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1、(一)過(guò)碘酸希夫氏染色(PAS染色)PAS染色可以顯示腎小球內(nèi)的細(xì)胞增生、浸潤(rùn)和系膜基質(zhì)等,并能很好的顯示基底膜,是顯示糖原和糖蛋白的基本染色。1.需要試劑2.具體染色步驟(1)切片常規(guī)脫蠟入水。(2)入1%過(guò)碘酸氧化10~15min,水洗。(3)入schiff氏液染10~30min,水洗。(4)蘇木素染細(xì)胞核1~2min,水洗。(5)入1%鹽酸乙醇分化數(shù)秒,水洗。(6)氨水返藍(lán)數(shù)秒,水洗。(7)流水沖洗,鏡下觀察細(xì)胞核成藍(lán)色,基底膜染
2、成粉紅色。(8)梯度乙醇脫水、二甲苯透明、樹(shù)膠封片。3.染色結(jié)果PAS陽(yáng)性物質(zhì)(多糖和糖原)呈紅色,核呈藍(lán)色。4.注意事項(xiàng)(1)組織切片的脫蠟步驟應(yīng)徹底,否則組織無(wú)法著色。(2)Schiff氏液染色的時(shí)間需嚴(yán)格控制。時(shí)間過(guò)長(zhǎng)標(biāo)本基底膜著色太深,時(shí)間過(guò)短標(biāo)本基底膜著色淡。(3)入1%鹽酸乙醇分化時(shí)間要短,時(shí)間長(zhǎng)容易使標(biāo)本褪色。染色時(shí)間長(zhǎng),反則需染色時(shí)間短。入六胺銀液染色的時(shí)間需嚴(yán)格控制。時(shí)間過(guò)長(zhǎng)基底膜著色過(guò)深,時(shí)間過(guò)短基底膜著色淡。(3)
3、2%氯化金分化時(shí)間要短,時(shí)間長(zhǎng)容易使銀染褪色。(4)染色后的組織切片要將組織四周的污染物痕跡擦掉。(三)馬松染色(Masson染色)Masson染色能顯示各部位的免疫復(fù)合物,腎小球硬化和腎小管纖維化程度。1.需要試劑①蘇木素染液;②氨水;③Masson液;④1%亮綠液。2.具體操作步驟(1)石蠟常規(guī)脫蠟入水。(2)媒染劑(10%重鉻酸鉀、10%三氯醋酸等量混合)染10~30min,水洗。(3)蘇木素染細(xì)胞核1~2min,水洗。(4)入1
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