(guān),當(dāng)進(jìn)樣濃度變化時(shí),峰寬變嗎?)回答:樓1:iginallypostedby605108287at20120221
4、1655:保留時(shí)間不變,峰高變高,峰寬變寬。辯論樓1:峰寬變了,由塔板理論得出塔板數(shù)也變大,難道塔板數(shù)會(huì)隨濃度變化而變化?一個(gè)柱子的塔板數(shù)不但和樣品有關(guān),還和樣品的濃度有關(guān)?樓2:iginallypostedbyyinyao2300at201202221231:提到色譜柱,就要引入VanDeemter方程了,流速一定,理論塔板高越低,柱效越高。理論塔板數(shù),決定了色譜柱上的保留情況,可以說(shuō)是理論塔板數(shù)越多,峰越窄。理論塔板數(shù)是不會(huì)隨濃度變
5、化而變化的,只是你可以從峰的寬窄上面看出柱效的高低。辯論樓2:塔板理論有缺陷,不能說(shuō)明流速對(duì)其影響。但是如果塔板數(shù)和濃度沒(méi)關(guān)系的話,那么1ng和1mg的同一樣品是否有同樣的峰寬,只是峰高不同。樓3:iginallypostedbyyinyao2300at201202222119:個(gè)人覺(jué)得如果你是真的在乎實(shí)踐中的樣品不同濃度的峰寬的話,你應(yīng)該將色譜柱的因素考慮進(jìn)去,比如填料,鍵合相。你將理論帶入實(shí)際中也應(yīng)該考慮實(shí)際中能否達(dá)到理論的要求。辯
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